GSK2110183

GSK2110183 是一个口服有效的,ATP 竞争性的选择性 pan-Akt 抑制剂,作用于 Akt1/Akt2/Akt3,Ki 值分别为 0.08/2/2.6 nM。

研究领域 >> 癌症

Akt1:0.08 nM (Ki)

Akt2:2 nM (Ki)

Akt3:2.6 nM (Ki)

Akt1 E17K mutant:0.2 nM (IC50)

PKG1α:0.9 nM (IC50)

PKA:1.3 nM (IC50)

PKG1β:4 nM (IC50)

ROCK:100 nM (IC50)

PKCη:210 nM (IC50)

P70S6K:251 nM (IC50)

RSK1:316 nM (IC50)

PKCβ1:430 nM (IC50)

PKCθ:510 nM (IC50)

GSK2110183是一种ATP竞争性,时间依赖性和完全可逆的Akt激酶家族抑制剂。 GSK2110183对Akt1,Akt2和Akt3的Ki分别为0.08,2和2.6nM。 GSK2110183在标准激酶测定中抑制E17K Akt 1突变蛋白的激酶活性,EC50为0.2 nM [1]。

携带BT474乳腺肿瘤异种移植物的小鼠口服给予载体或GSK2110183,每天10,30或100mg/kg,持续21天,分别产生8,37和61％TGI。小鼠耐受GSK2110183,在给药5天后报告体重减轻1-3％,其在研究过程中恢复。探索具有Akt途径活化的其他肿瘤异种移植模型以进一步证明化合物功效。用GSK2110183以10,30和100mg/kg处理的小鼠分别导致SKOV3异种移植物的23％,37％和97％TGI [1]。

测量化合物对Akt酶的效力。由于GSK2110183和GSK2141795是Akt的3种同种型的高效抑制剂，因此最初使用过滤器结合分析在低酶浓度（0.1nM Akt1,0.7nM Akt2和0.2nM Akt3）下测定抑制剂的真实效力（Ki）。然后通过进度曲线分析确认。在过滤器结合测定中，将酶加抑制剂的预混合物温育1小时，然后加入GSKα肽（Ac-KKGGRARTSSFAEPG-酰胺）和[γ33P] ATP。 2小时后终止反应，并将放射性标记的Akt肽产物捕获在磷酸纤维素滤板中。进展曲线分析利用Sox-Akt-tide底物（Ac-ARKRERAYSF-d-Pro-Sox-Gly-NH2）[1]对产物形成进行连续实时荧光检测。

细胞系通常在含有10％FBS的RPMI 160培养基中生长。一些细胞系在供应商指定的培养基中生长。使用CellTiter-Glo进行3天增殖测定以测量化合物在0-30μM下的生长抑制。相对于未处理（DMSO）对照确定细胞生长。在Assay Client应用[1]中使用4-或6参数拟合算法从抑制曲线计算EC50。

小鼠[1]通过将细胞（SKOV3，CAPAN-2和HPAC）或肿瘤片段（BT474）皮下注射到6-8周雌性无胸腺裸鼠（SKOV3）和SCID（所有其他）小鼠中来启动肿瘤。一旦肿瘤达到120和300mm 3之间，根据肿瘤体积将小鼠随机分成每次治疗n = 7-10只小鼠的组。每天通过口服强饲法以各种剂量施用GSK2110183（每天10,30或100mg / kg，持续21天）和GSK2141795。在组合实验中，还通过口服强饲法每日施用GSK1120212。每周测量肿瘤体积和体重两次，用卡尺测量肿瘤体积并计算。

[1]. Dumble M, et al. Discovery of novel AKT inhibitors with enhanced anti-tumor effects in combination with the MEK inhibitor. PLoS One. 2014 Jun 30;9(6):e100880.

4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基亚磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑 | MK-2206 2HCl | 2-氨基-6-氯-alpha-氰基-3-(乙氧羰基)-4H-1-苯并吡喃-4-乙酸乙酯 | Capivasertib (AZD5363) | 和厚朴酚 | 1,3-二氢-1-[1-[4-(6-苯基-1H-咪唑并[4,5-g]喹喔啉-7-基)苯基甲基]-4-哌啶基]-2H-苯并咪唑-2-酮(AKT抑制剂VIII) | Ipatasertib | 土大黄甙 | Uprosertib | 1,3-二咖啡酰奎宁酸 | TIC10 | 曲西立滨 | Perifosine (KRX-0401) | Afuresertib | (ALPHAS)-ALPHA-[[[5-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-3-吡啶基]氧基]甲基]-(S)-1H-吲哚-3-乙胺