N-Aminofluorescein

N-氨基荧光素是一种螺旋形荧光素酰肼,是一种高选择性、高灵敏度的Cu2+荧光探针。N-氨基荧光素对其他常见金属离子没有选择性荧光反应,可用于在λex/em=495/516 nm的生物体系中直接检测Cu2+[1][2]。

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指南(以下是我们推荐的方案。该方案仅提供指南,应根据您的具体需要进行修改)。N-氨基荧光素由荧光素部分和酰肼基组成,用于识别和结合Cu2+,可以促进酰胺的水解[1]。N-氨基荧光素(FG)对Cu2+具有选择性,在含Cu2+的70%HEPES水缓冲溶液(pH 7.4)中,在632 nm和515 nm处显示吸收和发射带[2]。指南(以下是我们推荐的方案。该方案仅提供指南,应根据您的具体需要进行修改)。Cu2+测定的一般程序[1]：1.在乙醇中制备1.0mM螺旋形荧光素酰肼贮备液；2.在0.01 M Tris-HCl缓冲液(pH 7.2)中与10μM N-氨基荧光素进行荧光反应；3.加入适量最终Cu2+浓度不超过10μM的样品溶液,并用0.01 M Tris-HCl缓冲液(pH 7.2)调节最终体积10 mL；4.2小时后,将3-mL溶液转移至1cm石英池中,并在室温下测量荧光强度/光谱,λex/em=495/516 nm,激发和发射狭缝宽度均为5 nm；5.同时,制备不含Cu2+的空白溶液,并在相同条件下进行测量以进行比较。

[1]. Chen X, et al. A selective fluorescence-on reaction of spiro form fluorescein hydrazide with Cu(II). Anal Chim Acta. 2006 Aug 11;575(2):217-22.

[2]. Uzra Diwan, et al. A water compatible turn ‘on’ optical probe for Cu2+ based on a fluorescein-sugar conjugate. Sensors and Actuators B: Chemical. 2014;196:345-351.