BCECF, AM pH荧光探针

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更新时间： 2025-07-30 11:02:31

CAS号：117464-70-7

常用名： BCECF-AM

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产品描述

BCECF, AM是一种检测细胞质pH值的荧光探针。具有细胞膜渗透性，进入细胞后被胞内酯酶水解生成BCECF，一种极性荧光衍生物从而被保留在细胞内。 BCECF在细胞内稳定，排出半衰期超过2小时。胞内pH测定通过比率成像实现，通过确定pH依赖性的发射光强度比率，使用荧光分光光度法或流式细胞仪检测皆可。

BCECF,AM主要用于哺乳动物细胞，也用于植物细胞、酵母等的细胞pH水平检测。
BCECF, AM还能用于包括钾离子在内的其他离子的胞内变化检测。

参数信息

英文名称：2′,7′-Bis(2-carboxyethyl)-5(6)-carboxyfluorescein acetoxymet
中文名称：2',7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基荧光素乙酰甲酯
CAS NO：117464-70-7
分子式：C40H36O19
分子量：820.70
闪点：85°C
沸点：692.41°C
密度：1.2837
状态：橙色固体
Ex/Em：503/528
溶解性：溶于乙腈，DMSO，DMF
纯度：≥95%
储存条件：-20℃避光干燥

体外研究

处理的细胞显示氢基因体，其电子密度沉积物以不同程度聚集。在某些情况下，在氢酶体内部可见染色。显微镜下还观察到，K+/H+离子载体尼日利亚菌素不抑制氢基因体装载BCECF-AM。ph敏感荧光染料测定细胞质ph值。在DMSO.2中配制2至20 mM的BCECF-AM原液。在缓冲溶液中制备5-50 μM BCECF-AM染料上样液。
3在细胞板中加入1000 μL/孔（6孔）、100 μL/孔（96孔）或25 μL/孔（384孔）的BCECF-AM上染液。将上染板在细胞培养箱中培养30-60分钟。洗净，用缓冲液替换染料上料液。通过在Ex/Em = 490/535 nm或430/535 nm处监测荧光来运行pH测定。

细胞实验

PASMCs被放置在层流细胞室中，灌注了pH调节到7.4的HBSS。pHi是用ph敏感荧光染料BCECF-AM的膜渗透形式在37°C、20%O2-5% CO2气氛下培养60分钟的细胞中测量的。然后用HBSS在37°C下洗涤细胞15分钟，以去除细胞外染料，并使胞质染料完全去酯化。BCECF荧光的比例测量是在一个工作站进行的，该工作站由Nikon TSE 100椭圆倒置显微镜组成，带有外延荧光附件。氙灯的光束在490 nm和440 nm处经过干涉滤光片过滤，通过20倍荧光物镜聚焦到PASMCS上进行检测。从细胞发射的530纳米的光通过物镜返回，并由成像相机检测。使用电子快门来减少染料的光漂白。pHi是根据每次实验后的现场校准估计的。细胞灌注含有（mM）： 105 KCl, 1 MgCl2, 1.5 CaCl2, 10葡萄糖，20 HEPES-Tris和0.01尼日利亚菌素的溶液，以使pHi与外部ph平衡。当pHi用KOH从6.5调整到7.5时，通过荧光测量产生两点校准。细胞内H+离子浓度（[H+]i）由pHi计算，公式为pHi = - log （[H+]i）。

供应商信息：

公司名：西安强化生物科技有限公司

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西安强化生物科技有限公司位于陕西省西安市未央区，是一家专注于生物科技研发与产业化的高新技术企业。公司扎根十三朝古都深厚的科技文化土壤，秉承“质量第一，信誉至上”的核心方针，依托由多名博士组建的专业研发团队，系统掌握组合化学、超低温合成、手性合成及分离、固相合成等八大核心技术体系，为全球制药及生物医药企业提供从克级到公斤级的产品定制开发、工艺优化及质量检测服务。

公司以合成技术创新为驱动，构建覆盖高温高压反应、微波合成、平行合成等先进技术的研发平台，实现从实验室研发到规模化生产的全流程规范化管理。立足西安科教资源优势，与西安交通大学、西北大学等高校建立技术协作，深度融合产学研资源，致力于解决药物合成、生物催化等领域的技术瓶颈，以专业严谨的服务推动行业高质量发展，践行“科技赋能医药未来”的企业使命。

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