【NSC 23766】- 作用 - 生物活性 - 靶点活性

NSC 23766，CAS号是1177865-17-6，是Rac GTP酶的抑制剂，靶向GEF的Rac活化（IC50：~50μM）; 对密切相关的靶标RhoA或Cdc42没有抑制作用。那么它的生物活性是什么？如何做实验呢？下面让小编给您详细说明。

首先我们介绍NSC 23766的生物活性：

1）体外活性
NSC23766被确定为适合已知对GEF规范至关重要的Rac1表面凹槽。NSC23766以剂量依赖性方式有效抑制Rac特异性GEF Trio或Tiam1对Rac1的结合和活化，而不会干扰其相应的GEF或Rac1与BcrGAP或效应物PAK1相互作用的密切相关的Cdc42或RhoA结合或激活。[1] NSC 23766在调节细胞骨架上的Rac GTP酶功能和许多细胞功能方面具有活性，包括细胞周期，细胞生长，粘附，迁移和基因转录。

NSC 23766（50μM）有效阻断血清或血小板衍生的生长因子诱导的Rac1激活和片状伪足的形成，而不影响NIH 3T3细胞中内源性Cdc42或RhoA的活性。NSC 23766降低Trio或Tiam1但不降低Vav，Lbc，Intersectin或组成型活性Rac1突变体刺激的NIH 3T3细胞生长并抑制Trio，Tiam1或Ras诱导的细胞转化。NSC23766剂量依赖性地抑制PC-3细胞增殖和不依赖贴壁的生长。25μMNSC23766通过Matrigel抑制PC-3细胞侵袭85％。[1]

50μMNSC23766抑制凝血酶诱导的人血小板中Rac1和Rac2的活化，以及血小板聚集。[2] NSC23766可预防swAPP-HEK293细胞中Aβ40和Aβ42的产生，而不影响Notch和sAPPα。NSC23766可防止细胞内γ-分泌酶活性，但不能作为直接γ-分泌酶抑制剂。NSC23766剂量依赖性地降低分泌的和细胞内Aβ40的水平，IC50为48.94μM。50μMNSC23766抑制Aβ42的释放57.97％。[3] NSC23766调节内皮细胞一氧化氮合酶表达和内皮功能。100μMNSC23766在牛主动脉EC中抑制eNOS启动子活性60％，在bEND.3细胞中抑制30％至35％。用NSC23766抑制Rac1使eNOS mRNA不稳定并将其半衰期缩短至17小时。NSC23766剂量依赖性地减弱ACh诱导的野生型小鼠主动脉环的松弛。[4]

NSC23766抑制细胞生长并诱导细胞凋亡。NSC23766以剂量依赖性方式降低MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞活力，IC50为~10μM，这与雌激素受体（ER），孕酮受体（PR），Her2的状态无关，和p53突变。NSC23766对MCF12A正常乳腺上皮细胞的存活几乎没有影响。暴露于NSC 23766 24小时后，MDA-MB-231细胞在G1期显示从41％增加至65％，并且伴随S和G2-M期的减少。100μMNSC23766诱导凋亡MDA-MB-468增加6倍。NSC23766对乳腺癌细胞中细胞周期停滞或凋亡的抑制是通过下调细胞周期蛋白D1，生存素和X连锁的蛋白质凋亡抑制剂来介导的。[5]

2）体内活性
NSC23766诱导造血干细胞/祖细胞的动员。在“动员不良”的C57Bl / 6小鼠品系中腹膜内施用NSC23766（2.5mg / kg）导致注射后6小时循环的造血干细胞/祖细胞增加两倍。[2] NSC23766减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤。用1或3mg / kg的NSC23766治疗不仅可以减少炎症细胞的浸润和MPO活性，还可以抑制促炎介质，肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β，mRNA的表达。NSC23766还可以减少LPS攻击肺中伊文思蓝和白蛋白的积累。[6]

我们已经了解了NSC 23766的生物活性，接下来如何做活性实验呢？一般来说，有如下的三种方法：

1）细胞实验
将细胞（1.5×10 4 / mL）接种在96孔组织培养板的每个孔中，用200μL培养基。铺板24小时后，用200μL含有指定浓度的NSC23766的新鲜培养基替换培养基。在处理期结束时，向每个孔中加入20μLMTS溶液并在37℃下孵育2小时。在96孔板读数器上读取490nm处的吸光度。

2）动物实验
Balb / c对照和NOD小鼠在7周龄时分成四组（n = 8 /组）。在8周龄时，两组实验动物（Balb / c和NOD）接受NSC23766（2.5mg / kg /天，ip /每天）和另外两组，其作为对照Balb / c和NOD小鼠并且接受相等的体积的生理盐水。每周监测体重和血糖，持续34周。

3）激酶实验
在蛋白酶和磷酸酶抑制剂存在下将腰部增大的新鲜脊髓组织匀浆并用缓冲液裂解。在4℃下以12,000×g离心5分钟后，收集上清液并与PAK-PBD珠子在4℃下在旋转器上孵育1小时，然后通过以5000×g离心3小时沉淀珠子。最低温度为4°C。将得到的沉淀重悬于LaemmLi缓冲液中并煮沸2分钟。对珠子样品进行Western印迹分析。每个样品中的总Rac1也通过Western印迹分析确定。

今天介绍了NSC 23766的作用，并且详细地说明了它的生物活性和实验方法。综上所述，NSC 23766是 Rac1 激活的抑制剂。它的靶点活性是Rac GTPase,50μM。

您可能想了解NSC 23766的物理化学性质https://www.chemsrc.com/cas/1177865-17-6_452613.html。如果您有其他资讯方面的需求，请和化源网联系。

参考文献：
1. Gao Y, et al. Proc Natl Acad Sci U S A, 2004, 101(20), 7618-7623.
2. Akbar H, et al. Methods Enzymol, 2006, 406, 554-565.
3. Désiré L, et al. J Biol Chem, 2005, 280(45), 37516-3
4. Sawada N, et al. Circ Res, 2008, 103(4), 360-368.
5. Yoshida T, et al. Mol Cancer Ther, 2010, 9(6), 1657-1668.
6. Yao HY, et al. Biochim Biophys Acta, 2011, 1810(7):666-674.