鲁索利替尼磷酸盐的生物活性

鲁索利替尼磷酸盐是第一个有效的 JAK1/2 抑制剂，IC50 值为 3.3 nM/2.8 nM，对 JAK1/2 的亲和力是对JAK3的 130 多倍。它的靶点活性为JAK1,3.3nM，JAK2,2.8nM。

一、鲁索利替尼磷酸盐的生物活性详解：
1）体外活性
鲁索利替尼（INCB018424）有效且选择性地抑制JAK2V617F介导的信号传导和增殖。 鲁索利替尼抑制HEL细胞的生长，EC50为186 nM。 鲁索利替尼显着增加Ba / F3-EpoR-JAK2V617F细胞系统的凋亡，并抑制原发性MPN患者样本中的造血祖细胞增殖[1]。
2）体内活性
鲁索利替尼（180 mg / kg，p.o。）可降低接种JAK2V617F表达细胞的小鼠的肿瘤负荷，而不会引起贫血或淋巴细胞减少[1]。

二、鲁索利替尼磷酸盐的生物活性实验方法：
1）细胞实验
将细胞以2000 /孔接种白底96孔板，用来自DMSO原液的化合物（0.2％最终DMSO浓度）处理，并在37℃下用5％CO 2温育48小时。 通过使用Cell-Titer Glo荧光素酶试剂或活细胞计数的细胞ATP测定来测量活力。 将值转化为相对于载体对照的抑制百分比，并使用PRISM GraphPad根据数据的非线性回归分析拟合IC 50曲线。

2）动物实验
给小鼠喂食标准啮齿动物食物并随意提供水。 将Ba / F3-JAK2V617F细胞（每只小鼠105只）静脉内接种到6至8周龄雌性BALB / c小鼠中。 每天监测生存情况，并且死亡的垂死小鼠被人道杀死并且被认为已经死亡。 用载体（5％二甲基乙酰胺，0.5％甲基纤维素）或鲁索利替尼（INCB018424）处理在细胞接种后24小时内开始，每天两次通过口服强饲法。 使用分析的Bayer Advia120测量血液学参数，并使用Dunnett测试确定统计学显着性。

参考文献：
[1]. Quintas-Cardama A, et al. Preclinical characterization of the selective JAK1/2 inhibitor INCB018424: therapeutic implications for the treatment of myeloproliferative neoplasms. Blood, 2010, 115(15), 3109-3117.
[2]. Fleischman AG, et al. The CSF3R T618I mutation causes a lethal neutrophilic neoplasia in mice that is responsive to therapeutic JAK inhibition. Blood. 2013 Nov 21;122(22):3628-31.
[3]. de Bock CE, et al. HOXA9 Cooperates with Activated JAK/STAT Signaling to Drive Leukemia Development. Cancer Discov. 2018 May;8(5):616-631.