3-双(2-羟乙基)氨基-2-羟基丙磺酸(CAS号:68399-80-4),简称BES(N,N-Bis(2-hydroxyethyl)-3-amino-2-hydroxypropanesulfonic acid),是一种重要的两性">
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3-双(2-羟乙基)氨基-2-羟基丙磺酸与其他物质的相容性好吗?

发布时间:2026-01-16 20:16:05 编辑作者:活性达人

3-双(2-羟乙基)氨基-2-羟基丙磺酸(CAS号:68399-80-4),简称BES(N,N-Bis(2-hydroxyethyl)-3-amino-2-hydroxypropanesulfonic acid),是一种重要的两性离子缓冲剂。它属于Good's缓冲剂家族,由Norman Good于1966年开发,主要用于生物化学和分子生物学领域的pH调控。其分子结构包含磺酸基(-SO₃H)、三级胺基(-N(CH₂CH₂OH)₂)和羟基(-OH),使之在生理pH范围内(pKa约为7.1-7.3)表现出优异的缓冲能力。

BES溶解度高,在水中可达1 M以上,常用于细胞培养、酶反应和蛋白质纯化等实验中。其低紫外吸收和对金属离子的低螯合性使其在光谱分析中特别受欢迎。然而,在实际应用中,BES与其他物质的相容性是关键因素,直接影响实验的稳定性和结果可靠性。下面从化学专业角度,分析BES与其他常见物质的相容性,包括兼容和不相容示例。

与水和溶剂的相容性

BES高度亲水,与水相容性极佳,可形成稳定的水溶液。在中性至弱碱性条件下(pH 6-8),其溶液透明无沉淀,适合作为缓冲体系的基础。

有机溶剂相容性:BES与低浓度极性溶剂如乙醇(<20% v/v)、DMSO(<10% v/v)和丙酮(<5% v/v)兼容,但高浓度有机溶剂可能导致BES沉淀或pH偏移。这是因为BES的磺酸基和羟基基团偏好氢键网络,而非有机环境。在脂质体或膜蛋白实验中,建议逐步添加溶剂并监测浊度。

注意事项:避免与非极性溶剂如氯仿或己烷混合,后者会使BES不溶,形成两相系统,干扰实验。

与无机盐和金属离子的相容性

BES的相容性在无机盐方面表现出色,这使其适用于生理盐水缓冲液(如PBS或HEPES类似体系)。

常见盐类:与NaCl、KCl、MgCl₂和CaCl₂等盐高度兼容。即使在0.5-1 M浓度下,BES溶液也不会发生离子对形成或沉淀。Na⁺、K⁺和Cl⁻离子对BES的pKa影响微小(<0.1单位),适合离子交换色谱应用。

金属离子:BES对过渡金属离子的螯合能力弱,与Fe³⁺、Cu²⁺、Zn²⁺等兼容性好,不易形成络合物。这不同于EDTA等强螯合剂。在酶学实验中,BES可维持金属酶的活性,而不会竞争配位位点。然而,高浓度重金属如Hg²⁺或Pb²⁺可能与BES的氮原子弱结合,导致溶液变色或活性降低。建议在含金属实验前,通过EDTA预处理去除污染物。

pH影响:在酸性条件下(pH <5),BES与某些盐(如磷酸盐)可能形成不溶性复合物;碱性条件下(pH >9),则与碳酸盐兼容性差,易产生CO₂泡腾。

与有机化合物和生物分子的相容性

BES设计用于生物体系,其与蛋白质、核酸和有机小分子的相容性优异。

蛋白质和酶:BES不与大多数蛋白质发生非特异性结合,渗透性低,适合蛋白质结晶和等电聚焦。实验显示,在50 mM BES缓冲液中,胰蛋白酶或溶菌酶活性保持>95%。它对巯基(-SH)基团温和,不像某些缓冲剂(如Tris)会氧化半胱氨酸残基。

核酸和脂质:与DNA/RNA兼容,不干扰氢键或磷酸骨架。在PCR或电泳中,BES可替代TAE缓冲液,提供更稳定的pH。脂质相容性好,用于脂质体制备,但避免与阳离子表面活性剂(如CTAB)混合,后者可能导致BES质子化并沉淀。

其他有机物:与还原剂如DTT或β-巯基乙醇兼容,用于维持还原环境。与氧化剂如H₂O₂兼容性中等;在低浓度(<1 mM)下无反应,但高浓度可能氧化BES的羟基,导致缓冲容量下降。苯酚或氯仿等提取剂不相容,会使BES乳化或降解。

药物和表面活性剂:BES与非离子表面活性剂(如Triton X-100)高度兼容,用于细胞裂解。但与SDS(十二烷基硫酸钠)在高浓度下可能形成混浊溶液,因为SDS的负电荷与BES的磺酸基静电排斥。

潜在不相容性和风险管理

尽管BES总体相容性良好,但以下情况需警惕:

强酸/强碱:与HCl或NaOH等不兼容。高浓度酸会完全质子化BES,导致磺酸基解离并沉淀;强碱则使之高度解离,增加粘度。pH调整应使用稀溶液逐步添加。

氧化剂和光敏性:长期暴露于光或空气中,BES可能缓慢氧化。建议避光储存,并与抗氧化剂如维生素C兼容使用。

温度和浓度效应:在>50°C或<0°C下,BES与某些盐(如硫酸盐)相容性下降,可能结晶。推荐工作浓度20-100 mM。

毒性和环境:BES低毒(LD50 >2000 mg/kg),但废液中避免与重金属混合,以防环境积累。

应用建议

在化学专业中,当从业人员选择并应用BES时,应注意其广谱相容性,但需根据具体实验定制。例如,在制药合成中,BES可作为绿色缓冲剂替代磷酸盐,避免钙磷沉淀问题。实验前,进行小规模兼容性测试(如Turbidimetry浊度测量)是专业实践。

总之,3-双(2-羟乙基)氨基-2-羟基丙磺酸的相容性优秀,尤其在生物和水溶液体系中,但需注意pH、浓度和特定反应基团的相互作用。通过理性设计,BES可显著提升实验效率和可靠性。


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