西地尼布_作用_生物活性_靶点活性
发布时间：2018-11-13 22:59:53 编辑作者：活性达人
图片：西地尼布结构式
西地尼布（AZD2171）是体外重组KDR酪氨酸激酶的高效（IC50<1nmol/L）ATP竞争性抑制剂，也抑制Flt1/4（IC50：5nM/≤3nM），对PDGFRβ和c具有相似的活性。-Kit，对于VEGFR，对HUVEC细胞中的PDGFR-α（36倍），CSF-1R（110倍）和Flt3（1000倍）的选择性更高。那么它的生物活性是什么？如何做实验呢？下面让小编给您详细说明。
首先我们介绍西地尼布的生物活性：
1）体外活性
在体外，西地尼布（微摩）可直接抑制肿瘤细胞增殖。它阻断细管产生，且对体内VEGF诱导的血管生成有抑制作用。在人脐静脉内皮细胞中，西地尼布抑制VEGF刺激的增殖和KDR磷酸化，IC50值分别为0.4和0.5nM。在血管发芽的成纤维细胞/内皮细胞共培养模型中，西地尼布还减少血管面积，长度和亚纳摩尔浓度下的分支[1]。
西地尼布对bFGF（IC50：0.5μM）和EGF（IC50：0.11μM）有抑制作用。在MG63细胞系中，西地尼布抑制PDGF-AA（IC50：0.04μM），还抑制Flt-1相关激酶（IC50：5nM），还对VEGF-C和VEGF-D受体Flt-4有抑制作用（IC50<3nM）。此外，西地尼布对c-Kit（IC50：2nM）和PDGFR-β（IC50：5nM）酪氨酸激酶有抑制作用。
2）体内活性
西地尼布对人类移植瘤模型具有十分有效的作用且有剂量依赖性。此外，它可使人肺癌移植瘤血管衰退；使骨骼过度生长，对卵巢中黄体的产生具有阻碍作用，并抑制依赖于血管生成的生理程序。
每日一次口服西地尼布可消除实验性（VEGF诱导的）血管生成，并抑制卵巢中的骨内或黄体发育中的软骨内骨化;生理过程高度依赖于新血管形成。在无胸腺小鼠中建立的人肿瘤异种移植物（结肠，肺，前列腺，乳腺和卵巢）的生长受到西地尼布的剂量依赖性抑制，长期施用1.5mg/kg/天在所有模型中产生统计学上显着的抑制。用西地尼布治疗的Calu-6肺肿瘤的组织学分析显示，52小时内微血管密度降低，随着治疗持续时间逐渐变大。这些变化表明肿瘤内的血管退化[1]。
我们已经了解了西地尼布的生物活性，接下来如何做活性实验呢？一般来说，有如下的三种方法：
1）动物实验
大鼠：年轻雌性AlderleyPark大鼠（6周龄，Wistar衍生，n=5）口服给药，每天一次，用西地尼布（1.25-5mg/kg/天）或载体治疗28天。将另外的大鼠（每组5只）用西地尼布（5mg/kg/天）或媒介物处理28天，并且在没有治疗的情况下再维持28天，以检查化合物戒断的效果。股骨关节和卵巢的组织学石蜡切片用H＆E染色。进行股骨胫骨切片的形态学图像分析，将来自每个关节中的股骨和胫骨的生长板区域组合以分析化合物治疗的效果。H＆E染色的卵巢切片中黄体的面积类似地通过形态测定分析确定[1]。
小鼠：选择携带已建立的Calu-6人肺肿瘤异种移植物（0.2±0.01cm3）的小鼠（第0天）并用西地尼布（6mg/kg，每天，p.o。）或载体长期治疗。在第1天，第2天，第7天，第14天和第21天，在最后一剂西地尼布或载体后4小时收集肿瘤（每组6-15个）。然后使用发色团终点或荧光免疫染色在切片中检测CD31[1]]。
2）细胞实验
通过在4天孵育期后测量3H-胸苷掺入，在存在和不存在生长因子的情况下评估HUVEC细胞系的增殖。通过PDGF-AA诱导MG63骨肉瘤细胞的增殖，其选择性地激活PDGFRα同型二聚体的信号传导。将HUVEC和MG63骨肉瘤细胞在不含酚红的DMEM中培养24小时，所述酚红色含有1％活性炭剥离的FCS，2mM谷氨酰胺和1％非必需氨基酸。向西地尼布或载体中加入PDGF-AA配体（50ng/mL）并将板再孵育72小时。使用溴脱氧尿苷ELISA测定细胞增殖。
3）激酶实验
激酶抑制：将西地尼布以10mM的浓度溶解在DMSO中。所有酶测定均在ATP的相应Km（0.2-30μM）下或仅在其下方进行。针对一系列重组酪氨酸激酶[KDR，Flt-1，Flt-4，c-Kit，PDGFRα，PDGFRβ，CSF-1R，Flt-3，FGFR1，Src，Abl，表皮生长因子）测定西地尼布的抑制活性。受体（EGFR），ErbB2，AuroraA和AuroraB]使用ELISA。使用与视网膜母细胞瘤基质和[γ-sup>33P]ATP的闪烁亲近测定来检查选择性与CDK2和CDK4丝氨酸/苏氨酸激酶的关系。将Cediranib的活性与MAPK激酶（MEK）进行比较，其显示出双重特异性。使用MAPK底物，[γ-33P]ATP和纸捕获/闪烁计数来确定。
今天介绍了西地尼布的作用，并且详细地说明了它的生物活性和实验方法。综上所述，西地尼布是高选择性，有口服活性的VEGFR2抑制剂，对Flt1，KDR，Flt4，PDGFRα，PDGFRβ，c-Kit的IC50值分别为小于1，小于3，5，5，36，2nM。西地尼布的靶点活性为c-Kit,2nM；PDGFRβ,5nM；VEGFR1/FLT1,5nM；VEGFR2/KDR,0.5nM；VEGFR3/FLT4,<=3nM。
您可能想了解西地尼布的物理化学性质https://www.chemsrc.com/cas/288383-20-0_894763.html。如果您有其他资讯方面的需求，请和化源网联系。
参考文献：
[1]. Wedge SR, et al. AZD2171: a highly potent, orally bioavailable, vascular endothelial growth factor receptor-2 tyrosine kinase inhibitor for the treatment of cancer. Cancer Res, 2005, 65(10), 4389-4400.
[2]. Zhang L, et al. Pleiotrophin promotes vascular abnormalization in gliomas and correlates with poor survival in patients with astrocytomas. Sci Signal. 2015 Dec 8;8(406):ra125.
首先我们介绍西地尼布的生物活性：
1）体外活性
在体外，西地尼布（微摩）可直接抑制肿瘤细胞增殖。它阻断细管产生，且对体内VEGF诱导的血管生成有抑制作用。在人脐静脉内皮细胞中，西地尼布抑制VEGF刺激的增殖和KDR磷酸化，IC50值分别为0.4和0.5nM。在血管发芽的成纤维细胞/内皮细胞共培养模型中，西地尼布还减少血管面积，长度和亚纳摩尔浓度下的分支[1]。
西地尼布对bFGF（IC50：0.5μM）和EGF（IC50：0.11μM）有抑制作用。在MG63细胞系中，西地尼布抑制PDGF-AA（IC50：0.04μM），还抑制Flt-1相关激酶（IC50：5nM），还对VEGF-C和VEGF-D受体Flt-4有抑制作用（IC50<3nM）。此外，西地尼布对c-Kit（IC50：2nM）和PDGFR-β（IC50：5nM）酪氨酸激酶有抑制作用。
2）体内活性
西地尼布对人类移植瘤模型具有十分有效的作用且有剂量依赖性。此外，它可使人肺癌移植瘤血管衰退；使骨骼过度生长，对卵巢中黄体的产生具有阻碍作用，并抑制依赖于血管生成的生理程序。
每日一次口服西地尼布可消除实验性（VEGF诱导的）血管生成，并抑制卵巢中的骨内或黄体发育中的软骨内骨化;生理过程高度依赖于新血管形成。在无胸腺小鼠中建立的人肿瘤异种移植物（结肠，肺，前列腺，乳腺和卵巢）的生长受到西地尼布的剂量依赖性抑制，长期施用1.5mg/kg/天在所有模型中产生统计学上显着的抑制。用西地尼布治疗的Calu-6肺肿瘤的组织学分析显示，52小时内微血管密度降低，随着治疗持续时间逐渐变大。这些变化表明肿瘤内的血管退化[1]。
我们已经了解了西地尼布的生物活性，接下来如何做活性实验呢？一般来说，有如下的三种方法：
1）动物实验
大鼠：年轻雌性AlderleyPark大鼠（6周龄，Wistar衍生，n=5）口服给药，每天一次，用西地尼布（1.25-5mg/kg/天）或载体治疗28天。将另外的大鼠（每组5只）用西地尼布（5mg/kg/天）或媒介物处理28天，并且在没有治疗的情况下再维持28天，以检查化合物戒断的效果。股骨关节和卵巢的组织学石蜡切片用H＆E染色。进行股骨胫骨切片的形态学图像分析，将来自每个关节中的股骨和胫骨的生长板区域组合以分析化合物治疗的效果。H＆E染色的卵巢切片中黄体的面积类似地通过形态测定分析确定[1]。
小鼠：选择携带已建立的Calu-6人肺肿瘤异种移植物（0.2±0.01cm3）的小鼠（第0天）并用西地尼布（6mg/kg，每天，p.o。）或载体长期治疗。在第1天，第2天，第7天，第14天和第21天，在最后一剂西地尼布或载体后4小时收集肿瘤（每组6-15个）。然后使用发色团终点或荧光免疫染色在切片中检测CD31[1]]。
2）细胞实验
通过在4天孵育期后测量3H-胸苷掺入，在存在和不存在生长因子的情况下评估HUVEC细胞系的增殖。通过PDGF-AA诱导MG63骨肉瘤细胞的增殖，其选择性地激活PDGFRα同型二聚体的信号传导。将HUVEC和MG63骨肉瘤细胞在不含酚红的DMEM中培养24小时，所述酚红色含有1％活性炭剥离的FCS，2mM谷氨酰胺和1％非必需氨基酸。向西地尼布或载体中加入PDGF-AA配体（50ng/mL）并将板再孵育72小时。使用溴脱氧尿苷ELISA测定细胞增殖。
3）激酶实验
激酶抑制：将西地尼布以10mM的浓度溶解在DMSO中。所有酶测定均在ATP的相应Km（0.2-30μM）下或仅在其下方进行。针对一系列重组酪氨酸激酶[KDR，Flt-1，Flt-4，c-Kit，PDGFRα，PDGFRβ，CSF-1R，Flt-3，FGFR1，Src，Abl，表皮生长因子）测定西地尼布的抑制活性。受体（EGFR），ErbB2，AuroraA和AuroraB]使用ELISA。使用与视网膜母细胞瘤基质和[γ-sup>33P]ATP的闪烁亲近测定来检查选择性与CDK2和CDK4丝氨酸/苏氨酸激酶的关系。将Cediranib的活性与MAPK激酶（MEK）进行比较，其显示出双重特异性。使用MAPK底物，[γ-33P]ATP和纸捕获/闪烁计数来确定。
今天介绍了西地尼布的作用，并且详细地说明了它的生物活性和实验方法。综上所述，西地尼布是高选择性，有口服活性的VEGFR2抑制剂，对Flt1，KDR，Flt4，PDGFRα，PDGFRβ，c-Kit的IC50值分别为小于1，小于3，5，5，36，2nM。西地尼布的靶点活性为c-Kit,2nM；PDGFRβ,5nM；VEGFR1/FLT1,5nM；VEGFR2/KDR,0.5nM；VEGFR3/FLT4,<=3nM。
您可能想了解西地尼布的物理化学性质https://www.chemsrc.com/cas/288383-20-0_894763.html。如果您有其他资讯方面的需求，请和化源网联系。
参考文献：
[1]. Wedge SR, et al. AZD2171: a highly potent, orally bioavailable, vascular endothelial growth factor receptor-2 tyrosine kinase inhibitor for the treatment of cancer. Cancer Res, 2005, 65(10), 4389-4400.
[2]. Zhang L, et al. Pleiotrophin promotes vascular abnormalization in gliomas and correlates with poor survival in patients with astrocytomas. Sci Signal. 2015 Dec 8;8(406):ra125.
相关化合物：西地尼布
上一篇：替沃扎尼的作用和生物活性