邻苯三酚，即1,2,3-三羟基苯，分子式C₆H₆O₃，又称焦性没食子酸。其苯环上三个相邻羟基构成一种高密度的给电子体系，使邻苯三酚同时具备强还原性和强金属配位倾向。在化学分析中，这一双功能特征被用于三个典型方向：碱性介质中的氧吸收、与三价铁离子的络合显色，以及以自氧化反应为探针的超氧化物歧化酶活性测定。三者的选择性均可在不同介质条件下得到精确控制，这正是邻苯三酚作为分析试剂的核心价值。
一、碱性邻苯三酚溶液在气体分析中的氧吸收作用
定量测定气体混合物中的氧气含量，经典方法是化学吸收法。使气体通过盛有碱性邻苯三酚溶液的吸收管，所减少的体积即为氧气体积。吸收液由邻苯三酚与氢氧化钾或氢氧化钠溶液配制。强碱环境使邻苯三酚的多个酚羟基去质子化，形成负电荷密度较高的酚氧负离子。这种物种具有极强给出电子的能力，能与溶解态分子氧迅速反应，自身被氧化为含醌和羰基的深色聚合产物，宏观上溶液从浅黄变为深褐棕色。
该过程本质上是气液吸收与氧化还原的耦合。氧分子从气相扩散进入液膜，与酚氧负离子碰撞后获得电子，被保留在液相产物中。反应生成的自由基中间体继续参与后续氧化，直至氧被几乎完全消耗。因此，该吸收剂对氧表现出高度专一的化学吸收能力。在实际气体分析流程中，二氧化碳同样能被碱液消耗，所以测定氧气前必须先让气体通过纯碱液吸收管除去CO₂，再进入邻苯三酚吸收管，随后读取气体体积差。这一流程保证了氧气体积读数的准确性。
该吸收体系也常用于实验室中保护对氧敏感的标准溶液。将碱性邻苯三酚溶液装置在密闭气体回路中，可去除痕量氧气，为曼氏定氮、极谱分析等需要惰性气氛的操作提供无氧通道。其吸收容量受邻苯三酚浓度与碱浓度共同决定，实际操作时需使邻苯三酚保持过量，以保证氧被完全俘获。
二、与三价铁离子的络合显色与铁的比色测定
邻苯三酚的相邻酚羟基能与Fe³⁺形成稳定的五元螯合环。由于1、2位和2、3位都能参与配位，体系中存在多种质子化状态，但在弱酸性条件下，主要形式是带正电荷的蓝紫色螯合物。该螯合物的特征吸收来自Fe³⁺与邻苯二酚基团之间的电荷转移跃迁。这一跃迁的能量跨越可见光的蓝绿色区域，因此透射光呈现为鲜明的蓝紫色。
该显色反应在无机分析中有两个用途。其一，作为Fe³⁺的灵敏定性试剂：在含Fe³⁺的试液中加入新配制的邻苯三酚水溶液，立即出现蓝紫色即表明存在三价铁。其二，利用该有色螯合物的吸光度定量测定铁。比色分析中，需向待测液加入过量邻苯三酚，并用缓冲液固定pH值。酸度不足时，邻苯三酚本身会被空气中的O₂氧化，导致空白值不断升高；酸度过高时，H⁺与Fe³⁺竞争酚氧负离子配位点，使显色强度降低。因此在固定酸度、固定反应时间的条件下，体系在显色波长处的吸光度与铁浓度保持确定的线性关系。
该显色机理在有机定性分析中同样成立。将FeCl₃溶液滴加到含邻苯三酚型多酚的样品中，会产生相同的蓝紫色配合物，这是一种专属性较强的酚类识别反应。由于邻苯三酚分子中含三个羟基，其与Fe³⁺发生多重配位，显色灵敏度明显高于单羟基酚类。
三、邻苯三酚自氧化法在超氧化物歧化酶活性测定中的应用
在pH 8.2的Tris-HCl缓冲液中，邻苯三酚发生自氧化，生成超氧阴离子O₂⁻和一系列具有共轭结构的黄色中间氧化产物。该自氧化反应伴随显著的吸光度上升，在325 nm波长附近的增加速度与超氧阴离子的产生速率呈比例。超氧化物歧化酶（SOD）催化O₂⁻歧化为H₂O₂与O₂，使反应体系中超氧阴离子浓度下降，邻苯三酚的自氧化链式反应受到抑制。
以此为基础建立测定方法时，先将未加酶的空白体系在325 nm处的自氧化速率控制在0.050～0.070 A/min范围内。随后将含有SOD的样品液加入同一体系，测定相同时间内吸光度的变化速率，计算相对空白速率的抑制率。按通用定义，抑制自氧化速率达50%时对应的酶量记为一个SOD活力单位。
邻苯三酚在碱性条件下的自氧化速率高度依赖温度、pH和邻苯三酚初始浓度，因此每次测定必须用空白体系标定标准速率。该方法的突出优点是无需使用黄嘌呤氧化酶等昂贵试剂，仅凭邻苯三酚与缓冲液即可建立稳定持续的O₂⁻来源。这一方法广泛用于动植物组织匀浆、红细胞抽提液、微生物培养物等样品的SOD活性检测，是生化分析与化学显色体系结合的典型范例。
结语
邻苯三酚在化学分析中的角色取决于介质条件：碱性环境中是强还原剂，用于氧吸收；弱酸性环境中是螯合配体，用于铁离子显色；严格pH控制下又是可控的自氧化探针，用于自由基酶学分析。同一种分子在氧化、配位、自氧化三条路径上各有精准用途，显示出邻苯三酚在分析化学中作为多功能显色剂和活性气体吸收剂的独特地位。