分子结构决定的碱性与非亲核性
N,N-二异丙基乙胺（CAS 7087-68-5），常用缩写 DIPEA，亦称 Hünig's base。分子式 C₈H₁₉N，结构为 CH₃CH₂N(CH(CH₃)₂)₂。氮原子连接一个乙基和两个异丙基，形成显著空间屏蔽。孤对电子可接受质子，使 DIPEA 成为有机可溶的叔胺碱；两个异丙基又阻碍氮原子与亲电中心发生亲核进攻。该结构使其在多肽合成中承担酸受体角色，同时降低对活性酯、卤代烷、苄基阳离子和活化羧酸中间体的副反应倾向。与三乙胺相比，DIPEA 的位阻更大，亲核性更低，适合需要长时间维持碱性和手性稳定的偶联体系。
偶联反应中的酸中和与氨基释放
多肽链延伸的关键步骤是羧酸与氨基形成酰胺键。Fmoc 或 Boc 策略中，氨基组分常以三氟乙酸盐、盐酸盐或质子化形式存在；羧酸在活化剂存在下形成活性酯。HBTU、HATU、COMU、DIC/HOBt 等体系会产生酸性苯并三唑组分、羧酸质子或铵盐。DIPEA 中和这些酸性物种，使氨基以游离碱形式参与亲核进攻，并维持活化酯处于有效浓度。缺少 DIPEA 时，质子化氨基无法有效进攻活性酯，羧酸活化平衡向水解方向移动，偶联收率下降。DIPEA 不直接进入肽键，而是通过酸碱平衡为酰胺化提供持续可用的反应环境。
对活性酯和手性中心的稳定作用
氨基酸活化后，α-碳上质子酸性增强，强碱会促进烯醇化并形成噁唑酮中间体，导致消旋。DIPEA 的碱性足以中和羧酸和酸性盐，其位阻和非亲核性又抑制对活性酯的进攻。该碱不会像 DBU 或碱性醇盐那样夺取 α-质子，也不会与 O-苯并三唑酯形成稳定的酰基铵副产物。因此，在 HBTU/HOBt、HATU/HOAt、DIC/HOBt 等偶联中，DIPEA 保护活性酯免遭酸催化水解，同时降低消旋比例，对含手性氨基酸的片段缩合具有关键价值。
固相多肽合成流程中的位置
Fmoc 固相合成中，哌啶脱除 Fmoc 后树脂氨基恢复亲核性，偶联液由 Fmoc-氨基酸、活化剂、DIPEA 和 DMF 或 NMP 组成。DIPEA 在此中和羧酸及活化剂副产物，保证树脂上的游离氨基完成酰胺化。Boc 固相合成中，TFA 脱保护产生铵盐，DIPEA 在偶联前中和树脂铵盐，使氨基恢复反应活性。封端步骤使用乙酸酐时，DIPEA 可作为碱中和乙酸并促进乙酰化。裂解步骤使用 TFA 时，DIPEA 不参与肽链释放，其残留通过 DMF、NMP、二氯甲烷洗涤去除。
与常规有机碱的工艺比较
三乙胺碱性与 DIPEA 接近，但亲核性更高，易与活化酯和卤代试剂发生副反应。N-甲基吗啉碱性较弱，对酸性盐的中和能力有限。DBU 和 DBN 碱性强，易造成 α-质子消旋和活性酯分解。DIPEA 在碱性、位阻和溶解性之间形成平衡，成为 HBTU、HATU、COMU、DIC/HOBt 等偶联体系的常用碱。其液态性质和有机溶剂互溶性使其在固相树脂孔道内扩散均匀，适合自动化多肽合成。
用量控制与工艺衔接
DIPEA 用量根据氨基盐、羧酸和活化剂体系确定。标准 HBTU/HOBt 偶联中，DIPEA 用量设定为氨基酸摩尔数的二至四倍，用于中和羧酸、酸性副产物和氨基盐。用量不足时偶联不完全，用量过高会提高体系碱性并增加消旋风险。偶联完成后，DMF/NMP 洗涤去除可溶性 DIPEA 盐，避免其影响后续脱保护、封端和裂解。在溶液相合成中，DIPEA 通过酸洗、碱洗或减压蒸馏去除，保证肽产物纯度。
结论
N,N-二异丙基乙胺在多肽合成中承担酸受体、氨基释放剂、活性酯保护剂和消旋抑制剂的多重功能。其分子结构提供足够碱性，同时以空间位阻压低亲核副反应。该试剂使 HBTU、HATU、COMU、DIC/HOBt 等活化体系在温和条件下高效完成酰胺化，并贯穿 Fmoc 与 Boc 固相合成、片段缩合和封端工艺。多肽合成的效率与手性纯度依赖于 DIPEA 对酸碱平衡和活性中间体的精细控制。