1111556-37-6

• 常用中文名：Takinib
• 常用英文名：Takinib
• CAS号：1111556-37-6
• 分子式：C₁₈H₁₈N₄O₂
• 分子量：322.36
• 相关类别： 信号通路 MAPK/ERK信号通路 MAP3K
• 发布时间：2018-02-16 17:53:02
• 更新时间：2024-01-02 10:14:13
• Takinib 是一种有效且有选择性的 TAK1 抑制剂，其 IC₅₀ 值为 9.5 nM。

名称

• 中文名: Takinib
• 英文名: Takinib

物化性质

• 分子式: C₁₈H₁₈N₄O₂
• 分子量: 322.36
• 外观性状: 粉末
• 储存条件: -20℃

生物活性

• 描述: Takinib 是一种有效且有选择性的 TAK1 抑制剂,其 IC50 值为 9.5 nM。
• 相关类别:
  信号通路 >> MAPK/ERK信号通路 >> MAP3K
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  TAK1:9.5 nM (IC50)

  IRAK4:120 nM (IC50)

  IRAK1:390 nM (IC50)

  GCK:430 nM (IC50)

  CLK2:430 nM (IC50)

  MINK1:1.9 μM (IC50)

• 体外研究: 在10mM时,Takinib对六种丝氨酸/苏氨酸激酶显示出显着的抑制活性(暴露后<10％酶活性),包括TAK1,IRAK4,IRAK1,GCK,CLK2和MINK1。分析显示,增加噻嗪的浓度导致Vmax降低,同时维持KM。当酶用5mM ATP活化3小时时,0,1,10,50和100nM Takinib达到相同的Vmax,并且这些浓度的KM增加,这意味着如果TAK1是TAK1,则Takinib是ATP竞争性抑制剂。 ATP已激活。重要的是,结果显示Takinib以相同的效力抑制活化和未活化的TAK1的功能。在Takinib存在下TNF-α刺激以剂量依赖性方式诱导MDA-MB-231细胞中的胱天蛋白酶活性,而未刺激的细胞不上调胱天蛋白酶活性。 Takinib显着降低磷酸化,但不影响总蛋白水平。 Takinib以剂量依赖性方式抑制IKK,MAPK 8/9和c-Jun的磷酸化。在TNF-α存在下治疗24小时后,羚牛显示在微摩尔浓度下几乎完全抑制IL-6分泌[1]。
• 激酶实验: 测量纯化的TAK1-TAB1蛋白的活性。简言之，将TAK1-TAB1（50ng /孔）与含有放射性标记的[32P] -ATP的5μMATP在300mM底物肽（RLGRDKYKTLRQIRQ）存在下在终浓度为40μL的缓冲液（含有）中温育。 50mM Tris pH 7.5,0.1mM EGTA，0.1％β-巯基乙醇，10mM乙酸镁，0.5mM MnCl）和所示化合物。将反应放置10分钟并用10μL浓H 3 PO 4终止反应。使用闪烁计数器测量剩余活性。剂量 - 反应曲线重复3次。对于动力学机理研究，实验重复两次并取平均值[1]。
• 细胞实验: 将MDA-MB-231细胞（1,000个细胞/孔）接种在96孔板中，其中含有10％FBS，5％Pen / Strep，4g / L葡萄糖DMEM培养基。 24小时后，将细胞用1％FBS，5％Pen / Strep，4g / L葡萄糖DMEM培养基血清饥饿4小时。在存在或不存在30ng /mLTNFα的情况下，用Takinib滴定处理细胞。处理后0小时和24小时的平板在除去培养基后在-80℃冷冻。 24小时后，向每个孔中加入100μLddH2 O并重新冷冻平板。将来自Hoechst原液的1μL[1mg / mL在1：4DMSO / H 2 O中]溶于1mL TNE缓冲液（10mM Tris，2M NaCl，1mM Na 2 EDTA）中，并向每个孔中加入100μL该溶液。 。荧光测定为355 / 460nm [1]。
• 参考文献:

  [1]. Totzke J, et al. Takinib, a Selective TAK1 Inhibitor, Broadens the Therapeutic Efficacy of TNF-α Inhibition for Cancer and Autoimmune Disease. Cell Chem Biol. 2017 Aug 17;24(8):1029-1039.