| 描述 |
LTX-401 是一种可靶向作用高尔基体 (Golgi apparatus) 的溶瘤氨基酸衍生物。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
Golgi apparatus[1].
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| 体外研究 |
LTX-401是一种溶瘤氨基酸衍生物,靶向高尔基体[2]。 LTX-401有效降低体外几种肿瘤细胞系的活力,对非恶性细胞系如HUV-EC-C内皮细胞,HaCat角质形成细胞和MRC-5成纤维细胞具有相似程度的细胞毒性。 LTX-401对人恶性黑素瘤细胞系MDA-MB-435S(13.5μM)显示出最高的细胞毒活性,并且对人肝细胞癌细胞系HEPG2(35.4μM)具有最低活性。对于剩余的细胞系,LTX-401表现出相似的IC50值,在19-32μM的范围内略有变化。使用诱导癌细胞系中细胞死亡所需的相同浓度,未观察到针对RBC的体外溶血活性。使用更高浓度的LTX-401(400μg/ mL =1087μM)观察到50％的溶血[1]。
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| 体内研究 |
大多数(9/11)动物在用LTX-401进行肿瘤内治疗后表现出完全和持久的肿瘤消退。在处理后第2天和第7天,用单次注射从处理组和对照组中的选定动物收集样品。用抗CD3抗体对肿瘤组织的免疫标记显示,大多数浸润细胞是CD3 + T细胞,而注射载体的肿瘤仅表现出具有活肿瘤组织的肿瘤,具有最小的坏死和很少的淋巴细胞[1]。
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| 细胞实验 |
MTT测定用于研究LTX-401对癌症和非恶性细胞系的选择的体外细胞毒性。将预培养的细胞以1×10 4 -1.5×10 4个细胞/孔的密度接种。 LTX-401对人红细胞（RBC）的细胞毒活性通过溶血测定来确定，所述溶血测定使用来自健康个体的新鲜分离的血液，所述血液给予其签署的知情同意书。将RBC重悬浮至10％血细胞比容溶液，然后在37℃下与溶解于PBS中的LTX-401以136-1358μM（50-500μg/ mL）的浓度温育1小时。仅含有PBS和1％Triton溶液的RBC分别作为阴性和阳性对照。将样品以4,000rpm离心5分钟后，在分光光度微量滴定板读数器上在405nm处测量上清液的吸光度[1]。
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| 动物实验 |
小鼠[1]使用5-6周龄的雌性C57BL / 6野生型小鼠。将所有动物饲养在同一房间和专门为小鼠设计的笼子（含2-5只小鼠）中，每天12小时/ 12小时，并允许随意获取高质量的食物和水。每周称重动物并每周监测几次，并且未观察到意外死亡。收获B16F1细胞，在无血清RPMI中洗涤，并在C57BL / 6小鼠（每只小鼠7.5×10 4 B16F1细胞/50μLRPMI-1640）内皮内（id）注射到腹部右侧。用LTX-401（5mg / mL）或媒介物（盐水）瘤内注射（20-30mm 2）可肿胀的肿瘤（连续三天）。根据人道终点对动物实施安乐死，例如体重减轻> 10％，一般身体不适或活动减少，严重肿瘤坏死或溃疡，或肿瘤大小超过130mm 2。使用颈椎脱位对所有动物实施安乐死[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Liv-Marie Eike, et al. The Cytolytic Amphipathic β(2,2)-Amino Acid LTX-401 Induces DAMP Release in Melanoma Cells and Causes Complete Regression of B16 Melanoma. PLoS One. 2016; 11(2): e0148980. [2]. Heng Zhou, et al. The oncolytic compound LTX-401 targets the Golgi apparatus. Cell Death Differ. 2018 Jan; 25(1): 227–228.
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