915759-45-4

• 常用中文名：WAY 316606
• 常用英文名：WAY 316606
• CAS号：915759-45-4
• 分子式：C₁₈H₁₉F₃N₂O₄S₂
• 分子量：448.48000
• 相关类别： 信号通路 干细胞及 Wnt 通路 SFRP-1
• 发布时间：2017-08-23 18:57:08
• 更新时间：2024-01-08 14:49:22
• WAY 316606 是一种分泌蛋白 sFRP-1 抑制剂,是分泌性醣蛋白 Wnt 的拮抗剂,在 FP 结合检测使用中,WAY-316606 作用于 sFRP-1,IC50 为 0.5 μM。

名称

• 中文名: WAY 316606
• 英文名: 5-(benzenesulfonyl)-N-piperidin-4-yl-2-(trifluoromethyl)benzenesulfonamide
• 英文别名: cs-0996; WAY 316606

物化性质

• 分子式: C₁₈H₁₉F₃N₂O₄S₂
• 分子量: 448.48000
• 精确质量: 448.07400
• PSA: 109.10000
• LogP: 5.44980
• 储存条件: 室温，避光，保存于惰性气体中

生物活性

• 描述: WAY 316606 是一种分泌蛋白 sFRP-1 抑制剂,是分泌性醣蛋白 Wnt 的拮抗剂,在 FP 结合检测使用中,WAY-316606 作用于 sFRP-1,IC50 为 0.5 μM。
• 相关类别:
  信号通路 >> 干细胞及 Wnt 通路 >> SFRP-1
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  IC50: 0.5 μM (sFRP-1)[1]

• 体外研究: WAY-316606对U2-OS细胞Wnt-荧光素酶活性的EC50为0.65μM[1]。 WAY-316606与分泌的卷曲相关蛋白(sFRP)-1抑制剂结合,KD为0.08μM,抑制sFRP-1,EC50为0.65μM。 WAY-316606也与sFRP-2结合,虽然KD为1μM时弱10倍。使用荧光偏振结合分析,其采用竞争结合形式的荧光探针化合物和纯化的人sFRP-1蛋白,WAY-316606的IC50为0.5μM[2]。
• 体内研究: 当在新生儿鼠颅骨测定中测试时,WAY-316606增加骨形成。 WAY-316606以剂量依赖性方式将总骨面积增加至60％,EC50为约1nM。 WAY-316606具有良好的水溶性,中度至低度抑制细胞色素p450同工酶(3A4,2D6,2C9),并且在大鼠和人肝微粒体中具有良好的稳定性(每个物种中t1/2> 60分钟)。在雌性Sprague-Dawley大鼠中,WAY-316606在单次静脉推注剂量(2 mg/kg)后表现出高血浆清除率(77 mL/min/kg,大于肝血流量),导致药物暴露迅速下降尽管有给药途径[2]。
• 激酶实验: 通过光谱法测定WAY-316606与纯化的sFRP的结合。将sFRP-1或-2储备溶液在缓冲溶液中稀释至1μM并测量初始荧光。将增加浓度的WAY-316606（0至50μM）加入到比色皿中的蛋白质中并孵育5分钟，然后使用Fluoromax-2荧光计评估荧光强度。在对照实验中，使用DMSO（载体对照）匹配的缓冲溶液。以比率模式（S / R，信号/参考）扫描荧光光谱，以补偿作为波长函数的灯输出的变化。将荧光变化拟合为二次方程以获得表观解离常数[2]。
• 细胞实验: U2OS骨细胞感染重组腺病毒5（Ad5）-WNT3，感染复数（MOI）为2，然后用Ad5-sFRP-1和Ad5-16xTCF-荧光素酶感染，每个MOI为10小时.4小时感染后，将细胞在无菌低温小瓶中以9×10 6个细胞/ mL的细胞密度冷冻，并储存在-150℃的冰箱中。对于该测定，将一小瓶冷冻细胞解冻，并将细胞重悬于平板培养基[含有5％胎牛血清，2mM GlutaMAX-1和1％（v / v）青霉素的无酚红RPMI 1640培养基中。 - 链霉素]至最终细胞密度为1.5×10 5个细胞/ mL。然后将重悬的细胞以100μL细胞悬浮液/孔（即1.5×10 4细胞/孔）的体积接种在96孔组织培养物处理的板中。将板在37℃下在5％CO 2/95％湿润空气培养箱内孵育5小时或直至细胞附着并开始扩散。在添加WAY-316606之前，用50μL/孔的含有10％胎牛血清，2mM GlutaMAX-1和1％（v / v）青霉素 - 链霉素的不含酚红的RPMI 1640替换培养基。然后将含有2mM GlutaMAX-1和1％（v / v）青霉素 - 链霉素的无酚红RPMI 1640稀释的WAY-316606或载体（通常为DMSO）以4孔/稀释液的重复样品加入孔中将板在37℃下孵育过夜。用化合物以2倍连续稀释度从10000-4.9nM进行剂量 - 反应实验。过夜温育后，用150uL /孔不含钙或镁的PBS洗涤细胞两次，并在室温下在摇床上用50μL/孔的1×细胞培养裂解试剂裂解30分钟。将等份的细胞裂解物（30μL）转移至96孔发光计板，并使用100μL/孔的荧光素酶底物在MicroLumat PLUS发光计中测量荧光素酶活性。
• 参考文献:

  [1]. Moore, WJ, et al. Modulation of Wnt Signaling Through Inhibition of Secreted Frizzled-Related Protein I (sFRP-1) with N-Substituted Piperidinyl Diphenylsulfonyl Sulfonamides. Journal of Medicinal Chemistry (2009), 52(1), 105-116.

  [2]. Bodine PV, et al. A small molecule inhibitor of the Wnt antagonist secreted frizzled-related protein-1 stimulates bone formation. Bone. 2009 Jun;44(6):1063-8.