918505-84-7

• 常用中文名：PLX-4720
• 常用英文名：PLX-4720
• CAS号：918505-84-7
• 分子式：C₁₇H₁₄ClF₂N₃O₃S
• 分子量：413.826
• 相关类别： 生物化工 抑制剂 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) Raf 抑制剂
• 发布时间：2018-12-15 18:29:16
• 更新时间：2024-01-13 17:59:53
• PLX-4720 是一种有效的,选择性的 B-RafV600E 抑制剂,IC50 值为 13 nM；与对 c-Raf-1 的选择性相同,是野生型 B-Raf 选择性的 10 倍。

名称

• 中文名: N-[3-[(5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)羰基]-2,4-二氟苯基]-1-丙磺酰胺
• 英文名: N-[3-(5-chloro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridine-3-carbonyl)-2,4-difluorophenyl]propane-1-sulfonamide
• 英文别名: PLX 4720,PLX-4720; N-{3-[(5-Chloro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl)carbonyl]-2,4-difluorophenyl}-1-propanesulfonamide; PLX-4720; 1-Propanesulfonamide, N-[3-[(5-chloro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl)carbonyl]-2,4-difluorophenyl]-; S1152_Selleck; PLX4720

物化性质

• 密度: 1.5±0.1 g/cm3
• 沸点: 621.4±65.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₁₇H₁₄ClF₂N₃O₃S
• 分子量: 413.826
• 闪点: 329.6±34.3 °C
• 精确质量: 413.041260
• PSA: 100.30000
• LogP: 3.14
• 蒸汽压: 0.0±1.8 mmHg at 25°C
• 折射率: 1.646
• 储存条件: -20°C

生物活性

• 描述: PLX-4720 是一种有效的,选择性的 B-RafV600E 抑制剂,IC50 值为 13 nM；与对 c-Raf-1 的选择性相同,是野生型 B-Raf 选择性的 10 倍。
• 相关类别:
  信号通路 >> MAPK/ERK信号通路 >> 拉夫
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  B-RafV600E:13 nM (IC50)

  B-Raf:160 nM (IC50)

  BRK:130 nM (IC50)

  FRK:1300 nM (IC50)

  Csk:1500 nM (IC50)

  Src:1700 nM (IC50)

  FAK:1700 nM (IC50)

  FGFR:1900 nM (IC50)

  KDR:2300 nM (IC50)

  HGK:2800 nM (IC50)

  CSF1R:3300 nM (IC50)

  Aurora A:3400 nM (IC50)

• 体外研究: PLX-4720对野生型B-Raf的选择性> 10倍,对其他激酶如Frk,Src,Fak,FGFR和Aurora A的选择性> 100倍,IC50为1.3-3.4μM。 PLX-4720显着抑制携带B-RafV600E的细胞系中的ERK磷酸化,IC50为14-46nM,而不是野生型B-Raf的细胞。 PLX-4720显着抑制携带B-RafV600E致癌基因的肿瘤细胞系的生长,例如COLO205,A375,WM2664和COLO829,GI50分别为0.31μM,0.50μM,1.5μM和1.7μM。此外,1μM的PLX-4720处理仅在B-RafV600E阳性1205Lu细胞中诱导细胞周期停滞和凋亡,但在B-Raf野生型C8161细胞中不诱导[1]。与PTEN-细胞系相比,PLX-4720处理(10μM)显着诱导PTEN +细胞中BIM的> 14倍表达(4倍),解释了PTEN-细胞对PLX-4720-的抗性。诱导细胞凋亡[2]。
• 体内研究: 以20mg/kg /天口服施用PLX-4720在B-RafV600E依赖性COLO205肿瘤异种移植物中诱导显着的肿瘤生长延迟和消退,即使在1g/kg的剂量下也没有明显的小鼠副作用。每天两次100mg/kg的PLX-4720几乎完全消除了携带B-RafV600E的1205Lu异种移植物,而对携带野生型B-Raf的C8161异种移植物没有活性。 PLX-4720的抗肿瘤作用与那些携带V600E突变的细胞中MAPK通路的阻断相关[1]。 PLX-4720以30mg/kg /天的剂量显着抑制8505c异种移植物的肿瘤生长> 90％,并显着降低远处肺转移[3]。
• 激酶实验: 对于每种酶（0.1ng），在20mM Hepes（pH 7.0），10mM MgCl 2,1mM DTT，0.01％Tween-20,100nM生物素-MEK蛋白，各种ATP浓度，和在室温下增加PLX-4720的浓度。用5μL含有20mM Hepes（pH 7.0），200mM NaCl，80mM EDTA和0.3％BSA的溶液在2,5,8,10,20和30分钟停止反应。终止溶液还包括来自AlphaScreen蛋白A检测试剂盒的磷酸-MEK抗体，链霉抗生物素蛋白包被的供体珠和蛋白A受体珠。将抗体和珠子在室温下在黑暗中在终止溶液中预孵育30分钟。抗体的最终稀释度为1 / 2,000，每个珠子的最终浓度为10μg/ mL。将测定板在室温下温育1小时，然后在PerkinElmer AlphaQuest读数器上读数。
• 细胞实验: 用各种浓度的PLX-4720处理细胞24,48和72小时。通过使用CellTiter-Glo发光细胞活力测定或MTT测定来测量细胞增殖。对于细胞周期分析，收集上清液和细胞，沉淀并用70％乙醇固定。在用碘化丙锭（10μg/ mL）染色之前，将细胞在37℃下在0.5mg / mL RNase I中温育1小时，以除去残留RNA污染的样品。然后使用EPICS XL装置分析样品。为了评估细胞凋亡，在用膜联蛋白-FITC和碘化丙锭染色之前收获培养基和细胞并沉淀。随后使用EPICS XL装置分析样品。
• 动物实验: 将转移性黑素瘤细胞（2×10 6）皮下注射到SCID小鼠的侧腹中，并允许2周达到0.125mm 3的体积。随后，动物每天两次接受100mg / kg PLX4720（口服强饲法）或载体对照，持续15天。每72小时记录肿瘤体积。将每个相应组的平均肿瘤大小标准化为治疗第一天的肿瘤体积。处理15天后，杀死动物并切除肿瘤，用福尔马林固定，石蜡包埋，并通过免疫组织化学分析。
• 参考文献:

  [1]. Tsai J, et al. Discovery of a selective inhibitor of oncogenic B-Raf kinase with potent antimelanoma activity. Proc Natl Acad Sci U S A, 2008, 105(8), 3041-3046.

  [2]. Paraiso KH, et al. PTEN loss confers BRAF inhibitor resistance to melanoma cells through the suppression of BIM expression. Cancer Res, 2011, 71(7), 2750-2760.

  [3]. Nucera C, et al. B-Raf(V600E) and thrombospondin-1 promote thyroid cancer progression. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010, 107(23), 10649-10654.

  [4]. Rizzolio S, et al. Neuropilin-1 upregulation elicits adaptive resistance to oncogene-targeted therapies. J Clin Invest. 2018 Aug 31;128(9):3976-3990.