中文名 | RGFP966 |
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英文名 | (2E)-N-(2-Amino-4-fluorophenyl)-3-{1-[(2E)-3-phenyl-2-propen-1-yl ]-1H-pyrazol-4-yl}acrylamide |
英文别名 |
Benzenamine,N-[1-(2-phenylethenyl)pentyl]
(2E)-N-(2-Amino-4-fluorophenyl)-3-{1-[(2E)-3-phenyl-2-propen-1-yl]-1H-pyrazol-4-yl}acrylamide (E)-N-(1-phenylhept-1-en-3-yl)aniline (E)-N-(2-amino-4-fluorophenyl)-3-(1-cinnamyl-1H-pyrazol-4-yl)acrylamide 2-Propenamide, N-(2-amino-4-fluorophenyl)-3-[1-[(2E)-3-phenyl-2-propen-1-yl]-1H-pyrazol-4-yl]-, (2E)- RGFP 966 RGFP966 |
描述 | RGFP966 是高选择性的 HDAC3 抑制剂,IC50 为 80 nM。在15 μM时对其他HDAC无抑制作用。 |
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相关类别 | |
靶点 |
HDAC3:80 nM (IC50) |
体外研究 | RGFP966在RAW 264.7巨噬细胞中有效且选择性地抑制HDAC 3,IC50为0.21μM,而HDAC 1(IC50 =5.6μM),2(9.7μM)和8(>100μM),表明对HDAC 3具有良好的选择性水平。在RAW 264.7巨噬细胞中,HDAC 1,2和3的mRNA水平不受RGFP966的显着影响,而HDAC 1和HDAC 2蛋白水平在RGFP966处理后略微降低,但显着降低。此外,RGFP966显着降低NF-κBp65的转录活性,而NF-κBp65乙酰化和定位保持不变[2]。 |
体内研究 | RGFP966(10和25 mg/kg)治疗在开放式野外运动试验中显着改善了体重,旋转杆性能和几种运动功能测量[3]。 10mg/kg剂量的RGFP966以典型的药代动力学渗透到大脑听觉皮层的血脑屏障,这共同建立了由于听觉皮层中的作用而调节A1可塑性的可行性[4]。 |
激酶实验 | 将各种人重组HDAC酶在不存在和/或存在各种浓度的RGFP966和促荧光底物的情况下在室温下孵育60分钟。接下来,通过在所有孔中添加HDAC终止溶液(6mg / mL胰蛋白酶,0.3mM SAHA)来终止脱乙酰化反应,并将板在37℃下孵育20分钟。通过使用Synergy H1平板读数器测量λem= 460nm和λex= 390nm处的荧光来监测荧光7-氨基-4-甲基香豆素的释放。从阳性对照,空白和抑制孔的荧光中减去背景孔的荧光值。非线性回归用于使用GraphPad Prism [2]将数据拟合到log(抑制剂)与响应曲线。 |
细胞实验 | 为了研究HDAC3选择性抑制剂RGFP966对细胞活力的影响,将RAW 264.7巨噬细胞,HBE细胞和hASM细胞接种在96孔板中。为了在实验开始时获得相同的细胞密度,将RAW 264.7巨噬细胞以25,000个细胞/ cm 2接种,将HBE细胞和hASM细胞以70%汇合(基于表面积)接种,并在孵育前血清饥饿24小时。与RGFP966。在与RGFP966温育之前不久,用100μL新鲜(如果合适的无血清)培养基替换培养基。如通过siRNA对HDAC1-3下调所述进行与LPS和IFNγ的孵育。与RGFP966温育20小时后,向每个孔中加入20μLCellTiter96 AQueous One Solution试剂,并在黑暗中于37℃温育1小时。使用Synergy H1读板仪测量490nm处的吸光度。没有添加RGFP966的LPS /IFNγ刺激的细胞被认为是100%[2]。 |
动物实验 | 将小鼠[3] N171-82Q转基因小鼠圈养并保持在正常的12小时光照/黑暗循环中,并在上午6:00点亮并且自由获取食物和水。从8周龄开始,通过SC注射(3次注射/周)给小鼠施用RGFP966(10或25mg / kg)10周。用75%聚乙二醇200/25%乙酸钠(6.25mM)溶解RGFP966;对照小鼠接受等量的药物载体。体重每周记录两次。在最后一次注射后6小时,通过过量使用异氟烷麻醉处死小鼠18周龄。取出脑,解剖出纹状体和皮质用于基因表达测定或用4%多聚甲醛心脏内灌注。大鼠[4]使用总共三十三只成年雄性Sprague Dawley大鼠(275-350g)。在每日训练期之后,立即向每个受试者递送RGPF966(10mg / kg,sc)或媒介物(与药物治疗相当的体积)的训练后全身注射。 |
参考文献 |
密度 | 1.2±0.1 g/cm3 |
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沸点 | 630.4±55.0 °C at 760 mmHg |
分子式 | C21H19FN4O |
分子量 | 362.400 |
闪点 | 335.0±31.5 °C |
精确质量 | 362.154297 |
PSA | 76.43000 |
LogP | 3.95 |
蒸汽压 | 0.0±1.8 mmHg at 25°C |
折射率 | 1.607 |
储存条件 | 2-8℃ |