描述 |
Prexasertib (LY2606368) 是一种有效,选择性, ATP 竞争性的 Chk1 抑制剂,Ki 和 IC50 分别为 <1 nM 和 0.9 nM。
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相关类别 |
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靶点 |
Chk1:<1 nM (IC50)
Chk2:8 nM (IC50)
Chk1:0.9 nM (Ki)
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体外研究 |
Prexasertib(LY2606368)是Chk1的有效和选择性ATP竞争性抑制剂,IC50 <1 nM,并且还抑制CHK2,IC50为8 nM。 Prexasertib通过丝氨酸296的自磷酸化对CHK1活性具有1nM的EC50,对于HT-29CHK2自磷酸化具有<31nM(S516)。 Prexasertib有效消除p53缺陷型HeLa细胞中多柔比星激活的G2-M检查点,EC50为9 nM。然而,100nM Prexasertib不抑制PMA刺激的RSK,而是弱刺激丝氨酸235/236上S6的磷酸化。 Prexasertib广泛抗增殖,对U-2 OS,Calu-6,HT-29,HeLa和NCI-H460细胞系的IC50分别为3 nM,3 nM,10 nM,37 nM和68 nM。 Prexasertib(4 nM)导致细胞周期群体从G1和G2-M向S期发生大的转变,伴随着U-2 OS细胞中H2AX磷酸化的诱导[1]。 Prexasertib(LY2606368;25μM)表现出对抗AGS和MKN1细胞增殖的抑制活性。 Prexasertib(20 nM)抑制HR修复能力DR-GFP细胞。 Prexasertib(5 nM)与PARP抑制剂BMN673联合使用,在胃癌细胞中显示出协同抗癌作用[2]。
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体内研究 |
Prexasertib(LY2606368; 15 mg/kg,sc)显着抑制异种移植肿瘤模型中的肿瘤生长,动物体重减轻较少[1]。 Prexasertib(LY2606368; 2 mg/kg,sc)和BMN673组合在胃癌PDX模型中具有协同抗癌作用,其效果高于单独使用一种药物[2]。
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细胞实验 |
通过MTS细胞增殖比色测定试剂盒检测Chk1消融,IR敏感性,BMN673和Prexasertib的抗癌作用的增殖抑制作用。将细胞接种到96孔细胞培养板中,然后用指定的实验条件处理,然后向每个孔中加入20μLMTS试剂,培养2小时后,在酶标仪上以490nM的波长检测每个孔的细胞活力。 [2]。
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动物实验 |
雌性CD-1 nu- / nu-小鼠(26-28g)用于该研究。通过在每只受试动物的后胁腹中的无血清生长培养基和基质胶的1:1混合物中皮下注射1×106Calu-6细胞来启动肿瘤生长。当肿瘤体积达到约150mm 3时,通过肿瘤大小和体重随机化动物,并将其置于它们各自的治疗组中。由20%Captisol pH4或Prexasertib组成的载体通过皮下注射以200μL的体积施用。给药后4,8,12,24和48小时,通过心脏穿刺提取用于血浆药物暴露的血液,并在Sciex API 4000 LC / MS-MS系统上进行测定。迅速移除并准备异种移植组织。通过蛋白质磷酸化水平的免疫印迹分析来分析裂解物。组平均值,SE和P值使用Kronos计算。
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参考文献 |
[1]. King C, et al. LY2606368 Causes Replication Catastrophe and Antitumor Effects through CHK1-Dependent Mechanisms. Mol Cancer Ther. 2015 Sep;14(9):2004-1 [2]. Yin Y, et al. Chk1 inhibition potentiates the therapeutic efficacy of PARP inhibitor BMN673 in gastric cancer. Am J Cancer Res. 2017 Mar 1;7(3):473-483.
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