描述 |
ARQ-092 是一种有效的选择性和变构型 Akt 抑制剂,对 Akt1,Akt2,Akt3 的 IC50 分别为 2.7 nM,14 nM 和 8.1 nM。
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相关类别 |
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靶点 |
Akt1:2.7 nM (IC50)
Akt3:8.1 nM (IC50)
Akt2:14 nM (IC50)
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体外研究 |
ARQ-092(化合物21a)显示出对Akt1,Akt2和Akt3的高酶促效力,以及对Akt活化和下游靶PRAS40的磷酸化的有效细胞抑制。 ARQ-092显示对未磷酸化的全长Akt1的强亲和力并且有效抑制全长Akt同种型的磷酸化形式。在衍生自各种肿瘤类型的大量细胞系中,与野生型(wt)PIK3CA/PIK3R1或PTEN缺失的细胞系相比,ARQ-092在含有PIK3CA/PIK3R1突变的细胞系中显示出有效的抗增殖活性。 ARQ-092在AN3CA和A2780细胞中显示出对p-Akt(S473)和p-Akt(T308)的优异抑制。用ARQ-092(IC50 =0.31μM)[1]观察到下游蛋白质p-PRAS40(T246)的抑制。
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体内研究 |
在小鼠药代动力学研究中,(po为100mg/kg,iv为5mg/kg),ARQ-092(化合物21a)显示口服生物利用度为23%。在用100mg/kg治疗荷瘤小鼠后,ARQ-092分别导致p-Akt(S473),p-Akt(T306)和p-PRAS40(T246)分别减少99%,95%和58%。婆。磷酸化的抑制持续8小时.ARQ-092在1小时的血浆浓度为2.1μM,在8小时时降至0.26μM,而在肿瘤中,浓度在1小时时为21.0μM,在8小时时为9.6μM。小时[1]。为了确定ARQ-092对心脏功能的影响,在口服给药载体或ARQ-092(100mg/kg /天)存在下,在12,进行SHP2 +/+和SHP2Y279C/+同窝小鼠的超声心动图分析, 14岁和16周龄。到12周龄时,SHP2Y279C/+小鼠显示出明显的左心室肥大,与室间隔对照组相比,腔室尺寸减小,后壁厚度增加;这些小鼠的肥大在4周时间内持续进展。早在治疗后2周,用ARQ-092治疗SHP2Y279C/+小鼠使肥厚型心肌病(HCM)表型正常化,其水平与此时的SHP2 +/+相当[2]。
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细胞实验 |
使用CellTiter非放射性细胞增殖试验进行抗增殖细胞试验,该试验利用活细胞从四唑鎓化合物生产甲.. AN3CA和A2780细胞获自ATCC。 AN3CA细胞在DMEM中培养,A2780细胞在补充有10%FBS,100单位/ mL青霉素,100μg/ mL链霉素和2mM谷氨酰胺的RPMI中于37℃,5%CO 2下培养。将细胞以2,000-10,000个细胞/孔接种在96孔板中,培养24小时,并用最终DMSO浓度不大于0.5%v / v的测试化合物处理72小时。将PMS储备试剂(在DPBS中0.92mg / mL)在MTS储备试剂(DPBS中2mg / mL)中稀释20倍,并将该MTS / PMS混合物稀释5倍至96孔板的每个孔中。将板孵育3-4小时,并在490nm处测量甲amount的吸光度。将数据标准化为未处理的对照,将剂量 - 反应曲线拟合至四参数逻辑方程,并确定IC 50值。报告的所有IC 50值是至少两次独立测定的几何平均值[1]。
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动物实验 |
使用小鼠[2] SHP2Y279C / +小鼠。只有雄性后代用于本文的实验,并且所有小鼠都保持在远交的C57BL6 / J背景上,回交超过10代。然后通过口服强饲法每天施用载体或ARQ-092(100mg / kg体重)4周。给药开始于12周龄(在确定肥大后),并持续4周,直至小鼠达到16周龄。作为对照,SHP2 + / +和SHP2Y279C / +小鼠仅用载体处理。
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参考文献 |
[1]. Lapierre JM, et al. Discovery of 3-(3-(4-(1-Aminocyclobutyl)phenyl)-5-phenyl-3H-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)pyridin-2-amine (ARQ 092): An Orally Bioavailable, Selective, and Potent Allosteric AKT Inhibitor. J Med Chem. 2016 Jul 14;59(13):6455-69. [2]. Wang J, et al. In vivo efficacy of the AKT inhibitor ARQ 092 in Noonan Syndrome with multiple lentigines-associated hypertrophic cardiomyopathy. PLoS One. 2017 Jun 5;12(6):e0178905.
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