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Furimazine

更新时间:2024-01-03 11:09:48

Furimazine结构式
Furimazine结构式
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常用名 Furimazine 英文名 Furimazine
CAS号 1374040-24-0 分子量 381.43
密度 N/A 沸点 N/A
分子式 C24H19N3O2 熔点 N/A
MSDS N/A 闪点 N/A

 Furimazine用途


Furimazine 是一种咪唑并吡嗪酮类的发光底物。在哺乳动物细胞中, NanoLuc (Nluc) 与 Furimazine 联用,产生更亮的发光,比带 Coelenterazine 的 Oluc-19 高 250 万倍。

 Furimazine名称

中文名 Furimazine
英文名 Furimazine

 Furimazine生物活性

描述 Furimazine 是一种咪唑并吡嗪酮类的发光底物。在哺乳动物细胞中, NanoLuc (Nluc) 与 Furimazine 联用,产生更亮的发光,比带 Coelenterazine 的 Oluc-19 高 250 万倍。
相关类别
体外研究 Furimazine是一种Coelenterazine类似物。使用腔肠素类似物或Coelenterazine的纯化NanoLuc(Nluc)的表观Km约为10μM,而腔肠素类似物的最大发光(即表观Vmax)比天然Coelenterazine高约30倍。从表达Nluc的细胞测量发光强度表明,在约10-20μM的腔肠素类似物中获得最大信号[1]。
激酶实验 通过易错PCR(每个克隆平均2-3个突变)产生随机文库。用Coelenterazine筛选文库1(第1阶段;模板= Oluc-N166R)(4,400种变体)。用2种新的Coelenterazine类似物筛选文库2(第2阶段;模板= C1A4E)(4,400种变体):3840,3841,3842,3857,3888,3881,3886,3887,3889,3897和3900.11种类似物代表取代在第2,6和8位,被认为是整个24种化合物的代表;用化合物3896和3894筛选2,200种变体。用剩余的Coelenterazine类似物再次筛选所有命中物(改善的发光)。使用Coelenterazine和腔肠素类似物在小鼠Id-X-HaloTag(其中X =文库)的背景下筛选文库3(第3阶段;模板= C1A4E + Q18L / K33N / F54I / F68Y / L72Q / M75K / I90V)。图书馆屏幕在Freedom机器人工作站上进行如下:诱导细菌培养(在96孔微量滴定板中)用含有300mM HEPES pH 8,200mM硫脲,0.3X被动裂解缓冲液,0.3mg / mL溶菌酶的缓冲液裂解。和0.002单位的RQ1 DNase。然后将含有1mM CDTA,150mM KCl,10mM DTT,0.5%(v / v)Tergitol和20μM底物的测定试剂加入等体积的裂解物中。样品在GENios Pro光度计[1]上测量。
参考文献

[1]. Hall MP, et al. Engineered luciferase reporter from a deep sea shrimp utilizing a novel imidazopyrazinone substrate. ACS Chem Biol. 2012 Nov 16;7(11):1848-57.

 Furimazine物理化学性质

分子式 C24H19N3O2
分子量 381.43
储存条件 2-8℃