| 描述 |
Ribociclib succinate (LEE011 succinate) 是一种高度特异性的 CDK4/6 抑制剂,IC50 值分别为 10 nM 和 39 nM,对 cyclin B/CDK1 复合体的活性低于其 1000 倍。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
CDK4:10 nM (IC50)
CDK6:39 nM (IC50)
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| 体外研究 |
用Ribociclib(LEE011)处理一组17个神经母细胞瘤细胞系,跨越4个对数剂量范围(10到10,000nM)。在检查的17种成神经细胞瘤细胞系中,12种神经母细胞瘤细胞系中使用Ribociclib治疗显着抑制底物贴壁生长(平均IC50 = 306±68 nM,仅考虑敏感细胞系,灵敏度定义为IC50小于1μM.Ribociclib治疗两种神经母细胞瘤细胞系(BE2C和IMR5)对CDK4/6抑制具有明显的敏感性,导致细胞周期G0/G1期细胞的剂量依赖性积累。这种G0/G1停滞在Ribociclib浓度为100时显着增加nM(p = 0.007)和250 nM(p = 0.01),分别为[2]。
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| 体内研究 |
携带BE2C,NB-1643(MYCN扩增,体外敏感)或EBC1(非扩增,体外抗性)异种移植物的CB17免疫缺陷小鼠每日一次用Ribociclib(LEE011; 200mg/kg)或用车辆控制。该给药策略耐受性良好,因为在任何异种移植模型中均未观察到体重减轻或其他毒性迹象。在携带BE2C或1643异种移植物的小鼠中,肿瘤生长在整个21天内显着延迟(两者,p <0.0001),尽管在治疗后恢复生长[2]。
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| 细胞实验 |
细胞在35mm平板中生长24小时，用500nM Ribociclib处理6天，然后固定并染色过夜。然后使用Axio Observer D.1相差显微镜对细胞进行SA-β-gal成像。通过计数存在于三个单独的显微镜框架中的阳性细胞的数量，然后归一化至对照，确定SA-β-gal阳性细胞的百分比。为了评估细胞凋亡活性，将细胞一式三份接种在96孔板中，用Ribociclib处理，并在用Caspase-Glo 3/7处理后16小时测定胱天蛋白酶3/7活化。用SN-38处理的细胞用作阳性对照[2]。
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| 动物实验 |
小鼠[2]将BE2C，NB-1643或EBC1细胞系衍生的异种移植物皮下植入CB17 SCID - / - 小鼠的右胁腹。然后将携带200-600mm 3的移植肿瘤的动物随机分配至每天用0.5mg甲基纤维素（n = 10）或载体（n = 10）中的200mg / kg Ribociclib口服治疗，共21天。根据公式（π/ 6）×d2在整个治疗期间定期确定肿瘤负荷，其中d表示通过卡尺测量获得的平均肿瘤直径。
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| 参考文献 |
[1]. VanArsdale T, et al. Molecular Pathways: Targeting the Cyclin D-CDK4/6 Axis for Cancer Treatment. Clin Cancer Res. 2015 Jul 1;21(13):2905-10. [2]. Rader J, et al. Dual CDK4/CDK6 Inhibition Induces Cell-Cycle Arrest and Senescence in Neuroblastoma. Clin Cancer Res. 2013 Nov 15;19(22):6173-82.
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