描述 |
Pancreatic Polypeptide, bovine 是由 36 个氨基酸组成的直链多肽,由胰腺中产生,能够抑制由分泌素和胆囊素诱导的胰腺分泌。Pancreatic Polypeptide, bovine 是神经肽 (NPY) 受体激动剂,对 NPYR4 有很高的亲和性。
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相关类别 |
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靶点 |
NPYR4[1]
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体外研究 |
胰腺多肽,牛是NPY受体的激动剂,在NPYR4具有高亲和力。胰多肽(1μM)不会改变BRIN BD11或1.1B4β细胞的增殖,但可逆转链脲佐菌素诱导的BRIN BD11细胞中细胞活力的降低。胰多肽(0.1 nM-1μM)对分离的小鼠胰岛的胰岛素分泌没有影响,并且不影响1μM的BRIN BD11细胞中的膜电位和(Ca2 +)i水平[1]。胰腺多肽,牛抑制促胰液素和胆囊收缩素刺激的胰腺分泌。 125I-胰腺多肽,牛没有特异性结合胰腺腺泡[2]。
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体内研究 |
胰多肽(25 nmol/kg体重,腹腔注射)可降低葡萄糖刺激的胰岛素浓度,但对禁食过夜的小鼠的急性摄食行为没有影响[1]。胰腺多肽,牛(BPP;40μg/ kg)在整个牛胰多肽输注期间抑制CCK-33诱导的胰腺蛋白输出,但在CCK-33或CCK-8输注期间对胆汁蛋白输出没有影响[2] 。
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细胞实验 |
为了评估NPY和胰多肽对啮齿动物BRIN-BD11和人1.1B4β细胞增殖的影响,将细胞以每孔150,000个细胞的密度接种,并在NPY或胰多肽(1μM)存在下培养过夜,并与阳性对照GLP-1(1μM)比较。用PBS洗涤细胞并用4%多聚甲醛固定。用柠檬酸盐缓冲液在95℃下抗原修复20分钟后,用2%BSA封闭组织45分钟。然后将载玻片与兔抗Ki-67一抗孵育,随后与Alexa Fluor 594二抗孵育。使用荧光显微镜观察载玻片并通过DP70相机适配器系统拍摄。增殖频率以盲法确定,并表示为分析的总细胞的%。分析每个重复约150个细胞。为了分析NPY和胰多肽防止链脲佐菌素诱导的DNA损伤的能力,接种BRIN-BD11和1.1B4细胞。然后在存在或不存在NPY或胰腺多肽(1μM)的情况下将细胞暴露于链脲佐菌素(5mM)2小时,其中GLP-1(1μM)作为阳性对照。然后收获细胞并进行彗星试验。使用DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)(100μg/ mL)对得到的凝胶进行染色,并在适当的滤器下观察载玻片。 Comet评分软件用于分析%尾DNA(每个凝胶100个细胞)和橄榄尾矩[1]。
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动物实验 |
小鼠[1]在腹腔内(ip)单独注射葡萄糖(18 mmol / kg体重)或与测试肽(胰腺多肽等; 25 nmol / kg体重)组合过夜后评估血浆葡萄糖和胰岛素反应(18小时)禁食C57BL / 6小鼠。在第二系列实验中,使用18小时禁食的小鼠来评估各测试肽对食物摄入的影响。小鼠单独ip注射生理盐水(0.9%(w / v)NaCl)或与测试肽(25nmol / kg体重)组合,并以30分钟间隔测量食物摄入180分钟。选择25 nmol / kg的剂量与其他NPYR调节剂对葡萄糖稳态,胰岛素分泌和该剂量的喂养[1]。
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参考文献 |
[1]. Khan D, et al. Influence of neuropeptide Y and pancreatic polypeptide on islet function and beta-cell survival. Biochim Biophys Acta. 2017 Apr;1861(4):749-758. [2]. Louie DS, et al. Action of pancreatic polypeptide on rat pancreatic secretion: in vivo and in vitro. Am J Physiol. 1985 Oct;249(4 Pt 1):G489-95.
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