描述 |
Diethyl-pythiDC 是胶原蛋白脯氨酰4-羟化酶 (CP4Hs) 抑制剂。
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相关类别 |
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靶点 |
CP4H[1]
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体外研究 |
二乙基-pythiDC在不引起缺铁的浓度下抑制培养细胞中的CP4H活性。用双杂芳基二羧酸酯处理MDA-MB-231细胞,并测定细胞毒性和缺铁指标。没有酯化的双杂芳基二羧酸酯在高微摩尔浓度下显示出细胞毒活性。用二羟基苯甲酸盐处理的细胞(EDHB表现出强烈的铁缺乏表型。相反,用二乙基吡啶DC(二乙基pythiDC)处理的细胞在高达500μM的浓度下似乎是正常的。用二乙基吡啶并用低水平的二乙基pyimDC处理不影响TfR,HIF-1α或铁蛋白[1]的水平。
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细胞实验 |
将在X部分中生长的MDA-MB-231细胞以5,000个细胞/孔的浓度接种在透明的96孔板中。使细胞粘附4小时,然后除去培养基并丢弃。加入新鲜培养基并用不同浓度的测试化合物(例如,二乙基 - 吡硫脲)在37℃处理细胞24小时。除去培养基,用Dulbecco PBS洗涤细胞。以1:5的比例添加MTS试剂,并将细胞在37℃下孵育2小时,然后测量490nm处的吸光度。对于每种测试浓度,一式三份测量平均吸光度,并且一式两份地重复整个实验。通过标准化至PBS对照(100%存活)和H2O2对照(0%存活)[1]来确定活细胞的百分比。
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参考文献 |
[1]. Vasta JD, et al. Selective Inhibition of Collagen Prolyl 4-Hydroxylase in Human Cells. ACS Chem Biol. 2016 Jan 15;11(1):193-9.
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