| 描述 |
AZD 9272 是一种脑渗透性 mGluR5 拮抗剂。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
mGluR5[1]
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| 体外研究 |
在人和表达大鼠mGluR5的细胞系中,AZD 9272引起细胞内Ca 2+应答幅度的浓度依赖性降低至1.5μM的mGluR I组选择性激动剂DHPG。最大抑制率为100％。对于AZD9272,人mGluR5的平均IC 50(±SD)值为7.6±1.1nM(n = 13)。对于AZD9272,大鼠mGluR5的平均IC 50值为2.6±0.3nM(n = 3)。相反,10μM的AZD9272不会减少背景GHEK细胞对10μMATP的反应。增加浓度的AZD9272导致DHPG的效力和最大反应降低。 AZD9272以浓度依赖性方式完全逆转谷氨酸刺激的(EC80,80μM)磷脂酰肌醇水解,其IC50为26±3 nM(n = 21)[1]。
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| 体内研究 |
在3μmol/ kg的单次静脉内剂量后,AZD 9272的清除率较低,并且从血浆中消除AZD 9272,终末半衰期在2至6小时之间。口服给药后的终末半衰期与静脉内给药后的半衰期相似。稳态下的分布体积对于AZD9272来说是中等的[1]。 AZD9272不会引起可卡因适当的反应,并且在较高剂量时引起非剂量依赖性的反应率降低。剂量为2.84 mg/kg的AZD9272引起大于80％且通常超过99％的MTEP适当反应,在给药后20小时,在给药后24小时下降至约20％,产生t1/2为21.93小时,并且不会对回应率产生系统性影响。 AZD9272引起> 90％MTEP适当反应的第一个时间点是在给药后30分钟[2]。
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| 激酶实验 |
可饱和的结合和竞争结合研究利用在22℃下孵育1小时。对于饱和度研究，在存在或不存在10μMMPEP的情况下，将来自mGluR5-GHEK细胞的膜与递增浓度（0.1至30nM）的[3H] AZD9272一起温育。在这些研究的变体中，在低浓度（10和20nM）的MPEP存在下测定可饱和的[3H] AZD9272结合。在存在或不存在MPEP的情况下Bmax的一致性支持这些配体与单一结合位点的相互作用[1]。
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| 细胞实验 |
将hmGluR5-GHEK细胞以50,000个细胞/孔接种到96孔板上，在含有10μCi/ mL [3H]肌醇的培养基中。将细胞温育过夜（16小时），然后洗涤三次，并在37℃下在补充有1单位/ mL谷氨酸丙酮酸转氨酶和2mM丙酮酸盐的HEPES缓冲盐水中温育1小时。将细胞在HEPES缓冲盐水中洗涤一次，并在含有10mM LiCl的HEPES缓冲盐水中预温育10分钟。通过用AZD9272预孵育细胞10分钟，然后在谷氨酸（EC80,80μM）存在下于37℃温育30分钟来确定拮抗活性。 AZD9272在1nM和30μM之间的10个浓度下进行测试，一式两份。通过在冰上加入0.1mL高氯酸（5％）终止反应，在4℃温育至少30分钟[1]。
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| 动物实验 |
在实验开始时大约48只体重240至250g的雄性Wistar大鼠成对饲养，或在每个笼子中饲养多达8只大鼠的组，在集合室中随时可用水并且在上午6:00之间点亮。下午6点;通过限制食物的获取，动物保持约80％的自由进食重量。将所有动物分成不同的组并训练以区分可卡因（3.4mg / kg ip，15分钟），PCP（1.6mg / kg ip，30分钟），MTEP（2mg / kg ip，30分钟）或AZD9272（无药物[1]，1.6毫克/公斤口服，60分钟）。
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| 参考文献 |
[1]. Swedberg MD, et al. AZD9272 and AZD2066: selective and highly central nervous system penetrant mGluR5 antagonists characterized by their discriminative effects. J Pharmacol Exp Ther. 2014 Aug;350(2):212-22. [2]. Raboisson P, et al. Discovery and characterization of AZD9272 and AZD6538-Two novel mGluR5 negative allosteric modulators selected for clinical development. Bioorg Med Chem Lett. 2012 Nov 15;22(22):6974-9.
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