| 描述 |
Erismodegib (LDE225) 是有效,选择性的 Smo 拮抗剂, 抑制鼠和人Smo的 IC50 分别为 1.3 nM 和 2.5 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 1.3 nM (mSmo), 2.5 nM (hSmo)[1]
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| 体外研究 |
Erismodegib(NVP-LDE225)对主要人类CYP450药物代谢酶的IC50值大于10μM[1]。 Erismodegib(LDE225),一种小分子,临床研究SMO抑制剂,单独使用并与尼罗替尼联合使用,抑制CD34 +慢性期(CP)-慢性粒细胞白血病(CML)细胞中的Hh通路,减少数量和自我更新能力CML白血病干细胞(LSC)。 Erismodegib以类似于环巴胺的方式与SMO直接相互作用,以减少下游Hh信号传导靶标的表达。将原代CD34 + CP-CML细胞在无血清培养基(SFM)±Erismodegib中培养6,24和72小时(h)。在72小时,虽然生物样品之间存在差异,但在暴露于Erismodegib后,GLI1显着下调(10 nM;分别为0.78倍和100 nM;分别为0.73倍(p <0.01)[2]。
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| 体内研究 |
Erismodegib(NVP-LDE225)是弱碱,测得的pKa为4.2,并且表现出相对差的水溶性。在皮下Ptch +/- p53 -/-成神经管细胞瘤同种异体移植小鼠模型中,Erismodegib在口服给予二磷酸盐盐悬浮液10天后显示出剂量相关的抗肿瘤活性。在5mg/kg /天qd的剂量下,Erismodegib显着抑制肿瘤生长,对应于33％的T/C值(与载体对照相比p <0.05)。当以10和20mg/kg /天qd给药时,Erismodegib分别提供51％和83％的消退[1]。将来自一组处理小鼠的骨髓细胞和脾细胞移植到次级受体小鼠中。与Erismodegib或单独的Nilotinib相比,用Erismodegib + Nilotinib处理的小鼠移植骨髓(BM)或脾细胞导致白细胞计数(WCC)减少并减少继发受者的白血病发展[2]。
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| 细胞实验 |
将CD34 + CP-CML细胞单独接种于SFM±Erismodegib±Nilotinib中，并在评估前培养24-72小时。使用BrDU掺入的比色评估测量增殖。使用膜联蛋白V-FITC和7-氨基 - 放线菌素D（7-AAD，Via-Probe溶液）通过流式细胞术评估活细胞与早期和晚期细胞凋亡的比例。使用Ki67（FITC）表达和7-AAD掺入评估细胞周期状态[2]。
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| 动物实验 |
小鼠[2]转基因EGFP + / SCLtTA / TRE-BCR-ABL小鼠模型用于研究Erismodegib治疗对体内CML LSC的影响。将FVB / N背景中的Scl-tTa-BCR-ABL小鼠与表达转基因GFP的小鼠杂交。诱导后4周获得骨髓细胞，通过流式细胞术选择GFP +细胞，并通过尾静脉注射（106细胞/小鼠）移植到野生型FVB / N受体小鼠中，以900cGy照射，产生大量小鼠。具有相似的白血病发病时间。移植后4周获得的血液样品证实受体小鼠中的嗜中性白细胞增多。用尼罗替尼（每天通过管饲法施用50mg / kg），Erismodegib（每天通过管饲法施用80mg / kg），Erismodegib +尼罗替尼或单独的载体（对照）处理小鼠。处理3周后，对动物实施安乐死，获得股骨和胫骨，脾细胞和血液的骨髓含量。通过流式细胞术测量总白细胞计数（WCC），表达GFP的WCC，骨髓细胞和GFP +祖细胞和干细胞。在停止治疗后120天，在一小部分小鼠中评估存活率。汇集来自每个臂中的一组小鼠的脾和BM细胞，并将5×10 6个细胞/小鼠（8只小鼠/条件）移植到以900cGy照射的野生型FVB / N受体小鼠中。通过每4周抽取外周血（PB）来监测植入。通过流式细胞术分析PB中GFP +细胞的百分比。
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| 参考文献 |
[1]. Pan S, et al. Discovery of NVP-LDE225, a Potent and Selective Smoothened Antagonist. ACS Med Chem Lett. 2010 Mar 16;1(3):130-4. [2]. Irvine DA, et al. Deregulated hedgehog pathway signaling is inhibited by the smoothened antagonist LDE225 (Sonidegib) in chronic phase chronic myeloid leukaemia. Sci Rep. 2016 May 9;6:25476.
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