维利帕尼-作用-生物活性-维利帕尼靶点活性
发布时间：2019-01-01 14:56:02 编辑作者：华佗
图片：维利帕尼结构式
维利帕尼，英文名Veliparib，别名ABT-888。它是一种聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）-1和-2抑制剂，具有化学增敏和抗肿瘤活性。那么它的生物活性是什么？如何做实验呢？下面让小编给您详细说明。
首先我们介绍维利帕尼的生物活性：
1）体外活性
维利帕尼（ABT-888）也针对SIRT2进行了测试，SIRT2是一种也使用NAD +进行催化的酶，并且发现它是无活性的（> 5,000 nM）。维利帕尼的受体谱在一组74个受体结合测定中以10μM的浓度测定。维利帕尼仅在人H1（61％），人5-HT1A（91％）和人5-HT7（84％）位点取代50％或更高的对照特异性结合。
这三种受体的IC50分别为5.3,1.5和1.2μM[1]。当用60μM维利帕尼（ABT-888）处理时，c-Met敲低细胞显示出4.2-（shMet-A; 95％CI = 4-4.5）或4.6倍（shMet-B; 95％CI = 4.4-4.8）生长抑制）。当用38μM的维利帕尼处理时，c-Met敲低细胞显示2-（shMet-A; 95％CI = 1.5-2.5）或1.9倍（shMet-B; 95％CI = 1.3-2.5）生长抑制[2] 。
在HaCaT细胞中，在维利帕尼（ABT-888）处理后6小时，细胞活力在1,000μM硫芥（SM）暴露下显着增加，而维利帕尼在100μMSM暴露下不能保护细胞活力。此外，添加维利帕尼不再显示SM暴露后24小时的保护作用[3]。
2）体内活性
维利帕尼（ABT-888）是一种有效的PARP抑制剂，具有良好的口服生物利用度，可以穿过血脑屏障，并在同系和异种移植肿瘤模型中增强替莫唑胺，铂，环磷酰胺和放射[1]。在MDA-MB-231异种移植肿瘤模型中，与单独的抑制剂相比，联合治疗（AG014699 / Crizotinib和维利帕尼（ABT-888）/ Foretinib）显着降低肿瘤生长[2]。
我们已经了解了维利帕尼的生物活性，接下来如何做活性实验呢？一般来说，有如下的三种方法：
1）动物实验
小鼠[2]-将MDA-MB-231（0.5×106），HCC1937（2×106）或MCF-7（5×106）细胞注射到6-8周的雌性裸鼠（Swiss Nu / Nu）小鼠的乳房脂肪垫中。年龄。将A1034（0.5×106）细胞注射到6-8周龄的雌性FVB / NJ小鼠的乳房脂肪垫中。将H1993（0.5×106）细胞皮下注射到6-8周龄的雌性裸（Swiss Nu / Nu）小鼠的右胁腹中。
当肿瘤体积达到50 mm3时，克唑替尼（5 mg / kg）和Foretinib（5 mg / kg），AG014699（5 mg / kg）和维利帕尼（25 mg / kg）溶于50 mM乙酸钠水溶液，pH 4 ，作为单一药剂每周给小鼠施用五次，或者组合施用图例中指定的天数。在指定的时间点测量肿瘤，并通过下式计算肿瘤体积：π/ 6×长度×宽度2。
对于MDA-MB-231和A1034异种移植小鼠模型，使用IVIS成像系统在治疗之前和之后对小鼠成像以评估肿瘤生长。给小鼠注射100μLD-荧光素（PBS中15mg / mL）。10分钟后，用氧气和异氟烷的混合物麻醉小鼠，并使用IVIS成像系统成像。在实验中保持成像参数用于比较分析。
2）激酶实验
PARP1酶活性通过使用商业测定试剂盒测量，除了使用含有野生型PARP1或PARP Y907突变体的细胞裂解物代替试剂盒中包含的PARP1蛋白。向每个反应中加入总裂解物（500ng）。PARP抑制剂维利帕尼（ABT-888）的剂量过程为0.01至1,000μM。使用平板读数器测量与底物一起孵育后测定的野生型和突变体的PARP酶活性[2]。
3）细胞实验
使用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）定量细胞活力。该测定基于Dojindo的高度水溶性四唑盐。WST-8被细胞中的脱氢酶还原，得到橙色的水溶性甲dye染料。由细胞中的脱氢酶产生的甲dye染料的量与活细胞的数量成正比。简而言之，将指数生长的HaCaT细胞以10,000个细胞/孔的密度接种在96孔板中。暴露于硫芥（SM）6小时或24小时后，加入维利帕尼，加入CCK-8试剂[3]。
今天介绍了维利帕尼的作用，并且详细地说明了它的生物活性和实验方法。综上所述，维利帕尼Veliparib是一种有效的PARP抑制剂，抑制 PARP1 和 PARP2 的 Ki 分别为 5.2 和 2.9 nM。它的靶点活性是PARP1,5.2nM(Ki)；PARP2,2.9nM(Ki)。
您可能想了解维利帕尼的物理化学性质https://www.chemsrc.com/cas/912444-00-9_672804.html。如果您有其他资讯方面的需求，请和化源网联系。
参考文献：
[1]. Donawho CK, et al. ABT-888, an orally active poly(ADP-ribose) polymerase inhibitor that potentiates DNA-damaging agents in preclinical tumor models. Clin Cancer Res. 2007 May 1;13(9):2728-37.
[2]. Du Y, et al. Blocking c-Met-mediated PARP1 phosphorylation enhances anti-tumor effects of PARP inhibitors. Nat Med. 2016 Feb;22(2):194-201.
[3]. Liu F, et al. Effects of poly (ADP-ribose) polymerase-1 (PARP-1) inhibition on sulfur mustard-induced cutaneous injuries in vitro and in vivo. PeerJ. 2016 Apr 4;4:e1890.
首先我们介绍维利帕尼的生物活性：
1）体外活性
维利帕尼（ABT-888）也针对SIRT2进行了测试，SIRT2是一种也使用NAD +进行催化的酶，并且发现它是无活性的（> 5,000 nM）。维利帕尼的受体谱在一组74个受体结合测定中以10μM的浓度测定。维利帕尼仅在人H1（61％），人5-HT1A（91％）和人5-HT7（84％）位点取代50％或更高的对照特异性结合。
这三种受体的IC50分别为5.3,1.5和1.2μM[1]。当用60μM维利帕尼（ABT-888）处理时，c-Met敲低细胞显示出4.2-（shMet-A; 95％CI = 4-4.5）或4.6倍（shMet-B; 95％CI = 4.4-4.8）生长抑制）。当用38μM的维利帕尼处理时，c-Met敲低细胞显示2-（shMet-A; 95％CI = 1.5-2.5）或1.9倍（shMet-B; 95％CI = 1.3-2.5）生长抑制[2] 。
在HaCaT细胞中，在维利帕尼（ABT-888）处理后6小时，细胞活力在1,000μM硫芥（SM）暴露下显着增加，而维利帕尼在100μMSM暴露下不能保护细胞活力。此外，添加维利帕尼不再显示SM暴露后24小时的保护作用[3]。
2）体内活性
维利帕尼（ABT-888）是一种有效的PARP抑制剂，具有良好的口服生物利用度，可以穿过血脑屏障，并在同系和异种移植肿瘤模型中增强替莫唑胺，铂，环磷酰胺和放射[1]。在MDA-MB-231异种移植肿瘤模型中，与单独的抑制剂相比，联合治疗（AG014699 / Crizotinib和维利帕尼（ABT-888）/ Foretinib）显着降低肿瘤生长[2]。
我们已经了解了维利帕尼的生物活性，接下来如何做活性实验呢？一般来说，有如下的三种方法：
1）动物实验
小鼠[2]-将MDA-MB-231（0.5×106），HCC1937（2×106）或MCF-7（5×106）细胞注射到6-8周的雌性裸鼠（Swiss Nu / Nu）小鼠的乳房脂肪垫中。年龄。将A1034（0.5×106）细胞注射到6-8周龄的雌性FVB / NJ小鼠的乳房脂肪垫中。将H1993（0.5×106）细胞皮下注射到6-8周龄的雌性裸（Swiss Nu / Nu）小鼠的右胁腹中。
当肿瘤体积达到50 mm3时，克唑替尼（5 mg / kg）和Foretinib（5 mg / kg），AG014699（5 mg / kg）和维利帕尼（25 mg / kg）溶于50 mM乙酸钠水溶液，pH 4 ，作为单一药剂每周给小鼠施用五次，或者组合施用图例中指定的天数。在指定的时间点测量肿瘤，并通过下式计算肿瘤体积：π/ 6×长度×宽度2。
对于MDA-MB-231和A1034异种移植小鼠模型，使用IVIS成像系统在治疗之前和之后对小鼠成像以评估肿瘤生长。给小鼠注射100μLD-荧光素（PBS中15mg / mL）。10分钟后，用氧气和异氟烷的混合物麻醉小鼠，并使用IVIS成像系统成像。在实验中保持成像参数用于比较分析。
2）激酶实验
PARP1酶活性通过使用商业测定试剂盒测量，除了使用含有野生型PARP1或PARP Y907突变体的细胞裂解物代替试剂盒中包含的PARP1蛋白。向每个反应中加入总裂解物（500ng）。PARP抑制剂维利帕尼（ABT-888）的剂量过程为0.01至1,000μM。使用平板读数器测量与底物一起孵育后测定的野生型和突变体的PARP酶活性[2]。
3）细胞实验
使用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）定量细胞活力。该测定基于Dojindo的高度水溶性四唑盐。WST-8被细胞中的脱氢酶还原，得到橙色的水溶性甲dye染料。由细胞中的脱氢酶产生的甲dye染料的量与活细胞的数量成正比。简而言之，将指数生长的HaCaT细胞以10,000个细胞/孔的密度接种在96孔板中。暴露于硫芥（SM）6小时或24小时后，加入维利帕尼，加入CCK-8试剂[3]。
今天介绍了维利帕尼的作用，并且详细地说明了它的生物活性和实验方法。综上所述，维利帕尼Veliparib是一种有效的PARP抑制剂，抑制 PARP1 和 PARP2 的 Ki 分别为 5.2 和 2.9 nM。它的靶点活性是PARP1,5.2nM(Ki)；PARP2,2.9nM(Ki)。
您可能想了解维利帕尼的物理化学性质https://www.chemsrc.com/cas/912444-00-9_672804.html。如果您有其他资讯方面的需求，请和化源网联系。
参考文献：
[1]. Donawho CK, et al. ABT-888, an orally active poly(ADP-ribose) polymerase inhibitor that potentiates DNA-damaging agents in preclinical tumor models. Clin Cancer Res. 2007 May 1;13(9):2728-37.
[2]. Du Y, et al. Blocking c-Met-mediated PARP1 phosphorylation enhances anti-tumor effects of PARP inhibitors. Nat Med. 2016 Feb;22(2):194-201.
[3]. Liu F, et al. Effects of poly (ADP-ribose) polymerase-1 (PARP-1) inhibition on sulfur mustard-induced cutaneous injuries in vitro and in vivo. PeerJ. 2016 Apr 4;4:e1890.
相关化合物：维利帕尼