描述 |
Veliparib 是一种有效的 PARP 抑制剂,抑制 PARP1 和 PARP2 的 Ki 分别为 5.2 和 2.9 nM。
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相关类别 |
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靶点 |
PARP-2:2.9 nM (Ki)
PARP-1:5.2 nM (Ki)
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体外研究 |
Veliparib(ABT-888)也针对SIRT2进行了测试,SIRT2也是一种使用NAD +进行催化的酶,并且发现它是无活性的(> 5,000 nM)。 Veliparib的受体谱在一组74个受体结合测定中以10μM的浓度测定。 Veliparib仅在人H1(61%),人5-HT1A(91%)和人5-HT7(84%)位点取代50%或更高的对照特异性结合。这三种受体的IC50分别为5.3,1.5和1.2μM[1]。当用60μMVeliparib(ABT-888)处理时,c-Met敲低细胞显示4.2-(shMet-A; 95%CI = 4-4.5)或4.6倍(shMet-B; 95%CI = 4.4-4.8)生长抑制)。当用38μM的Veliparib处理时,c-Met敲低细胞显示2-(shMet-A; 95%CI = 1.5-2.5)或1.9倍(shMet-B; 95%CI = 1.3-2.5)生长抑制[2] 。在HaCaT细胞中,在Veliparib(ABT-888)处理后6小时,细胞活力在1,000μM硫芥(SM)暴露下显着增加,而Veliparib在100μMSM暴露下不保护细胞活力。此外,添加Veliparib不再显示SM暴露后24小时的保护作用[3]。
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体内研究 |
Veliparib(ABT-888)是一种有效的PARP抑制剂,具有良好的口服生物利用度,可以穿过血脑屏障,并在同系和异种移植肿瘤模型中增强替莫唑胺,铂,环磷酰胺和放射[1]。在MDA-MB-231异种移植肿瘤模型中,与单独的抑制剂相比,联合治疗(AG014699/Crizotinib和Veliparib(ABT-888)/ Foretinib)显着降低肿瘤生长[2]。
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激酶实验 |
PARP1酶活性通过使用商业测定试剂盒测量,除了使用含有野生型PARP1或PARP Y907突变体的细胞裂解物代替试剂盒中包含的PARP1蛋白。向每个反应中加入总裂解物(500ng)。 PARP抑制剂Veliparib(ABT-888)的剂量过程为0.01至1,000μM。使用平板读数器测量与底物一起孵育后测定的野生型和突变体的PARP酶活性[2]。
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细胞实验 |
使用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)定量细胞活力。该测定基于Dojindo的高度水溶性四唑盐。 WST-8被细胞中的脱氢酶还原,得到橙色的水溶性甲dye染料。由细胞中的脱氢酶产生的甲dye染料的量与活细胞的数量成正比。简而言之,将指数生长的HaCaT细胞以10,000个细胞/孔的密度接种在96孔板中。暴露于硫芥(SM)6小时或24小时后,加入Veliparib,加入CCK-8试剂[3。
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动物实验 |
将小鼠[2] MDA-MB-231(0.5×106),HCC1937(2×106)或MCF-7(5×106)细胞注射到6只雌性裸鼠(Swiss Nu / Nu)小鼠的乳脂肪垫中。 -8周龄。将A1034(0.5×106)细胞注射到6-8周龄的雌性FVB / NJ小鼠的乳房脂肪垫中。将H1993(0.5×106)细胞皮下注射到6-8周龄的雌性裸(Swiss Nu / Nu)小鼠的右胁腹中。当肿瘤体积达到50 mm3时,克唑替尼(5 mg / kg)和Foretinib(5 mg / kg),AG014699(5 mg / kg)和Veliparib(25 mg / kg)溶于50 mM醋酸钠水溶液,pH 4 ,作为单一药剂每周给小鼠施用五次,或者组合施用图例中指定的天数。在指定的时间点测量肿瘤,并通过下式计算肿瘤体积:π/ 6×长度×宽度2。对于MDA-MB-231和A1034异种移植小鼠模型,使用IVIS成像系统在治疗之前和之后对小鼠成像以评估肿瘤生长。给小鼠注射100μLD-荧光素(PBS中15mg / mL)。 10分钟后,用氧气和异氟烷的混合物麻醉小鼠,并使用IVIS成像系统成像。在实验中保持成像参数用于比较分析。
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参考文献 |
[1]. Donawho CK, et al. ABT-888, an orally active poly(ADP-ribose) polymerase inhibitor that potentiates DNA-damaging agents in preclinical tumor models. Clin Cancer Res. 2007 May 1;13(9):2728-37. [2]. Du Y, et al. Blocking c-Met-mediated PARP1 phosphorylation enhances anti-tumor effects of PARP inhibitors. Nat Med. 2016 Feb;22(2):194-201. [3]. Liu F, et al. Effects of poly (ADP-ribose) polymerase-1 (PARP-1) inhibition on sulfur mustard-induced cutaneous injuries in vitro and in vivo. PeerJ. 2016 Apr 4;4:e1890.
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