1959551-26-8

• 常用中文名：FT671
• 常用英文名：FT671
• CAS号：1959551-26-8
• 分子式：C₂₄H₂₃F₄N₇O₃
• 分子量：533.48
• 相关类别： 信号通路 细胞周期/DNA损伤 去泛素化酶
• 发布时间：2018-04-25 02:46:52
• 更新时间：2024-01-11 11:37:31
• FT671是有效,选择性的 USP7 抑制剂,IC50 值为 52 nM,与USP7催化域结合的 Kd 值为65 nM。

名称

• 中文名: FT671
• 英文名: FT671

物化性质

• 分子式: C₂₄H₂₃F₄N₇O₃
• 分子量: 533.48
• 储存条件: -20°C，密闭，干燥

生物活性

• 描述: FT671是有效,选择性的 USP7 抑制剂,IC50 值为 52 nM,与USP7催化域结合的 Kd 值为65 nM。
• 相关类别:
  信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> 去泛素化酶
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  IC50: 52 nM (USP7)[1] Kd: 65 nM (USP7)[1]

• 体外研究: FT671与USP7催化结构域(USP7CD;残基208-560)结合,表观解离常数(Kd)值为65nM(sem范围：45-92)。 FT671抑制USP7的半数最大抑制浓度(IC50)值为52(29-94)nM(USP7CD)。源自结肠直肠癌(HCT116)或骨肉瘤(U2OS)的细胞系响应于USP7敲低,p53稳定化和p21诱导,导致生长停滞和细胞凋亡。类似地,FT671增加这些细胞系中的p53蛋白水平,导致p53靶基因的诱导,包括BBC3(编码PUMA),CDKN1A(p21),RPS27L(S27L)和MDM2。 p53的增加与MDM2降解的增加相关,其最初由p53诱导的MDM2表达平衡,但在延长的化合物处理后对MDM2蛋白水平具有影响。 FT671导致神经母细胞瘤细胞系IMR-32中N-Myc的降解和p53的上调。 FT671还稳定MM.1S多发性骨髓瘤细胞系中的p53,其与MDM2泛素化增加相关并导致p53靶基因的表达。 FT671可阻断MM.1S细胞的增殖,IC50值为33 nM [1]。
• 体内研究: 用FT671处理小鼠导致肿瘤生长的显着剂量依赖性抑制。 FT671即使在高剂量下也具有良好的耐受性,并且在研究期间没有观察到显着的体重减轻或恶病质[1]。
• 激酶实验: 为了确定化合物IC 50值，将化合物（包括FT671）在100％DMSO中以100μM三倍12点稀释系列稀释。使用Echo将100nL的100倍浓缩溶液分配到黑色384孔Proxiplates中。加入25nM遍在蛋白 - 罗丹明110，以及重组USP7CD（3nM）或USP7C-术语（30-125pM，取决于批次活性），并将板在室温下温育1小时。通过添加2.5μL柠檬酸至终浓度10mM终止反应，然后在具有485nm激发/ 520nm发射光学模块的Pherastar上测量荧光强度[1]。
• 细胞实验: 将MM.1S以每孔3,500个细胞的起始密度接种于40μL补充有2mM L-谷氨酰胺，10％胎牛血清，1％青霉素/链霉素和10mM HEPES，pH7.4的RPMI-1640中。将细胞接种在384孔黑色板中，并在37℃，5％CO 2的湿润气氛中孵育12小时，然后使用ECHO 525声学分配器加入DMSO溶解的FT671。最终的DMSO浓度为0.5％（v / v）。加入化合物后，将细胞在37℃，5％CO 2的湿润气氛中温育120小时。实验一式三份，同时在不同的平板上进行。使用CellTiter-Glo 2.0进行活力测定。使用Envision读板仪测量发光，并将其标准化为用0.5％（v / v）DMSO处理的样品。使用ActivityBase [1]中的非线性回归算法计算IC50值。
• 动物实验: 小鼠[1]对于药代动力学/药效学（PK / PD）研究，当肿瘤达到平均体积318mm 3时，通过口服强饲法单次给予200,75或25mg / kg FT671。 10％DMA，90％PEG 400用作载体对照（每个时间点每组n = 5只小鼠）。在0.5小时，2小时，6小时和24小时时间点收集肿瘤样品并快速冷冻用于后续分析。车辆控制样本在24小时时间点获得[1]。
• 参考文献:

  [1]. Turnbull AP, et al. Molecular basis of USP7 inhibition by selective small-molecule inhibitors. Nature. 2017 Oct 26;550(7677):481-486.