372196-77-5

• 常用中文名：PIK-75 HCl
• 常用英文名：PIK-75 HCl
• CAS号：372196-77-5
• 分子式：C₁₆H₁₅BrClN₅O₄S
• 分子量：488.74
• 相关类别： 生物化工 抑制剂 PI3K/Akt/mTOR抑制剂(PI3K/Akt/mTOR) PI3K 抑制剂
• 发布时间：2016-05-18 16:12:19
• 更新时间：2024-01-07 10:11:07
• PIK-75 是一种 DNA-PK 和 PI3K 抑制剂,抑制 DNA-PK,p110α 和 p110γ,IC50 分别为 2, 5.8 和 76 nM。PIK-75 抑制 p110α 效果比抑制 p110β (IC50=1.3 μM) 高 200 多倍。

名称

• 中文名: 2-甲基-5-硝基苯磺酸 [(6-溴咪唑并[1,2-A]吡啶-3-基)亚甲基]甲基肼盐酸盐
• 英文名: N-[(E)-(6-bromoimidazo[1,2-a]pyridin-3-yl)methylideneamino]-N,2-dimethyl-5-nitrobenzenesulfonamide,hydrochloride
• 英文别名: Benzenesulfonic acid, 2-methyl-5-nitro-, 2-[(1Z)-(6-bromoimidazo[1,2-a]pyridin-3-yl)methylene]-1-methylhydrazide; PIK75,PIK-75 Hydrochloride; N'-[(Z)-(6-Bromoimidazo[1,2-a]pyridin-3-yl)methylene]-N,2-dimethyl-5-nitrobenzenesulfonohydrazide; PIK-75 Hydrochloride; PIK 75; N'-[(E)-(6-Bromoimidazo[1,2-a]pyridin-3-yl)methylene]-N,2-dimethyl-5-nitrobenzenesulfonohydrazide hydrochloride (1:1); S1205_Selleck; EC-000.2124; Benzenesulfonic acid, 2-methyl-5-nitro-, 2-[(1E)-(6-bromoimidazo[1,2-a]pyridin-3-yl)methylene]-1-methylhydrazide, hydrochloride (1:1); cc-499; PIK-75

物化性质

• 密度: 1.7±0.1 g/cm3
• 分子式: C₁₆H₁₅BrClN₅O₄S
• 分子量: 488.74
• PSA: 121.24000
• LogP: 3.84
• 折射率: 1.701
• 储存条件: -20°C

生物活性

• 描述: PIK-75 是一种 DNA-PK 和 PI3K 抑制剂,抑制 DNA-PK,p110α 和 p110γ,IC50 分别为 2, 5.8 和 76 nM。PIK-75 抑制 p110α 效果比抑制 p110β (IC50=1.3 μM) 高 200 多倍。
• 相关类别:
  信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> DNA-PK
  信号通路 >> PI3K/Akt/mTOR 信号通路 >> DNA-PK
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  DNA-PK:2 nM (IC50)

  p110α:5.8 nM (IC50)

  p110γ:76 nM (IC50)

  p110δ:510 nM (IC50)

  p110β:1.3 μM (IC50)

  hsVPS34:2.6 μM (IC50)

  PI3KC2β:1 μM (IC50)

  PI3KC2α:10 μM (IC50)

  mTORC1:1 μM (IC50)

  mTORC2:10 μM (IC50)

  ATM:2.3 μM (IC50)

  ATR:21 μM (IC50)

  PI4KIIIβ:50 μM (IC50)

• 体外研究: PIK-75还抑制p110δ,PI3KC2β,mTORC1,ATM,hsVPS34,PI3KC2α,mTORC2,ATR和PI4KIIIβ,IC50为510 nM,~1μM,~1μM,2.3μM,2.6μM,~10μM,~10μM,分别为21μM,~50μM。 PIK-75单独阻断L6肌管和3T3-L1脂肪细胞中的Thr308磷酸化,IC50值分别为1.2和1.3μM[1]。 PIK-75是一种竞争性p110α抑制剂,相对于底物磷脂酰肌醇(PI),与大多数其他PI3K抑制剂相反,后者在ATP位点或其附近结合。使用序列分析和抑制剂复合物与p110γ和p110δ同种型的现有晶体结构,鉴定了非保守氨基酸的新区域(区域2),其被假定参与PIK-75p110α选择性。使用鉴定的非保守氨基酸至丙氨酸的体外突变对区域2进行分析,表明Ser773是参与PIK-75结合的关键氨基酸,与野生型相比,IC50增加8倍。进行进一步的动力学实验以确定PIK-75对ATP和PI与p11αS773D突变体结合的动力学的影响。使用浓度为0,50,100和200nM PIK-75的一系列PI浓度估计活性。 PI的Km为11.2μM,而野生型酶的Km为7.0μM。 PIK-75的Ki估计为146 nM,比野生型酶(2.3 nM)的估计值增加64倍[2]。用递增浓度的PIK-75处理MIA PaCa-2和AsPC-1细胞48小时,并通过MTT测定法测定细胞活力。 PIK-75通过凋亡细胞死亡抑制胰腺癌细胞的增殖。亚微米浓度的PIK-75足以在48小时处理后抑制胰腺癌,MIA PaCa-2和AsPC-1细胞的增殖。 PIK-75还可以减少胰腺癌MIA PaCa-2和AsPC-1细胞的集落形成[3]
• 体内研究: PIK-75增强吉西他滨在体内的抗肿瘤作用。通过体内小鼠异种移植模型进一步证明了PIK-75 /吉西他滨组合的作用。携带MIA PaCa-2肿瘤的小鼠与吉西他滨(20mg/kg),PIK-75(2mg/kg)或两种药物的组合一起施用。由于PIK-75是一种可逆抑制剂,PIK-75每周给药5次,以确保维持足够的抑制作用。吉西他滨每周给药两次。吉西他滨或PIK-75可使肿瘤生长降至相似程度[3]
• 激酶实验: 在50μL的20mM HEPES，pH 7.5和含有180μM磷脂酰肌醇的5mM MgCl 2中测定PI3K酶活性，通过加入100μMATP（含有2.5μCi的[γ-32P] ATP）开始反应。在室温下孵育30分钟后，通过加入50μL1MHCl终止酶反应。然后用100μL氯仿/甲醇[1：1（v / v）]和250μL2MKCl提取磷脂，然后进行液体闪烁计数。将抑制剂（例如，PIK75））在20％（v / v）DMSO中稀释以产生浓度与酶活性曲线的抑制，然后使用Prism版本5.00对Windows进行分析以计算IC50 [2]。
• 细胞实验: 将MIA PaCa-2细胞维持在含有10％热灭活的胎牛血清（HI-FBS），2.5％马血清（HS）和100U / mL青霉素/链霉素的Dulbecco改良的Eagle培养基（DMEM）中。 AsPC-1细胞在补充有20％HI-FBS，100U / mL青霉素/链霉素和1mM丙酮酸钠的RPMI-1640培养基中培养。每孔总共2,000个人胰腺癌细胞（MIA PaCa-2或AsPC-1）接种于96孔平底板中，然后用吉西他滨，单独PIK-75（0.1μM，0.3μM和1μM）处理）或两种具有指定浓度的药物的组合。在指定的时间，向每个孔中加入20μL的1mg / mL MTT的PBS溶液，并进一步温育~4小时。离心并除去培养基后，向每个孔中加入150μLDMSO以溶解甲crystals晶体。使用ELx808吸光度酶标仪在562nm处测量吸光度。未处理细胞的吸光度指定为100％，相对活细胞表示为该值的百分比[3]
• 动物实验: 将与Matrigel混合的小鼠[3] MIA PaCa-2细胞（~1.7×10 6个细胞/小鼠）皮下注射到6周龄的雄性无胸腺裸（Foxn1nu）小鼠的胁腹中。将吉西他滨（50mg / mL）溶解在PBS中，并将PIK-75（20mg / mL）溶解在DMSO中。注射溶液在无菌水中制成10％的Cremophor EL和3％的聚（乙二醇）400。在给予化合物之前，将吉西他滨在PBS中进一步稀释，并将DMSO或PIK-75在注射溶液中进一步稀释，并通过0.2μm过滤单元灭菌。将这些稀释剂以1：1的比例混合并施用到小鼠的腹膜腔中。吉西他滨（20 mg / kg）或吉西他滨（20 mg / kg）/ PIK-75（2 mg / kg）组合每周给药两次，载体对照和PIK-75（2 mg / kg）每周给药5次。每周测量体重和肿瘤大小3次。计算肿瘤体积。
• 参考文献:

  [1]. Knight ZA, et al. A pharmacological map of the PI3-K family defines a role for p110alpha in insulin signaling. Cell. 2006 May 19;125(4):733-47.

  [2]. Zheng Z, et al. Isoform-selective inhibition of phosphoinositide 3-kinase: identification of a new region of nonconserved amino acids critical for p110α inhibition. Mol Pharmacol. 2011 Oct;80(4):657-64.

  [3]. Duong HQ, et al. Inhibition of NRF2 by PIK-75 augments sensitivity of pancreatic cancer cells to gemcitabine. Int J Oncol. 2014 Mar;44(3):959-69.