N-ETHYL-N'-[4-[5,6,7,8-四氢-4-[(3S)-3-甲基-4-吗啉基]-7-(3-氧杂环丁基)吡啶并[3,4-D]嘧啶-2-基]苯基]脲

• 常用名: N-ETHYL-N'-[4-[5,6,7,8-四氢-4-[(3S)-3-甲基-4-吗啉基]-7-(3-氧杂环丁基)吡啶并[3,4-D]嘧啶-2-基]苯基]脲
• 英文名: GDC-0349
• CAS号: 1207360-89-1
• 分子量: 452.549
• 密度: 1.3±0.1 g/cm3
• 沸点: 571.3±50.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₂₄H₃₂N₆O₃
• 熔点: N/A
• 闪点: 299.3±30.1 °C

用途

GDC-0349 是一种有效的,ATP竞争性的选择性 mTOR 抑制剂,Ki 值为 3.8 nM。GDC-0349 抑制 mTORC1 和 mTORC2 复合体。

名称

• 中文名: N-ETHYL-N'-[4-[5,6,7,8-四氢-4-[(3S)-3-甲基-4-吗啉基]-7-(3-氧杂环丁基)吡啶并[3,4-D]嘧啶-2-基]苯基]脲
• 英文名: 1-ethyl-3-[4-[4-[(3S)-3-methylmorpholin-4-yl]-7-(oxetan-3-yl)-6,8-dihydro-5H-pyrido[3,4-d]pyrimidin-2-yl]phenyl]urea

生物活性

• 描述: GDC-0349 是一种有效的,ATP竞争性的选择性 mTOR 抑制剂,Ki 值为 3.8 nM。GDC-0349 抑制 mTORC1 和 mTORC2 复合体。
• 相关类别:
  信号通路 >> 自噬 >> 自噬
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  mTOR:3.8 nM (Ki)

  mTORC1

  mTORC2

  Autophagy

• 体外研究: GDC-0349(化合物8h)是一种显着选择性的mTOR抑制剂,对266种激酶的抑制作用小于25％,包括在1μM时测试的所有PI3K亚型[1]。
• 体内研究: 当在MCF7-neo/Her2肿瘤异种移植模型(PI3K突变)中每天一次口服给予无胸腺小鼠时,GDC-0349(化合物8h)以剂量依赖性方式抑制肿瘤生长,最大程度地达到停滞(99％TGI)耐受剂量。体重变化小于最高剂量的10％。 GDC-0349在其他异种移植模型中也是有效的,包括PC3(PTEN null)和786-0(VHL突变体)。与每天一次相比,当GDC-0349以更高剂量每三天施用一次时,实现相似水平的肿瘤生长抑制。 GDC-0349在两只小鼠(100 mL/min/kg)和大鼠(大鼠中171 mL/min/kg)中游离血浆清除率降低约10倍[1]。
• 激酶实验: 通过将纯化的重组酶（mTOR（1360-2549）+ GBL，内部制备）在含有ATP，MnCl 2和荧光标记的mTOR底物（例如GFP-4E-）的反应混合物中温育来评估mTOR酶的激酶活性。 BP1。通过添加铽标记的磷酸特异性抗体，例如Tb标记的抗p4E-BP1 T37 / T46，EDTA和TR-FRET缓冲溶液来终止反应。通过时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）检测产物形成，当磷酸化底物和标记抗体由于磷酸特异性结合而非常接近时发生。使用Perkin Elmer Envision读板仪测量酶活性作为TR-FRET信号的增加。使用以下方案在384孔Proxiplate Plus中进行测定：以10μM的最高终浓度开始，以10点剂量曲线测试化合物活性。将它们在100％DMSO中连续稀释，然后用测定缓冲液进一步稀释。含有0.25nM mTOR + GBL酶，400nM GFP-4E-BP1,8μMATP，50mM Hepes pH 7.5,0.01％Tween 20,10mM MnCl 2,1mM EGTA，1mM DTT，1的反应混合物（8μL）将％DMSO（±化合物）在室温下温育30分钟。然后加入8μL含有2nM Tb-抗-p4E-BP1抗体和10mM EDTA稀释的TR-FRET缓冲液的溶液并孵育30分钟以终止反应。用Envision读板器扫描平板。 Ki值在Assay Explorer中使用Morrison ATP竞争性紧密结合方程计算Ki表观测定[1]。
• 动物实验: 小鼠[1]将人乳腺癌细胞（MCF7 neo / HER2;经修饰的ATCC变体）皮下植入雌性NCR裸鼠的乳腺脂肪垫中（5×106细胞/ 100uL的1：1 Hank's平衡盐溶液混合物（ HBSS）/基质胶）。为了支持雌激素依赖性生长，给受体动物预先植入0.36mg雌激素颗粒。监测肿瘤直至它们达到约200-225mm 3的平均肿瘤体积，然后将类似大小的肿瘤随机分配至治疗组（n = 5-10）。将人786-O肾腺癌细胞皮下植入雌性nu / nu小鼠的右后侧（在1：1PBS / Matrigel中1×10 7个细胞/200μL）。监测肿瘤直至它们达到约205mm 3的平均肿瘤体积，然后将类似大小的肿瘤随机分配至治疗组（n = 10）。将人前列腺癌NCI-PC3细胞重悬于Hank's平衡盐溶液中，并皮下植入120只雌性NCR裸鼠的右后腹侧。每只小鼠注射5×106个细胞。监测肿瘤直至它们达到约200-250mm 3的平均肿瘤体积。 GDC-0349的二甲磺酸盐通过口服管饲法（100uL剂量/ 25gm动物）每天或每三天给药14-21天。每周两次收集肿瘤体积和体重测量值。计算肿瘤体积。
• 参考文献:

  [1]. Pei Z, et al. Discovery and Biological Profiling of Potent and Selective mTOR Inhibitor GDC-0349. ACS Med Chem Lett. 2012 Nov 29;4(1):103-7.

物理化学性质

• 密度: 1.3±0.1 g/cm3
• 沸点: 571.3±50.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₂₄H₃₂N₆O₃
• 分子量: 452.549
• 闪点: 299.3±30.1 °C
• 精确质量: 452.253601
• PSA: 95.34000
• LogP: 1.04
• 外观性状: 粉末
• 蒸汽压: 0.0±1.6 mmHg at 25°C
• 折射率: 1.620
• 储存条件: -20℃

英文别名

• (S)-1-ethyl-3-(4-(4-(3-methylmorpholino)-7-(oxetan-3-yl)-5,6,7,8-tetrahydropyrido[3,4-d]pyrimidin-2-yl)phenyl)urea
• Urea, N-ethyl-N'-[4-[5,6,7,8-tetrahydro-4-[(3S)-3-methyl-4-morpholinyl]-7-(3-oxetanyl)pyrido[3,4-d]pyrimidin-2-yl]phenyl]-
• GDC-0349||GDC0349
• 1-Ethyl-3-(4-{4-[(3S)-3-methyl-4-morpholinyl]-7-(3-oxetanyl)-5,6,7,8-tetrahydropyrido[3,4-d]pyrimidin-2-yl}phenyl)urea
• GDC-0349