描述 |
GGTI298 是有效的 GGTase I 抑制剂,能够抑制 geranylgeranylated Rap1A 的过程,对 farnesylated Ha-Ras 的过程也有一定影响,在体内,IC50 值分别为 3 和 > 20 μM。
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相关类别 |
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靶点 |
IC50: 3 μM (Rap1A, in vivo), > 20 μM (Ha-Ras, in vivo)[3]
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体外研究 |
RhoA抑制剂(GGTI298)和ROCK抑制剂(H1152)均显着降低cAMP激动剂刺激的IK(ap),而后者还减少了KCNN4c与T84WT细胞中顶端膜标记小麦胚凝集素的共定位[1]。 DR4的敲低消除了NF-κB活化,导致由GGTI298和TRAIL的组合诱导的DR5依赖性细胞凋亡的敏化。 GGTI298/TRAIL激活NF-κB并抑制Akt。敲低DR5,预防GGTI298/TRAIL诱导的IκBα和p-Akt减少,表明DR5介导GGTI298/TRAIL诱导的IκBα和p-Akt的减少。相反,DR4敲低进一步促进GGTI298/TRAIL诱导的p-Akt减少[2]。
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体内研究 |
体内小鼠回肠环实验表明,当与霍乱毒素一起注射到环中时,TRAM-34,GGTI298或H1152以剂量依赖性方式减少液体积聚[1]。
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激酶实验 |
用Reporter裂解缓冲液裂解给定的细胞,并使用荧光素酶测定系统在发光计中进行荧光素酶活性测定。相对荧光素酶活性标准化为蛋白质含量。
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细胞实验 |
将细胞接种在96孔细胞培养板中,并在第二天用所示的试剂处理。使用磺酰罗丹明B测定法测定活细胞数。
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动物实验 |
通过改良的兔回肠环测定在6-8周龄小鼠中进行回肠环实验。在肠消毒后,将动物在手术前保持禁食24小时并且随意喂食水。通过氯胺酮(35mg / kg体重)和甲苯噻嗪(5mg / kg体重)的混合物诱导麻醉。进行剖腹手术,通过用不可吸收的丝连接,在回肠末端收缩5cm长的实验环。随着结扎器的收紧,通过装有一次性针头的结核菌素注射器将下列液体滴入每个环中:纯CT(1μg;阳性对照),生理盐水(阴性对照),CT( 1μg)+ TRAM-34(不同浓度,μM,如图7所示),CT(1μg)+ H1152(1μM),CT(1μg)+ GGTI298(不同浓度,μM),一种特异性抑制剂Rap1A。将肠返回腹膜,缝合小鼠并将其放回笼中。 6小时后,通过颈脱位处死这些动物,切下环。收集来自每个回路的流体,并计算回路中包含的流体量相对于回路长度的比率(流体积聚比(g / cm))作为各种抑制剂功效的反映。
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参考文献 |
[1]. Sheikh IA, et al. The Epac1 signaling pathway regulates Cl- secretion via modulation of apical KCNN4c channels in diarrhea. J Biol Chem. 2013 Jul 12;288(28):20404-15. [2]. Chen S, et al. Dissecting the roles of DR4, DR5 and c-FLIP in the regulation of geranylgeranyltransferase I inhibition-mediated augmentation of TRAIL-induced apoptosis. Mol Cancer. 2010 Jan 29;9:23. [3]. McGuire TF, et al. Platelet-derived growth factor receptor tyrosine phosphorylation requires protein geranylgeranylation but not farnesylation. J Biol Chem. 1996 Nov 1;271(44):27402-7.
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