| 描述 |
MK-0974是降钙素基因相关肽 (CGRP) 受体拮抗剂,与人和恒河猴CGRP结合的Ki分别为0.77 nM 和 1.2 nM。
|
| 相关类别 |
|
| 靶点 |
Ki: 0.77 nM (human CGRP), 1.2 nM (rhesus CGRP)
|
| 体外研究 |
MK-0974显示犬和大鼠受体的亲和力(Ki),分别为1204nM和1192nM(n = 10)。 MK-0974在人CGRP受体表达HEK293细胞中有效阻断人α-CGRP刺激的cAMP反应,IC50为2.2 nM [1]。 MK-0974显示与SK-N-MC膜的可饱和结合,KD为1.9nM,Bmax为479fmol/mg蛋白质。 MK-0974还显示与恒河猴小脑匀浆的可饱和结合,KD为1.3 nM,Bmax为20 fmol/mg [2]。
|
| 体内研究 |
MK-0974(静脉推注,1mg/kg)表明该拮抗剂的功效是时间依赖性的并且与血浆水平相关[1]。在猴子中,MK-0974的药代动力学在0.5-10 mg/kg静脉内剂量下保持线性,但血浆浓度-时间曲线下的口腔面积(AUC)增加(5-30 mg/kg)是剂量的15倍-比例[3]。
|
| 细胞实验 |
将用CLR / RAMP1稳定转染的HEK293细胞以85,000个细胞/孔接种于96孔聚-D-赖氨酸包被的平板中的完全生长培养基中，并在测定前培养19小时。用PBS洗涤细胞，然后在存在或不存在50％人血清的情况下与抑制剂一起在37℃和95％湿度下在含有L-谷氨酰胺和1g /的Cellgro完全无血清/低蛋白培养基中孵育30分钟。 L牛血清白蛋白。将异丁基甲基黄嘌呤以300μM的浓度添加至细胞中，并在37℃下孵育30分钟。将人α-CGRP以0.3nM的浓度添加到细胞中，并使其在37℃下孵育5分钟。在α-CGRP刺激后，用PBS洗涤细胞，并根据制造商推荐的方案使用两阶段测定程序处理cAMP测定。绘制剂量 - 反应曲线，并确定IC 50值。
|
| 动物实验 |
猴子：体重4到10公斤的恒河猴（雄性和雌性）最初用氯胺酮（0.1 mL / kg im）麻醉，然后置于温度控制的水循环毯上仰卧位，并用3 mm气管插管管连接到1升氧气/ 1到2％异氟醚气体麻醉。将右隐静脉插管用于静脉内药物递送，并且从左隐静脉动脉获得血液样品。四个橡胶O形圈（内径8mm）放置在前臂的腹侧，而不是直接定位在可见血管上。
|
| 参考文献 |
[1]. Salvatore CA, et al. Pharmacological characterization of MK-0974 [N-[(3R,6S)-6-(2,3-difluorophenyl)-2-oxo-1-(2,2,2-trifluoroethyl)azepan-3-yl]-4-(2-oxo-2,3-dihydro-1H-imidazo[4,5-b]pyridin-1-yl)piperidine-1-carboxamide], a potent and orally active calcitonin gene-related peptide receptor antagonist for the treatment of migraine. J Pharmacol Exp Ther. 2008 Feb;324(2):416-21. Epub 2007 Nov 26. [2]. Moore EL, et al. Examining the binding properties of MK-0974: a CGRP receptor antagonist for the acute treatment of migraine. Eur J Pharmacol. 2009 Jan 14;602(2-3):250-4. [3]. Roller S, et al. Preclinical pharmacokinetics of MK-0974, an orally active calcitonin-gene related peptide (CGRP)-receptor antagonist, mechanism of dose dependency and species differences. Xenobiotica. 2009 Jan;39(1):33-45.
|
