Linsitinib

Losmapimod是 IGF-1 和胰岛素受体的双重抑制剂,IC50 分别为35 和 75 nM。

信号通路 >> 蛋白酪氨酸激酶 >> IGF-1R

信号通路 >> 蛋白酪氨酸激酶 >> 胰岛素受体

研究领域 >> 癌症

IC50: 35 nM (IGF-1R), 75 nM (InsR)

Linsitinib抑制IGF-1R自身磷酸化和下游信号蛋白Akt,ERK1/2和S6激酶的激活,IC50为0.028至0.13μM。 Linsitinib通过与C-螺旋的相互作用实现靶蛋白的中间构象。 Linsitinib在肝微粒体中显示出有利的代谢稳定性。 Linsitinib在1μM浓度下完全抑制IR和IGF-1R磷酸化。 Linsitinib抑制几种肿瘤细胞系的增殖,包括非小细胞肺癌和结直肠癌(CRC)肿瘤细胞系,EC50为0.021-0.810μM[1]。

Linsitinib在IGF-1R驱动的异种移植小鼠模型中抑制肿瘤生长,在75mg/kg和60％TGI的剂量下具有100％TGI和55％消退,并且在25mg/kg的剂量下无消退。 Linsitinib给药在狗,大鼠和小鼠中诱导其自身的不同消除半衰期,消除半衰期分别为1.18小时,2.64小时和2.14小时。在雌性Sprague-Dawley大鼠和女性CD-1小鼠中每日一次的不同单剂量的Linsitinib给药显示Vmax与Linsitinib剂量不是剂量成比例的。在给药12天后,Linsitinib以25mg/kg的剂量升高血糖水平。 LIZitinib在IGF-1R驱动的全长人IGF-1R(LISN)异种移植小鼠模型中以75mg/kg的单剂量给药,在4至24小时内用血浆药物实现IGF-1R磷酸化(80％)的最大抑制浓度为26.6-4.77μM[1]。在NCI-H292异种移植物小鼠中以60mg/kg的单剂量施用的Linsitinib在体内治疗后2,4和24小时抑制葡萄糖的摄取。 Linsitinib抑制NCI-H292异种移植小鼠模型中肿瘤的生长[2]。

蛋白激酶测定或者通过基于ELISA的测定方法（IGF-1R，IR，EGFR和KDR）在内部进行，或者通过使用100μM浓度的ATP的放射测定方法进行。内部ELISA测定使用聚（Glu：Tyr）作为与96孔测定板表面结合的底物，并使用与辣根过氧化物酶偶联的抗磷酸酪氨酸抗体检测磷酸化。通过测量405 / 490nm处的吸光度，使用ABTS作为过氧化物酶底物定量结合的抗体。所有测定使用纯化的重组激酶催化结构域人IGF-1R或EGFR的重组酶在昆虫细胞中表达为NH2-末端谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白，并在室内纯化。 IC50值由抑制百分比对log10化合物浓度的S形剂量 - 反应曲线确定。除非另有说明，否则使用内部测定进行至少三次一式两份的测量。使用ProfilerProTM激酶选择性测定试剂盒，对一组激酶分析浓度为1μM的Linsitinib。

对于细胞增殖的测定，将细胞接种到含有10％FCS的适当培养基中的96孔板中，并在Linsitinib存在下以各种浓度培养3天。使用CellTiterGlo通过细胞内ATP含量的发光定量来确定细胞生长的抑制。数据表示为最大增殖的一部分，通过将存在不同浓度的Linsitinib时的细胞密度除以仅用载体（DMSO）处理的对照细胞的细胞密度来计算。

在指数细胞生长期间从细胞培养瓶中收获细胞，用无菌PBS洗涤两次至合适的浓度，然后皮下植入雌性nu / nu CD-1小鼠的右胁腹。将肿瘤建立至200±50mm 3大小，然后随机分成8只小鼠的治疗组，每组用于功效研究。如所示口服施用Linsitinib或媒介物。所示的％TGI值是整个给药期间的中值％TGI。 505的TGI被认为是重要的。生长延迟计算为TC，T和C是治疗（T）组和对照（C）组中平均肿瘤大小达到初始肿瘤体积的400％的天数。治疗不包括在此计算中。

[1]. Mulvihill MJ, et al. Discovery of OSI-906: a selective and orally efficacious dual inhibitor of the IGF-1 receptor and insulin receptor. Future Med Chem. 2009 Sep;1(6):1153-71.

[2]. McKinley ET, et al. 18FDG-PET predicts pharmacodynamic response to OSI-906, a dual IGF-1R/IR inhibitor, in preclinical mouse models of lung cancer. Clin Cancer Res. 2011 May 15;17(10):3332-40.

[3]. Li W, et al. Effectiveness of inhibitor rapamycin, saracatinib, linsitinib and JNJ-38877605 against human prostate cancer cells. Int J Clin Exp Med. 2015 Apr 15;8(4):6563-7.

[4]. Tajima K, et al. Metabolic recovery of lipodystrophy, liver steatosis, and pancreatic β cell proliferation after the withdrawal of OSI-906. Sci Rep. 2017 Jun 23;7(1):4119.

[5]. Mayu Kyohara, et al. Serum quantitative proteomic analysis reveals soluble EGFR to be a marker of insulin resistance in male mice and humans. Endocrinology. 2017 Oct 5.

胰岛素(人) | 胰岛素 | BMS 754807 | 苦鬼臼毒素 | NVP-AEW541 | 胰岛素样生长因子-1 受体拮抗剂 | AZD-3463 | (E)-3-(3-溴-4,5-二羟苯基)-N-(3,4,5-三羟基苄基)丙-2-烯硫代酰胺 | N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-[[3-异丙基-5-异恶唑基]甲基]-6-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,4-嘧啶二胺 | 2-[[2-[[1-[(二甲基氨基)乙酰基]-5-(甲氧基)-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基]氨基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]-6-氟-N-甲基苯甲酰胺 | 5-(3-苄氧基苯基)-7-[反式-3-[(吡咯烷-1-基)甲基]环丁基]-7H-吡咯并[2,3-D]嘧啶-4-胺 | AG1024 | 米格列酮(MSDC-0160) | 人参皂苷Rg5