1572414-83-5

• 常用中文名：ML-323
• 常用英文名：ML 323
• CAS号：1572414-83-5
• 分子式：C₂₃H₂₄N₆
• 分子量：384.477
• 相关类别： 生物化工 抑制剂 泛素化抑制剂(Ubiquitin) DUB 抑制剂
• 发布时间：2018-12-04 16:34:05
• 更新时间：2024-01-01 22:43:19
• ML-323 是一种有效的可逆的 USP1-UAF1 抑制剂,在Ub-Rho实验中,IC50 为 76 nM。

名称

• 中文名: ML-323
• 英文名: 4-​Pyrimidinamine, 5-​methyl-​2-​[2-​(1-​methylethyl)​phenyl]​-​N-​[[4-​(1H-​1,​2,​3-​triazol-​1-​yl)​phenyl]​methyl]​-
• 英文别名: N-(4-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)benzyl)-2-(2-isopropylphenyl)-5-methylpyrimidin-4-amine; 2-(2-Isopropylphenyl)-5-methyl-N-[4-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)benzyl]-4-pyrimidinamine; 4-Pyrimidinamine, 5-methyl-2-[2-(1-methylethyl)phenyl]-N-[[4-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl]methyl]-; ML-323

物化性质

• 密度: 1.2±0.1 g/cm3
• 沸点: 515.4±60.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₂₃H₂₄N₆
• 分子量: 384.477
• 闪点: 265.5±32.9 °C
• 精确质量: 384.206238
• PSA: 68.52000
• LogP: 4.61
• 蒸汽压: 0.0±1.3 mmHg at 25°C
• 折射率: 1.651
• 储存条件: 2-8°C

生物活性

• 描述: ML-323 是一种有效的可逆的 USP1-UAF1 抑制剂,在Ub-Rho实验中,IC50 为 76 nM。
• 相关类别:
  信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> 去泛素化酶
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  IC50: 76 nM (USP1-UAF1, in Ub-Rho assay)[1] Ki: 68 nM (USP1-UAF1)[1]

• 体外研究: ML-323(ML323)是USP1-UAF1脱遍在蛋白酶复合物的高效抑制剂,对人DUB,脱氧酶,脱鞘酶和无关蛋白酶具有出色的选择性。 ML-323是一种有效的USP1-UAF1抑制剂,在泛素-罗丹明(Ub-Rho)测定中IC50值为76 nM,在使用K63连接的双泛素(di-Ub)的正交凝胶测定中为174 nM和820 nM单泛素化的PCNA(Ub-PCNA)分别作为底物。 ML-323可能通过变构机制发挥其抑制作用。测得的游离酶(Ki)和酶-底物复合物(K'i)的ML-323抑制常数为68nM和183nM。此外,ML-323可增强非小细胞肺癌和骨肉瘤细胞中顺铂的细胞毒性[1]。 ML-323(ML323),一种探针分子,具有可逆的纳摩尔抑制活性和对USP1/UAF1的优异选择性。此外,ML-323增强了顺铂的细胞毒性,并增加了PCNA和FANCD2的内源性单泛素化水平,两种已知的USP1/UAF1细胞靶标[2]。
• 激酶实验: 对于DUB分析，ML-323以10μM的单剂量一式两份进行测试。使用Ub-7-酰氨基-4-甲基香豆素（AMC）作为底物监测DUB活性。随着时间监测来自游离AMC的荧光信号的增加，尽管仅使用斜率的初始线性部分（信号/分钟）进行分析。没有化合物的酶的活性被视为100％。对于蛋白酶分析，ML-323使用从20μM开始的针对70种蛋白酶的三倍连续稀释进行测试。在加入适当的酶底物之前，将蛋白酶与化合物预温育5-15分钟。通过读取荧光标记肽的荧光信号来测量酶活性[1]。
• 细胞实验: 使用CCK-8溶液通过细胞计数试剂盒（CCK）测定法测量细胞活力。对于集落形成测定，将细胞以每孔300-500个细胞的密度接种在六孔板中并生长过夜。然后用指定浓度的单独的ML-323，单独的顺铂或顺铂和ML-323（1：1或1：4）的组合处理细胞。用等体积DMSO和盐水处理的细胞用作对照。处理48小时后，加入新鲜生长培养基，并将细胞再孵育5-10天以允许集落形成。对于UV组合处理，用指定浓度的ML-323或等体积的DMSO处理细胞。 48小时后，除去培养基，以指定剂量在254nm照射细胞。加入新鲜生长培养基，并将细胞再孵育5-10天以允许集落形成。没有UV照射但用ML-323或等体积DMSO处理的细胞用作对照并指定为100％。形成菌落后，用甲醇固定细胞，用0.5％结晶紫染色。对由> 50个细胞组成的集落进行评分。菌落数由一式三份平板确定。使用GraphPad Prism生成剂量 - 反应曲线，并使用CalcuSyn进行分析以计算组合指数，该组合指数是在加入顺铂和USP1-UAF1抑制剂的固定比例后受影响的细胞分数[1]。
• 参考文献:

  [1]. Liang Q, et al. A selective USP1-UAF1 inhibitor links deubiquitination to DNA damage responses. Nat Chem Biol. 2014 Apr;10(4):298-304.

  [2]. Dexheimer TS, et al. Discovery of ML323 as a Novel Inhibitor of the USP1/UAF1 Deubiquitinase Complex. National Center for Biotechnology Information; 2010-2012 Oct 23.

安全

• 符号: GHS07
• 信号词: Warning
• 危害声明: H315-H319-H335
• 警示性声明: P261-P305 + P351 + P338
• 危险品运输编码: NONH for all modes of transport