| 描述 |
TMP778 是一种有效的、RORγt 的选择性逆向激动剂,其 FRET 检测出的 IC50 值为 7 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 7 nM (FRET assay), 63 nM (IL-17F promoter assay), 0.03 μM (in Th17 cells), 0.005 μM (in Tc17 cells)[1].
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| 体外研究 |
发现在2.5μm以上的TMP77开始对细胞生长产生毒性作用,但在Th17细胞极化条件下培养的RorγT-缺陷T细胞的增殖也降低,而不是RorγT依赖性。另外,这些抑制剂对细胞增殖、RORγt表达及其核移位均无抑制作用,但能有效抑制IL-17的产生。TMP778具有更宽的剂量范围和有效地降低IL-17的产生,这与它对RORγt的更高结合亲和力一致。这些数据表明,TMP778是RORγt抑制剂,最有可能降低IL-17的产生[2]。
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| 体内研究 |
与对照组相比,这三种化合物(如TMP778)均能延缓疾病的发生,并显著降低疾病进展的严重程度。与体外结果一致,TMP778治疗对疾病表型的影响最为显著。这种治疗不仅减少了浸润中枢神经系统(CNS)的单个核细胞的数量,而且极大地降低了中枢神经系统中IL-17+T细胞的百分比(包括IL-17+IFNγ+)。各组间中枢神经系统IFNγ+IL-17-T细胞百分率无明显变化,说明这些抑制剂均不影响Th1反应。TMP778强烈抑制Th17细胞的生成,减少分化Th17细胞产生IL-17,并显著改善EAE的进程[2]。
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| 细胞实验 |
在Th17细胞极化条件下，在96孔板中，在指示剂量的RORγT抑制剂（如TMP778:30、10、2.5、0.83、0.28、0.09μM）或溶媒控制DMSO存在下，原始CD4+T细胞被激活。48h后，每孔用1μCi 3H胸腺嘧啶核苷脉冲16h。使用Wallac液体闪烁计数器以每分钟计数来测量增殖[2]。
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| 动物实验 |
小鼠[2]EAE在C57BL/6小鼠中诱导，从第0天起，用MOG35-55加CFA免疫结合皮下注射抑制剂每日两次。C57BL／6小鼠用MOG35-55加CFA免疫，RORγT抑制剂（TMP78，每注射200μg，n＝19；TMP920，注射500μg，n＝7，地高辛，每次注射50μg，n=5，＞100μg导致小鼠死亡；DMSO，n=19）从第0天开始皮下注射两次。每天对小鼠进行EAE症状评估。在11天后，用不同的RORγt抑制剂治疗的小鼠组与用DMSO（载体对照）治疗的小鼠组进行比较[2]。
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| 参考文献 |
[1]. Skepner J, et al. Pharmacologic inhibition of RORγt regulates Th17 signature gene expression and suppresses cutaneous inflammation in vivo. J Immunol. 2014 Mar 15;192(6):2564-75. [2]. Xiao S, et al. Small-molecule RORγt antagonists inhibit T helper 17 cell transcriptional network by divergent mechanisms. Immunity. 2014 Apr 17;40(4):477-89.
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