336113-53-2

• 常用中文名：伊斯平斯
• 常用英文名：Ispinesib
• CAS号：336113-53-2
• 分子式：C₃₀H₃₃ClN₄O₂
• 分子量：517.062
• 相关类别： 生物化工 抑制剂 细胞骨架(Cytoskeletal Signaling) Kinesin 抑制剂
• 发布时间：2018-05-30 08:00:00
• 更新时间：2024-01-09 10:09:41
• Ispinesib 是一种特异性的 KSP 抑制剂,Ki app 值为 1.7 nM。

名称

• 中文名: 伊斯平斯
• 英文名: N-(3-aminopropyl)-N-[(1R)-1-(3-benzyl-7-chloro-4-oxoquinazolin-2-yl)-2-methylpropyl]-4-methylbenzamide
• 中文别名: 伊匹尼塞; 南昌霉素
• 英文别名: N-(3-aminopropyl)-N-[(1R)-1-(3-benzyl-7-chloro-4-oxo-3,4-dihydroquinazolin-2-yl)-2-methylpropyl]-4-methylbenzamide; N-(3-Aminopropyl)-N-[(1R)-1-(3-benzyl-7-chloro-4-oxo-3,4-dihydro-2-quinazolinyl)-2-methylpropyl]-4-methylbenzamide; Benzamide, N-(3-aminopropyl)-N-[(1R)-1-[7-chloro-3,4-dihydro-4-oxo-3-(phenylmethyl)-2-quinazolinyl]-2-methylpropyl]-4-methyl-; Ispinesib mesylate; S1452_Selleck; Ispinesib mesilate; Ispinesib; UNII-BKT5F9C2NI; SB-715992

物化性质

• 密度: 1.2±0.1 g/cm3
• 沸点: 708.0±70.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₃₀H₃₃ClN₄O₂
• 分子量: 517.062
• 闪点: 382.0±35.7 °C
• 精确质量: 516.229187
• PSA: 81.22000
• LogP: 5.20
• 外观性状: 粉末
• 蒸汽压: 0.0±2.3 mmHg at 25°C
• 折射率: 1.619
• 储存条件: -20℃

生物活性

• 描述: Ispinesib 是一种特异性的 KSP 抑制剂,Ki app 值为 1.7 nM。
• 相关类别:
  信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> 驱动蛋白
  信号通路 >> 细胞骨架 >> 驱动蛋白
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  KSP:1.7 nM (Ki app)

• 体外研究: Ispinesib是一种有效的,高度特异性的KSP抑制剂,Ki app为1.7 nM [1]。 Ispinesib(150 nM)抑制BT-474和MDA-MB-468细胞系,GI50分别为45和19 nM [2]。 Ispinesib(SB715992,15和30 nM)抑制PC-3前列腺癌细胞增殖48.65％和52.16％,诱导前列腺癌细胞凋亡分别为1094.88％和1516.70％。 Ispinesib up调节负责细胞凋亡和细胞周期停滞的基因,并下调负责细胞增殖和存活的基因。金雀异黄素可以增强Ispinesib的抗增殖和促凋亡活性[3]。
• 体内研究: Ispinesib(SCID,8 mg/kg;裸剂,10 mg/kg,q4d×3)可降低携带ER阳性(MCF7),HER2阳性(KPL4,HCC1954和BT-474)肿瘤异种移植物的小鼠的肿瘤体积,和三阴性(MDA-MB-468)乳腺癌细胞通过ip每4天重复一次,重复3次[2]。
• 激酶实验: 使用丙酮酸激酶 - 乳酸脱氢酶检测系统进行驱动蛋白特异性分析，该系统将ADP的产生与NADH的氧化偶联。在340nm处监测吸光度变化。使用纳摩尔浓度的KSP的稳态研究使用基于灵敏荧光的测定进行，该测定利用丙酮酸激酶，丙酮酸氧化酶和辣根过氧化物酶偶联检测系统，其将ADP的产生与Amplex Red的氧化偶联至荧光试卤。通过荧光监测试卤灵的产生（λ激发= 520nm和λemission= 580nm）。在补充有10μM紫杉醇的PEM25缓冲液[25mM Pipes-K +（pH 6.8），2mM MgCl 2,1mM EGTA]中进行稳态生化实验，用于涉及微管的实验。稳态抑制的IC 50在PEM25缓冲液中以500μMATP，5μMMT和1nM KSP测定。从浓度 - 响应曲线中提取Ispinesib的Ki app（表观抑制剂解离常数）估计，并对酶浓度进行明确校正[1]。
• 细胞实验: 将PC-3前列腺癌细胞以4×103细胞/孔的密度接种在96孔板中。将PC-3细胞温育24小时，以使其附着于组织培养板的每个孔的表面。然后，用不同浓度的试剂处理细胞并孵育1至3天。首先，分别用15和30nM的Ispinesib处理PC-3细胞。其次，用7.5或10nM的Ispinesib加30μM的染料木黄酮对PC-3细胞进行组合处理。最后，用30μM染料木黄酮预处理PC-3细胞24小时，然后用15nM的Ispinesib处理。用0.3mM Na 2 CO 3（载体对照）处理对照细胞。处理后，将PC3细胞在37℃下与MTT（0.5mg / mL）一起温育2小时，并在室温下将异丙醇温育1小时。然后通过使用ULTRA多功能微板读数器在595nm处测定每个样品的分光光度吸光度[3]。
• 动物实验: 肿瘤体积为~250mm 3的小鼠接受单剂量的Ispinesib（10mg / kg）。解剖肿瘤，固定在10％缓冲的福尔马林中，并包埋在石蜡中，制备5-μm组织切片。通过在50mM柠檬酸盐缓冲液（pH5.5）中煮沸来进行抗原修复，然后将切片在3％过氧化氢中温育，在PBS-0.1％Tween中洗涤，并在10％山羊血清中封闭。使用Alexa Fluor 488二抗检测磷酸 - 组蛋白H3（PH3）抗体。用显微镜以×10放大率拍摄图像，并使用MetaMorph软件捕获图像，通过计算每个总细胞的PH3阳性细胞的面积比来量化PH3表达。完成Ki67 /切割的胱天蛋白酶-3染色。非荧光图像在Olympus BX41显微镜上以×20放大率拍摄[2]。
• 参考文献:

  [1]. Lad L, et al. Mechanism of inhibition of human KSP by ispinesib. Biochemistry. 2008 Mar 18;47(11):3576-85.

  [2]. Purcell JW, et al. Activity of the kinesin spindle protein inhibitor ispinesib (SB-715992) in models of breast cancer. Clin Cancer Res. 2010 Jan 15;16(2):566-76.

  [3]. Davis DA, et al. Increased therapeutic potential of an experimental anti-mitotic inhibitor SB715992 by genistein in PC-3 human prostate cancer cell line. BMC Cancer. 2006 Jan 24;6:22.