| 描述 |
CTX1 是一种新型小分子 p53 激活剂。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
p53[1]
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| 体外研究 |
与通过Hdm2过表达使p53失活或使用p53靶向shRNA敲低p53的细胞相比,CTX1优先在表达HdmX的细胞中诱导显着的p53依赖性细胞死亡。 CTX1可诱导p53突变细胞系HT29中的p53蛋白水平。还发现CTX1以与AML细胞系类似的方式在原发性AML患者样品上显示出作为单一药剂的有效活性(LD50~1μM)。在HCT116 p53-野生型细胞中用CTX1处理16小时后,S期从23％降低至3％,而HCT116 p53-无效细胞表现出S期从34％降低至28％。低剂量CTX1和nutlin-3的组合导致p53-野生型细胞凋亡的显着增强,但p53细胞无效[1]。
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| 体内研究 |
CTX1甚至作为单一药剂显着增强了该模型系统中小鼠的存活率。单独使用CTX1或与nutlin-3联合治疗的小鼠存活时间显着增加(p <0.0001)[1]。
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| 激酶实验 |
用3μMCTX1,8μMNutlin和/或15μMRO-5963处理指数生长的OCI细胞培养物4.5小时。使用改良的RIPA裂解缓冲液25mM Tris（pH 8.0），100mM NaCl，0.5mM EDTA，0.50％NP-40和完全蛋白酶混合物片剂产生全细胞提取物。预清除蛋白质提取物（~750μg）并根据制造商的方案使用试剂盒进行免疫沉淀。对于免疫沉淀，使用小鼠单克隆抗p53和兔多克隆抗HDMX。然后收集免疫复合物，洗脱蛋白质并用指定的抗体进行蛋白质印迹[1]。
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| 动物实验 |
将6周龄雌性NOD / SCID /IL2Rγ - / - 小鼠用5×106细胞原代人AML细胞（每组n = 5）注射到尾静脉中。在肿瘤细胞注射后2天开始药物治疗。通过口服强饲法（200mg / kg）给予Nutlin-3，并且每周五天腹膜内注射CTX1（30mg / kg），持续3周。使用人特异性CD45PE抗体，使用细胞计数器对从小鼠股骨分离的骨髓细胞进行流式细胞术，以确认AML浸润到骨髓中[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Karan G, et al. Identification of a Small Molecule That Overcomes HdmX-Mediated Suppression of p53. Mol Cancer Ther. 2016 Apr;15(4):574-582.
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