Afatinib oxalate

草酸阿法替尼(BIBW 2992)是一种口服活性、强效和不可逆的ErbB家族(EGFR和HER2)双特异性抑制剂,对EGFRwt、EGFRL858R、EGFR858R/T790M和HER2的IC50值分别为0.5nM、0.4nM、10nM和14nM。草酸阿法替尼可用于食管鳞状细胞癌(ESCC)、非小细胞肺癌(NSCLC)和胃癌的研究[1][2][3][4]。

信号通路 >> 细胞凋亡 >> 细胞凋亡

研究领域 >> 癌症

信号通路 >> JAK/STAT信号通路 >> EGFR

信号通路 >> 蛋白酪氨酸激酶 >> EGFR

信号通路 >> 自噬 >> 自噬

信号通路 >> PI3K/Akt/mTOR 信号通路 >> AKT

信号通路 >> 蛋白酪氨酸激酶 >> c-Met的/HGFR

EGFRL858R:0.4 nM (IC50)

EGFRWT:0.5 nM (IC50)

EGFRL858R/T790M:10 nM (IC50)

HER2:14 nM (IC50)

HER3

pAKT

草酸阿法替尼(100nM)充分防止了heregulin刺激的HER3磷酸化[1]。草酸阿法替尼(0-10000 nM)有效抑制体外表达EGFR突变体的NIH-3T3细胞的锚定非依赖性增殖,并抑制H1666、H3255和NCI 1975细胞的细胞增殖[1]。草酸阿法替尼(48-72小时)在HKESC-1、HKESC-2、SLMT-1和EC-1细胞中显示生长抑制[2]。草酸阿法替尼(0-1μM,24-48小时)抑制ESCC细胞系中的AKT和MAPK通路,并抑制EGFR和AKT磷酸化[2]。草酸阿法替尼(0-1μM,16-48小时)诱导HKESC-2和EC-1的G0/G1细胞周期阻滞[2]。草酸阿法替尼(0-1μM,24-48小时)有效诱导HKESC-2和EC-1中的凋亡细胞死亡[2]。细胞增殖测定[1]细胞系：NIH-3T3细胞、H1666、H3255和NCI 1975细胞浓度：0、1、10、100、1000、10000 nM孵育时间：结果：有效抑制体外表达EGFR突变体的NIH-3细胞的锚定非依赖性增殖。显示对各种肺癌细胞系(H1666、H3255和NCI 1975细胞)的锚定非依赖性细胞增殖的抑制,IC50值分别为60nM、0.7nM和99nM。细胞活力测定[2]细胞系：HKESC-1、HKESC-2、SLMT-1和EC-1细胞系浓度：孵育时间：48和72小时结果：观察到95%以上的生长抑制。48小时(HKESC-1=0.078μM,HKESC-2=0.115μM,KYSE510=3.182μM,SLMT-1=4.625μM,EC-1=1.489μM)和72小时(HKESC-1=2.002μM,HKSE510=1.090μM,SLMT-1=1.161μM和EC-1=0.109μM)的相应IC50浓度均在较低的微摩尔范围内。Western Blot分析[2]细胞系：HKESC-2细胞和EC-1细胞浓度：0、0.01和0.1μM(HKESC-1细胞),0、0、1和1μM培养时间：24和48小时结果：降低了ESCC细胞中EGFR的磷酸化和HER2受体的内源性表达水平。以剂量和时间依赖性方式抑制AKT磷酸化。显著降低AKT-mTOR轴下游效应子的磷酸化水平,特别是在HKESC-2细胞中。抑制ESCC细胞系中ErbB/HER轴的两个主要下游通路,即AKT和MAPK通路。细胞周期分析[2]细胞系：HKESC-2细胞和EC-1细胞浓度：0、0.01和0.1μM(HKESC-1细胞),0、0、1和1μM培养时间：16、24和48小时结果：以时间和剂量依赖性方式诱导两种受试ESCC细胞系的G0/G1细胞周期阻滞。在HKESC-2细胞中,处于G0/G1期的细胞百分比从0.01μM阿法替尼的38.2%增加到68.1%,在0.1μM阿法替尼的作用下增加到74.7%,从24小时(0.01微米的G0/G2期阻滞率为82.4%,0.1微米的为86.2%)增加到48小时(从74.7%增加到88.2%,0.01µM的为91.0%)。在EC-1细胞中,阻滞在G0/G1期的细胞百分比在24小时和48小时分别从59.1%增加到66.6%和72.2%。细胞凋亡分析[2]细胞系：HKESC-2细胞和EC-1细胞浓度：0、0.01和0.1μ。在这些细胞系中显示出更强的切割聚(ADP核糖)聚合酶(PARP)表达水平。

草酸阿法替尼(0-20mg/kg,口服,每日25天)显示出显著的肿瘤消退和EGFR、HER2、HER3和AKT磷酸化的下调[1]。草酸阿法替尼(15 mg/kg,口服,5天加2天,持续两周)强烈抑制HKESC-2肿瘤的生长[2]。动物模型：无胸腺NMRI-nu/nu雌性小鼠(21–31 g,5-6周龄,转基因小鼠肺癌模型和异种移植模型)[1]剂量：15 mg/kg,20 mg/kg给药：每天口服,持续25天结果：在表皮样癌细胞系A431的标准异种移植瘤模型中,导致肿瘤显著消退,累积治疗/对照肿瘤体积比(T/C比)为2%,以及EGFR和AKT磷酸化的下调。在该HER2驱动模型中诱导大肿瘤消退,有效控制NCIH1975细胞系的异种移植肿瘤形成,表达EGFR L858R/T790M,20 mg/kg剂量的T/C值为12%。在4周的治疗期后诱导超过50%的肿瘤减少。下调EGFR、HER2和HER3磷酸化。动物模型：6周龄雌性无胸腺裸鼠(nu/nu)(16-20g)[2]剂量：15mg/kg给药：按5天加2天的计划口服灌胃,持续2周结果：强烈抑制HKESC-2肿瘤的生长。载体和治疗终点的平均肿瘤大小分别为348±24 mm3和108±36 mm3。

[1]. Li D, et al. BIBW2992, an irreversible EGFR/HER2 inhibitor highly effective in preclinical lung cancer models. Oncogene. 2008 Aug 7;27(34):4702-11.

[2]. Wong CH, et al. Preclinical evaluation of afatinib (BIBW2992) in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC). Am J Cancer Res. 2015 Nov 15;5(12):3588-99.

[3]. Wang XK, et al. Afatinib circumvents multidrug resistance via dually inhibiting ATP binding cassette subfamily G member 2 in vitro and in vivo. Oncotarget. 2014 Dec 15;5(23):11971-85.

[4]. Yoshioka T, et al. Antitumor activity of pan-HER inhibitors in HER2-positive gastric cancer. Cancer Sci. 2018 Apr;109(4):1166-1176.