1-(4-(氨基甲基)苄基)-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺二盐酸盐

TLR7/8 agonist 1 dihydrochloride 是一种 toll 样受体 (TLR7)/TLR8 的双重激动剂。

信号通路 >> 免疫及炎症 >> Toll样受体(TLR)

研究领域 >> 炎症/免疫

TLR7/TLR8[1]

TLR7/8激动剂1(化合物5d)显示出显着的免疫刺激活性。 TLR7/8激动剂1用作荧光团共价连接的方便前体而没有显着的活性丧失.TLR7/8激动剂1保留TLR7激动活性,EC50为20nM。 TLR7/8激动剂1直接与市售的异硫氰酸荧光素和罗丹明B异硫氰酸酯共价偶联[1]。 TLR7/8激动剂1(化合物1)在人TLR7(50nM)和TLR8(55nM)初筛中显示出显着不同的激动效力[2]。

使用人TLR-2，TLR3，TLR4，TLR5，TLR7，TLR8，TLR9和NOD-1 / NOD-2特异性，快速通量，液体处理器辅助的报告基因测定来定量NF-κB的诱导。用合适的hTLR（或NOD）稳定共转染HEK293细胞，并将分泌的碱性磷酸酶（sAP）保持在HEK-Blue选择培养基中。在NF-κB/ AP-1启动子控制下分泌的碱性磷酸酶（sAP）的稳定表达可由适当的TLR / NOD激动剂诱导，并且上清液中的细胞外sAP与NF-κB诱导成比例。在分级浓度的刺激物存在下，在384孔，平底，细胞培养物处理的微量滴定板中以80μL/孔的体积培养密度为~1050个细胞/ mL的报道细胞。使用碱性磷酸酶特异性色原（存在于HEK检测培养基中）在620nm处通过分光光度法测定sAP [2]。

从知情同意的静脉穿刺获得的人血液中分离新鲜的人外周血单核细胞（hPBMC），并根据Ficoll-Hypaque梯度的机构指南。用分级浓度的测试化合物（例如，TLR7 / 8激动剂1; 0.1,1,10和100μg/ mL）刺激PBMC的等分试样（100μL/孔中的105个细胞）12小时。通过离心分离上清液，并使用分析物特异性多重细胞因子/趋化因子珠阵列测定法一式两份地测定[2]。

[1]. Shukla NM, et al. Syntheses of fluorescent imidazoquinoline conjugates as probes of Toll-like receptor 7. Bioorg Med Chem Lett. 2010 Nov 15;20(22):6384-6.

[2]. Beesu M, et al. Structure-Based Design of Human TLR8-Specific Agonists with Augmented Potency and Adjuvanticity. J Med Chem. 2015 Oct 8;58(19):7833-49.

瑞沙托维 | 磷酸氯喹 | 雷西莫特 | C29 | 咪喹莫特 | 硫酸羟基氯喹 | 维托莫德 | 莫托莫德 | CU CPT 22 | 白术内酯I； 苍术内酯I | E6446二盐酸盐 | CU-CPT17e | Paquinimod | Gardiquimod三氟乙酸盐 | 原花青素B1