342639-96-7

• 常用中文名：KRIBB11
• 常用英文名：KRIBB11
• CAS号：342639-96-7
• 分子式：C₁₃H₁₂N₆O₂
• 分子量：284.273
• 相关类别： 信号通路 细胞周期/DNA损伤 HSP
• 发布时间：2018-06-24 21:37:56
• 更新时间：2024-01-02 16:31:20
• KRIBB11 是 HSF1 的抑制剂,IC50 值为 1.2 μM。

名称

• 中文名: KRIBB11
• 英文名: N2-(1H-Indazol-5-yl)-N6-methyl-3-nitro-2,6-pyridinediamine
• 英文别名: N-(1H-Indazol-5-yl)-N-methyl-3-nitro-2,6-pyridinediamine; 2,6-Pyridinediamine, N-1H-indazol-5-yl-N-methyl-3-nitro-; KRIBB11

物化性质

• 密度: 1.5±0.1 g/cm3
• 沸点: 535.0±50.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₁₃H₁₂N₆O₂
• 分子量: 284.273
• 闪点: 277.3±30.1 °C
• 精确质量: 284.102173
• LogP: 4.30
• 外观性状: 粉末
• 蒸汽压: 0.0±1.4 mmHg at 25°C
• 折射率: 1.812
• 储存条件: -20℃

生物活性

• 描述: KRIBB11 是 HSF1 的抑制剂,IC50 值为 1.2 μM。
• 相关类别:
  信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> HSP
  信号通路 >> 代谢酶/蛋白酶 >> HSP
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  HSF1:1.2 μM (IC50)

• 体外研究: KRIBB11阻断HSF1下游靶蛋白如HSP27和HSP70的诱导。 KRIBB11诱导HCT-116细胞的生长停滞和凋亡。 KRIBB11抑制HSF1依赖性p-TEFb(正转录延伸因子b)向hsp70启动子的募集[1]。用KRIBB11处理的细胞中PARP和胱天蛋白酶-3裂解增加。将RKO与KRIBB11一起孵育,显示出约10μM的毒性阈值,并且IC50为20-30μM[2]。
• 体内研究: KRIBB11(50 mg/kg,ip)导致裸鼠体内肿瘤生长抑制率为47.4％,无体重减轻[1]。
• 激酶实验: 用PBS洗涤HCT-116细胞，然后用结合缓冲液（10mm Tris-HCl（pH 7.4），50mm KCl，5mm MgCl 2,1mm EDTA和0.1mm Na 3 VO 4）中的27号注射器匀浆。将细胞裂解物在4℃以13,000rpm离心30分钟，收集上清液。通过与Dynabeads M-280链霉抗生物素蛋白在4℃温育30分钟来预清洗HCT-116细胞裂解物上清液，并通过磁体分离捕获。将澄清的上清液与生物素-KRIBB11化合物一起温育。在4℃温育过夜后，用Dynabeads M-280链霉抗生物素蛋白沉淀与生物素-KRIBB11化合物相关的蛋白质。沉淀的样品通过磁铁分离。用1mL含有50mm HEPES（pH7.5），50mm NaCl，1mm EDTA，1mm EGTA，0.1％吐温20,10％（v / v）甘油，1mm NaF，0.1mm的离析缓冲液洗涤样品。 Na3VO4和蛋白酶抑制剂混合物片剂（1片/ 10mL）。将样品在SDS-PAGE样品缓冲液中煮沸，用10％聚丙烯酰胺凝胶分离，并用针对HSF1，HSF2，HSP90或CDK9的抗体进行免疫印迹。
• 细胞实验: 在具有10％FBS的McCoy's 5A培养基中，将细胞以每孔6×103个细胞的密度接种到96孔板上。 24小时后，用含有化学品或0.1％DMSO的新鲜完全培养基补充培养基。温育48小时后，将细胞增殖试剂WST-1加入每个孔中。使用ELISA读数器在450nm下测量产生的WST-1甲amount的量。
• 动物实验: 将7周龄雌性近交系无特定病原体的Balb / c裸鼠在无菌条件下饲养，具有12小时光照/黑暗循环，并随意喂食食物和水。为了评估KRIBB11的体内抗肿瘤活性，在第0天将HCT-116细胞（0.3mL的4×107细胞/ mL）皮下植入小鼠的右侧.KRIBB11溶解于10％二甲基乙酰胺中。 ，50％PEG300和40％蒸馏水。当肿瘤大小达到72.2mm 3时，化合物以50mg / kg /天的剂量腹膜内给药18天。通过使用公式长度（mm）×宽度（mm）×高度（mm）/ 2来估计肿瘤体积。为了确定化合物的毒性，记录携带肿瘤的动物的体重。在第18天，处死小鼠，称重肿瘤。
• 参考文献:

  [1]. Yoon YJ, et al. KRIBB11 inhibits HSP70 synthesis through inhibition of heat shock factor 1 function by impairing the recruitment of positive transcription elongation factor b to the hsp70 promoter. J Biol Chem. 2011 Jan 21;286(3):1737-47.

  [2]. Samarasinghe B, et al. Heat shock factor 1 confers resistance to Hsp90 inhibitors through p62/SQSTM1 expression and promotion of autophagic flux. Biochem Pharmacol. 2014 Feb 1;87(3):445-55.