N-[(1,2-二氢-6-甲基-2-氧代-4-丙基-3-吡啶基)甲基]-1-(1-甲基乙基)-6-[6-[4-(1-甲基乙基)-1-哌嗪基]-3-吡啶基]-1H-吲唑-4-甲酰胺

更新时间：2024-01-02 13:12:03

N-[(1,2-二氢-6-甲基-2-氧代-4-丙基-3-吡啶基)甲基]-1-(1-甲基乙基)-6-[6-[4-(1-甲基乙基)-1-哌嗪基]-3-吡啶基]-1H-吲唑-4-甲酰胺结构式	常用名	N-[(1,2-二氢-6-甲基-2-氧代-4-丙基-3-吡啶基)甲基]-1-(1-甲基乙基)-6-[6-[4-(1-甲基乙基)-1-哌嗪基]-3-吡啶基]-1H-吲唑-4-甲酰胺	英文名	UNC1999
	CAS号	1431612-23-5	分子量	569.740
	密度	1.2±0.1 g/cm3	沸点	804.7±65.0 °C at 760 mmHg
	分子式	C₃₃H₄₃N₇O₂	熔点	N/A
	MSDS	中文版美版	闪点	440.4±34.3 °C
	符号	GHS07	信号词	Warning

用途

UNC1999 是一种有效的 SAM- 竞争性的选择性 EZH2 和 EZH1 抑制剂，IC₅₀ 分别为 <10 nM 和 45±3 nM。

中文名	N-[(1,2-二氢-6-甲基-2-氧代-4-丙基-3-吡啶基)甲基]-1-(1-甲基乙基)-6-[6-[4-(1-甲基乙基)-1-哌嗪基]-3-吡啶基]-1H-吲唑-4-甲酰胺
英文名	N-[(6-methyl-2-oxo-4-propyl-1H-pyridin-3-yl)methyl]-1-propan-2-yl-6-[6-(4-propan-2-ylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl]indazole-4-carboxamide
英文别名	更多

描述	UNC1999 是一种有效,选择性和SAM-竞争性的 EZH2 和 EZH1 抑制剂,IC50 分别为 10 nM 和 45 nM。
相关类别	信号通路 >> 自噬 >> 自噬信号通路 >> 表观遗传学 >> 表观遗传读者域信号通路 >> 表观遗传学 >> 组蛋白甲基转移酶研究领域 >> 癌症
靶点	IC50: <10 nM (EZH2), 45 nM (EZH1)[1]
体外研究	UNC1999,第一种口服生物可利用的抑制剂,对野生型和突变型EZH2以及EZH1具有高体外效力,EZH1是一种密切相关的H3K27甲基转移酶,在各自的催化结构域中与EZH2具有96％的序列同一性。 UNC1999对EZH2和EZH1具有高选择性,适用于广泛的表观遗传和非表观遗传靶标,与辅因子SAM竞争,与肽底物无竞争性。对于sigma1,sigma2,组胺H3和NET(去甲肾上腺素转运蛋白),UNC1999的Ki值分别为4,700 nM,65 nM,300 nM和1,500 nM。 NC1999选择性地杀死DB细胞,即具有EZH2 Y641N突变的DLBCL细胞系。 UNC1999显示DB细胞增殖的浓度和时间依赖性抑制(EC50 = 633±101nM(n = 3))[1]。
体内研究	以15,50或150mg/kg单次腹膜内(IP)注射UNC1999获得高C max(9,700-11,800nM)并且在雄性瑞士白化小鼠中表现出剂量线性。在整个24小时内,150和50mg/kg IP剂量均导致UNC1999的血浆浓度高于其细胞IC50,而15mg/kg IP剂量导致UNC1999的血浆浓度高于其细胞IC50约12小时。。我们接下来检查了UNC1999是否是口服生物可利用的,并且很高兴地发现单个50mg/kg口服剂量的UNC1999在雄性瑞士白化小鼠中达到高Cmax(4,700nM)和良好的暴露水平。在单次口服剂量后,UNC1999的血浆浓度维持在其细胞IC50以上约20小时。值得注意的是,所有测试小鼠都能很好地耐受包括150 mg/kg IP剂量在内的所有剂量,并且没有观察到不良反应[1]。
激酶实验	产生EZH2 Y641N突变体并通过BPS Bioscience进行测定。在HMT测定缓冲液中用10％DMSO制备一系列UNC1999稀释液，并将5μL稀释液加入到50μL反应中，使得DMSO的最终浓度在所有反应中均为1％。所有酶促反应在室温下一式两份进行60分钟（EZH2）和180分钟（EZH2 Y641N）在含有HMT测定缓冲液，S-腺苷甲硫氨酸，酶和UNC1999的50μL混合物中进行。这些50μL反应在HMT基底预涂板的孔中进行。酶促反应后，弃去反应混合物，用TBST缓冲液洗涤每个孔三次，并用封闭缓冲液缓慢摇动10分钟。将孔清空，并加入100μL稀释的1°抗体。然后将板在室温下缓慢摇动60分钟。如前所述，将板清空并洗涤三次，并在室温下与封闭缓冲液一起摇动10分钟。弃去封闭缓冲液后，加入100μL稀释的2°抗体。然后将板在室温下缓慢摇动30分钟。如前所述，将板清空并洗涤三次，并在室温下与封闭缓冲液一起摇动10分钟。弃去封闭缓冲液，新制备HRP化学发光底物的混合物。将100μL该混合物加入每个空孔中。立即，在BioTek SynergyTM 2酶标仪[1]中测量样品的发光。
细胞实验	DB细胞是一种含有EZH2 Y641N突变的弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞系，来自ATCC，并在补充有10％胎牛血清，抗生素和各种浓度的UNC1999（0.1,0.2,0.3， 0.4,0.5,1,2,3和5μM）或UNC2400和DMSO对照。含有试验化合物或对照的培养基每三天更新一次。使用TC20自动细胞计数器系统测量来自至少三次独立实验的活细胞数。使用酸性提取方案从细胞核制备总组蛋白。使用15％的SDS-PAGE分离约1微克的总组蛋白，转移至PVDF膜，并用组蛋白抗体探测。本研究中使用的抗体是针对EZH2，一般H3和H3K27me3的抗体[1]。
动物实验	小鼠[1]使用Sai Life Sciences的雄性瑞士白化小鼠进行标准PK研究。评估UNC1999的四个剂量（15,50和150mg / kg IP，和50mg / kg PO）。每项研究持续24小时。在八个时间点（给药后0.08,0.25,0.5,1,2,4,8和24小时）中报告的UNC1999的血浆浓度是来自3只试验动物的平均值。
参考文献	[1]. Konze KD, et al. An Orally Bioavailable Chemical Probe of the Lysine Methyltransferases EZH2 and EZH1. ACS Chem Biol. 2013;8(6):1324-34.

密度	1.2±0.1 g/cm3
沸点	804.7±65.0 °C at 760 mmHg
分子式	C₃₃H₄₃N₇O₂
分子量	569.740
闪点	440.4±34.3 °C
精确质量	569.347839
PSA	99.41000
LogP	4.17
外观性状	white to beige
蒸汽压	0.0±2.9 mmHg at 25°C
折射率	1.643
储存条件	2-8°C
水溶解性	DMSO: soluble15mg/mL, clear

MSDS英文版

符号	GHS07
信号词	Warning
危害声明	H302
危害码 (欧洲)	Xn
风险声明 (欧洲)	22
危险品运输编码	NONH for all modes of transport

EZH2 inhibition enhances the efficacy of an EGFR inhibitor in suppressing colon cancer cells.

Cancer Biol. Ther. 15(12) , 1677-87, (2014)

Metastatic colon cancer has a 5-year survival of less than 10% despite the use of aggressive chemotherapeutic regimens. As signaling from epidermal growth factor receptor (EGFR) is often enhanced and ...

s7165

1-Isopropyl-6-[6-(4-isopropyl-1-piperazinyl)-3-pyridinyl]-N-[(6-methyl-2-oxo-4-propyl-1,2-dihydro-3-pyridinyl)methyl]-1H-indazole-4-carboxamide

unc1999

1H-Indazole-4-carboxamide, N-[(1,2-dihydro-6-methyl-2-oxo-4-propyl-3-pyridinyl)methyl]-1-(1-methylethyl)-6-[6-[4-(1-methylethyl)-1-piperazinyl]-3-pyridinyl]-