CAL-130

CAL-130 是一种 PI3Kδ 和 PI3Kγ 抑制剂,IC50 分别为 1.3 和 6.1 nM。

研究领域 >> 癌症

p110δ:1.3 nM (IC50)

p110γ:6.1 nM (IC50)

p110β:56 nM (IC50)

p110α:115 nM (IC50)

CAL-130优先抑制p110γ和p110δ催化结构域的功能。对于p110δ和p110γ,CAL-130的IC50值分别为1.3和6.1nM,而p110α和p110β的IC50值分别为115和56nM。 CAL-130不抑制对一般细胞功能和存活至关重要的其他细胞内信号通路(即p38 MAPK或胰岛素受体酪氨酸激酶)[1]。

干预PI3Kγ和PI3Kδ的联合活性的临床意义是通过将CAL-130给予已建立的T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)的Lck/Ptenfl/fl小鼠来确定。用于存活研究的候选动物出现不良,白细胞(WBC)计数高于45,000μL-1,外周涂片爆炸的证据,以及大多数循环细胞(> 75％)染色Thy1.2的双阳性和Ki-67的。小鼠每8小时接受口服剂量(10mg/kg)的CAL-130,持续7天,然后进行直至垂死。尽管治疗持续时间有限,但CAL-130对于将治疗动物的中位生存期延长至45天非常有效,而对照组为7.5天[1]。

使用重组PI3K在离体PI3激酶测定中测定CAL-130抑制PI3K同种型的IC 50值。用ATP确定十点激酶抑制谱，其浓度与每种酶的KM一致[1]。

在存在或不存在CAL-130（1,2.5和5μM）的情况下，CCRF-CEM细胞或shRNA转染的CCRF-CEM细胞的细胞增殖，然后使用血细胞计数器和台盼蓝一式三份对样品进行细胞计数。对于未转染或shRNA转染的CCRF-CEM的细胞凋亡测定，用附着蛋白结合缓冲液中的APC缀合的膜联蛋白-V染色细胞，并通过流式细胞术分析。对于原代T-ALL样品，使用BD Cell Viability试剂盒结合使用荧光计数珠来评估细胞活力。为此，将细胞接种MS5-DL1基质细胞，在CAL-130处理后72小时后，收获细胞并用APC缀合的抗人CD45染色，然后用上述试剂盒染色[1]。

小鼠[1]对于皮下异种移植实验，通过用FUW-luc的慢病毒感染和用新霉素选择产生发光CCRF-CEM（CEMluc）细胞。用双荧光素酶报告分析试剂盒验证荧光素酶表达。将嵌入Matrigel中的2.5×10 6个CEM-luc细胞注射到NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wj1 / Sz小鼠的胁腹中。 1周后，用载体（0.5％甲基纤维素，0.1％吐温80）或CAL-130（10mg / kg）每天8小时口服管饲小鼠，持续4天，然后如下对肿瘤进行成像：通过吸入异氟醚麻醉的小鼠腹膜内注射D-荧光素（50mg / kg）。利用体内成像系统对光子发射进行成像。通过使用Living Image软件包将光子通量（每秒光子数）积分通过环绕每个肿瘤的区域来量化肿瘤生物发光。以类似方式进行D-荧光素的施用和Lck / Ptenf1 / fl / Gt（ROSA）26Sortm1（Luc）Kael / J小鼠中肿瘤生物发光的检测。

[1]. Subramaniam Prem S, et al. Targeting nonclassical oncogenes for therapy in T-ALL. Cancer cell (2012), 21(4), 459-72.

3-甲基腺嘌呤 | LY294002 | 渥曼青霉素 | Alpelisib (BYL719) | 5-[2,6-二(4-吗啉基)-4-嘧啶基]-4-(三氟甲基)-2-吡啶胺 | IPI549 | 2-氨基-N-[2,3-二氢-7-甲氧基-8-[3-(4-吗啉基)丙氧基]咪唑并[1,2-c]喹唑啉-5-基]-5-嘧啶甲酰胺 | 艾代拉里斯 | Dactolisib (BEZ235) | 槲皮素 | SAR405 | 2-(1H-吲唑-4-基)-6-[[4-(甲基磺酰基)-1-哌嗪基]甲基]-4-(4-吗啉基)噻吩并[3,2-D]嘧啶 | 740 Y-P | LY3023414 | 1,3-二咖啡酰奎宁酸