艾代拉里斯

Idelalisib (CAL-101) 是一种高选择性和有效的 p110δ 抑制剂,IC50为2.5 nM,比p110δ和其他PI3K class I酶的选择性高40 到 300。

信号通路 >> 自噬 >> 自噬

信号通路 >> PI3K/Akt/mTOR 信号通路 >> PI3K

研究领域 >> 癌症

p110α:820 nM (IC50)

p110β:565 nM (IC50)

p110γ:89 nM (IC50)

p110δ:2.5 nM (IC50)

hVps34:978 nM (IC50)

DNA-PK:6729 nM (IC50)

Idelalisib(CAL-101)是一种高选择性和有效的p110δ抑制剂(EC50 = 8 nM)。对于相关激酶C2β,hVPS34,DNA-PK和mTOR,观察到更高的选择性(400至4000倍),而在10μM时未观察到针对一组402种不同激酶的活性。 CAL-101在10μM时仅将PDGF诱导的pAkt降低25％。 Idelalisib(CAL-101)抑制LPA诱导的pAkt,EC50为1.9μM。 Idelalisib(CAL-101)阻断FcεRIp110δ介导的CD63表达,EC50为8 nM,而p110γ的甲酰基-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸激活被抑制,EC50为3μM。因此,在基于细胞的分析中,与其他I类PI3K同种型相比,CAL-101对p110δ的选择性为240至2500倍[1]。与单独载体治疗相比,CAL-101Idelalisib(CAL-101)诱导的慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞凋亡显着(P <0.001)。 Idelalisib(CAL-101)在CLL细胞中诱导选择性细胞毒性,不依赖于IgVH突变状态或间期细胞遗传学[2]。

来自p110δD910A/ D910A小鼠和Idelalisib(CAL-101)(40mg/kg,iv)后处理小鼠的脑匀浆的CD11b + Ly6G +中性粒细胞中观察到显着降低[3]。

进行MTT测定以确定细胞毒性。简言之，将1×105个细胞（CLL B细胞或健康志愿T细胞或NK细胞）与不同浓度的Idelalisib（CAL-101）（0.1μM，1μM，5μM，10μM），25μM孵育48小时。 LY294002，或车辆控制。然后加入MTT试剂，将板再孵育20小时，然后用磷酸盐缓冲盐水中的鱼精蛋白硫酸盐洗涤。加入DMSO，并在Labsystems读板器中通过分光光度法在540nm下测量吸光度。还使用膜联蛋白/ PI流式细胞术在不同时间点测量细胞活力。使用Expo-ADC32软件包分析数据。每个样品计数至少10,000个细胞。结果表示为总阳性细胞相对于未处理对照的百分比。检测半胱天冬酶依赖性细胞凋亡的实验包括添加100μMZ-VAD。检测存活信号的实验包括添加1μg/ mL CD40L，800 U / mL IL-4,50 ng / mL BAFF，20 ng / mL TNF-α，或共培养在纤连蛋白或基质（HS-5细胞系）上板。在加入CLL细胞前24小时，通过每6孔板接种75cm 2培养瓶（80％-100％汇合）进行基质共培养[2]。

小鼠[3]对于Idelalisib（CAL-101）治疗，野生型C57BL / 6小鼠给予40 mg / kg Idelalisib（CAL-101）或载体DMSO，25μL输注到股静脉，15分钟前给予/ R（预处理），或再灌注开始后3小时和6小时（治疗后）。用Idelalisib（CAL-101）处理的对照和动物使用激光多普勒灌注监测仪进行脑血流量（CBF）测量。在MCAO之前和之后以及再次在再灌注后3小时再次获得的CBF测量显示到MCAO梗塞区域的血流减少约90-95％，这在组之间没有差异。

[1]. Lannutti BJ, et al. CAL-101, a p110delta selective phosphatidylinositol-3-kinase inhibitor for the treatment of B-cell malignancies, inhibits PI3K signaling and cellular viability. Blood, 2011, 117(2), 591-594.

[2]. Herman SE, et al. Phosphatidylinositol 3-kinase-δ inhibitor CAL-101 shows promising preclinical activity in chronic lymphocytic leukemia by antagonizing intrinsic and extrinsic cellular survival signals. Blood, 2010, 116(12), 2078-2088.

[3]. Low PC, et al. PI3Kδ inhibition reduces TNF secretion and neuroinflammation in a mouse cerebral stroke model. Nat Commun. 2014 Mar 14;5:3450.

[4]. Cooney J, et al. Synergistic targeting of the regulatory and catalytic subunits of PI3Kδ in mature B cell malignancies. Clin Cancer Res. 2018 Mar 1;24(5):1103-1113.

3-甲基腺嘌呤 | LY294002 | 渥曼青霉素 | Alpelisib (BYL719) | 5-[2,6-二(4-吗啉基)-4-嘧啶基]-4-(三氟甲基)-2-吡啶胺 | IPI549 | 2-氨基-N-[2,3-二氢-7-甲氧基-8-[3-(4-吗啉基)丙氧基]咪唑并[1,2-c]喹唑啉-5-基]-5-嘧啶甲酰胺 | Dactolisib (BEZ235) | 槲皮素 | SAR405 | 2-(1H-吲唑-4-基)-6-[[4-(甲基磺酰基)-1-哌嗪基]甲基]-4-(4-吗啉基)噻吩并[3,2-D]嘧啶 | 740 Y-P | LY3023414 | 1,3-二咖啡酰奎宁酸 | 奥米利塞