Centrinone

Centrinone是选择性,可逆的 PlK4 抑制剂,Ki 值为 0.16 nM。

信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> Polo样激酶(PLK)

研究领域 >> 癌症

PLK4:0.16 nM (Ki)

PLK4 (G95L):68.57 nM (Ki)

Aurora A:171 nM (Ki)

Aurora B:436.76 nM (Ki)

对于Plk4,Centrinone对Aurora A/B的选择性超过1000倍,并且在耗尽中心体的浓度下不影响细胞Aurora A或B底物磷酸化。 Centrinone处理HeLa人宫颈癌细胞导致在每轮细胞分裂中含有中心粒和中心周围物质标记的病灶逐渐减少,直到大多数细胞缺乏中心粒和中心体。用centrinone处理减少了多中心非洲爪蟾上皮细胞中的中心粒数,这表明Plk4还控制分化细胞中的中心粒扩增。 Centrinone处理导致人和其他脊椎动物细胞中的中心体消耗。中心体丢失通过p53依赖性机制不可逆地阻止正常细胞处于衰老样G1状态,该机制独立于DNA损伤,应激,Hippo信号传导,延长有丝分裂持续时间或分离错误[1]。

纯化的6xHis标记的人Plk4激酶结构域在20mM Tris pH 7.5,100mM NaCl，10％甘油，1mM DTT中。 2X反应缓冲液由50mM HEPES pH 8.5,20mM MgCl 2,1mM DTT，0.2mg / mL BSA，16μMATP和200μMA-A11底物组成。最终反应中的Plk4浓度为2.5-10nM，最终pH为8.0。剂量反应中的抑制剂（Centrinone）阵列从DMSO储液中添加。使反应在25℃下进行4-16小时。使用ADP-Glo试剂进行检测。在读板器上测量发光[1]。

对于每种条件，将细胞一式三份接种到6孔板中，每孔50,000个细胞。向HeLa细胞中加入125nM中心蛋白，或向NIH / 3T3细胞中加入300nM。每隔24小时，每种条件收获3口井。使用TC10自动细胞计数器[1]进行细胞计数。

[1]. Wong YL. et al. Cell biology. Reversible centriole depletion with an inhibitor of Polo-like kinase 4. Science. 2015 Jun 5;348(6239):1155-60.

伏拉塞替 | BI 2536 | 瑞格色替钠 | Centrinone-B | CFI-400945自由基 | GSK-461364 | 3-[2-(三氟甲基)苄氧基]-5-(5,6-二甲氧基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-2-噻吩甲酰胺 | TAK-960 | NMS-1286937 | Poloxin | (2Z)-2-氰基-N-(2,5-二溴苯基)-3-羟基-2-丁烯酰胺 | Ro3280 | 2-[[5-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-甲基-3-吡啶基]氨基]-5,7-二氢-9-(三氟甲基)- 6H-嘧啶并[5,4-D][1]苯并氮杂卓-6-硫酮 | N-[[4-[(6-氯-3-吡啶基)甲氧基]-3-甲氧基苯基]甲基]-3,4-二甲氧基苯乙胺盐酸盐 | (E)-4-[2-[2-[N-乙酰基-N-[(4-甲氧基苯基)磺酰]氨基]苯基]乙烯基]吡啶 1-氧化物