RGB-286638自由基

RGB-286638 是一种有效的 CDK 抑制剂,抑制 cyclin T1-CDK9,cyclin B1-CDK1,cyclin E-CDK2,cyclin D1-CDK4,cyclin E-CDK3 和 p35-CDK5 活性,IC50 分别为 1,2,3,4,5 和 5 nM；同时可抑制 GSK-3β,TAK1,Jak2 和 MEK1,IC50 值分别为 3,5,50,和 54 nM。

信号通路 >> PI3K/Akt/mTOR 信号通路 >> GSK-3

信号通路 >> 干细胞及 Wnt 通路 >> GSK-3

信号通路 >> MAPK/ERK信号通路 >> MEK

研究领域 >> 癌症

T1-CDK9:1 nM (IC50)

cyclin B1-CDK1:2 nM (IC50)

cyclin E-CDK2:3 nM (IC50)

cyclin D1-CDK4:4 nM (IC50)

cyclin E-CDK3:5 nM (IC50)

p35-CDK5:5 nM (IC50)

cyclin H-CDK7:44 nM (IC50)

cyclin D3-CDK6:55 nM (IC50)

GSK-3β:3 nM (IC50)

JAK2:50 nM (IC50)

MEK1:54 nM (IC50)

Fms:1 nM (IC50)

TAK1:5 nM (IC50)

JNK1a1:17 nM (IC50)

JNK1a2:40 nM (IC50)

C-src:25 nM (IC50)

AMPK:41 nM (IC50)

RGB-286638是来自茚并吡唑的CDK抑制剂(CDKI),具有针对转录CDK的Ki-纳摩尔活性。 RGB-286638抑制几种酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸非CDK酶,即GSK-3β,TAK1,AMPK,Jak2,MEK1。研究了人类p53-wt(MM.1S,MM.1R和H929)和p53突变体(U266,OPM1)的生长对RGB-286638(12.5-100nM)处理的剂量和时间依赖性影响。通过MTT测定法测定MM细胞,并在24和48小时评估活力。半数最大有效浓度(EC 50)在48小时范围内为20至70nM。在50nM处理后观察到p53-wt和-突变细胞之间生长的剂量依赖性差异,其中p53-wt MM.1S,MM.1R和H929在48小时对RGB-286638处理稍微更敏感[1]。

用RGB-286638进行的剂量发现研究确定40mg/kg /天IV治疗作为SCID小鼠中的最大耐受剂量。用RGB-286638进行5天IV治疗显着抑制MM肿瘤生长,治疗结束后第14天在30mg/kg和40mg/kg治疗组中分别以85.06％和86.34％注意到最大TGI(％)。两个治疗组的log10细胞杀伤(LCK Td：4.5天)为1.6。 RGB-286638治疗也与改善的存活率相关,通过在对照组中第24天的第一次死亡和对照组中的第43天来证明。在该研究中没有发生毒性死亡：在30mg/kg剂量方案的第5天(8.4％)和在40mg/kg给药后的第15天(9.9％)观察到最大体重百分比(BW)损失,在接下来的两周内体重恢复[1]。

使用核提取试剂盒从用50nM RGB-286638处理的MM.1S细胞中分离核蛋白1,4和8小时。将核蛋白等分试样加入到96孔板中，所述96孔板涂有含有p53反应元件的特异性双链DNA序列，用于过夜孵育。通过添加针对p53的特异性一抗来检测核提取物中的p53。加入与HRP缀合的第二抗体以提供450nm处的灵敏比色读数。所有实验一式三份进行[1]。

进行比色测定以在增加浓度的RGB-286638（0-100nM）下测定药物活性。表达来自24或48小时培养物的野生型p53（MM.1S，MM.1R，H929）或突变型-p53（U266，OPM1，RPMI）细胞用10μL5mg/ mL MTT脉冲至每个孔，然后通过在37℃下孵育4小时，并添加含有0.04HCl的100μL异丙醇。在分光光度计上拍摄波长为570nm的吸光度读数（使用630nm的读数进行校正）。所有实验一式三份进行[1]。

小鼠[1]在MM异种移植模型中评估RGB-286638的体内抗MM活性。用于载体对照给药组的RGB-286638在5％葡萄糖/水（D5W）pH5.2中的2和3mg / mL的给药溶液以及用于载体对照给药组的D5W pH5.2由Agennix AG制备和提供。使用CB-17严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠。使用铯137（137Cs） - 辐射源来照射40只雄性5-6周龄小鼠（2Gy [200rad]）;照射后24小时，在上背部皮下接种2.5×106MM.1S细胞。当肿瘤重量约为100mg时，将小鼠随机分配到3个队列中，每天接受IV尾静脉注射连续5天，使用RGB-286638 30 mg / kg（8只小鼠），40 mg / kg（9只小鼠）或对照组单独的车辆（10只小鼠）。每隔一天通过卡尺测量监测动物的体重和肿瘤体积。估计肿瘤体积。从治疗的第一天到死亡评估存活率。使用从治疗的第一天到第一次处死的日期的卡尺测量来评估肿瘤生长。计算肿瘤生长抑制百分比（TGI）。

[1]. Cirstea D, et al. Small-molecule multi-targeted kinase inhibitor RGB-286638 triggers P53-dependent and -independent anti-multiple myeloma activity through inhibition of transcriptional CDKs. Leukemia. 2013 Dec;27(12):2366-75.

U0126-EtOH | CHIR-99021 (CT99021) | PD 098,059 (2-(2-氨基-3-甲氧基苯基)- 4H-1-苯吡喃-4-酮 | 曲美替尼 | N-[5-[(4-乙基-1-哌嗪基)甲基]-2-吡啶基]-5-氟-4-[4-氟-2-甲基-1-异丙基-1H-苯并咪唑-6-基]-2-嘧啶胺甲烷磺酸盐 | N-[(2R)-2,3-二羟基丙氧基]-3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯)氨基]苯甲酰胺 | 瑞博西尼 | 司美替尼 | Dinaciclib | THZ1 | 巴瑞克替尼 | 考比替尼 | Roscovitine | THZ531 | 2-[[(噻吩-2-基)甲基]氨基]-5-[1-(喹啉-6-基)甲-(Z)-亚基]噻唑-4-酮