SR-3306

SR-3306 是一种有效的可渗透脑的选择性 JNK 抑制剂。

信号通路 >> MAPK/ERK信号通路 >> JNK

研究领域 >> 神经疾病

JNK

通过MTT测定法测量SR-3306或Tat-Sab对响应于氧化应激的细胞活力的影响。用100μMH2 O 2/FeSO 4处理的H9c2细胞活力约为40％,而向100μMH2 O 2/FeSO 4处理的细胞中加入500 nM SR-3306或500 nM SR3562可将活力提高至约90％,并添加10μM对于用100μMH2 O 2/FeSO 4处理的细胞,Tat-Sab肽使活力增加至约70％,而未处理细胞中的存活率为98％。对于原代人心肌细胞也发现了类似的结果[2]。

施用SR-3306 [10mg/kg /天(sc)14天]使SNpc中酪氨酸羟化酶免疫反应性(TH +)神经元的数量增加6倍,并减少纹状体中TH +末端的损失。 6-OHDA损伤的大鼠的相应侧仅接受载体(p <0.05)。此外,SR-3306 [10mg/kg /天(sc)14天]与给予载体的6-羟基多巴胺(6-OHDA)-损伤的动物相比,使d-苯异丙胺诱导的盘旋减少了87％。在第14天,SR-3306的稳态脑水平为347nM,这比该化合物的基于细胞的IC50高约2倍。最后,磷酸化c-jun(pc-jun)的免疫组织化学染色显示,SR-3306 [10 mg/kg /天(sc)持续14天]使黑质中免疫反应神经元数量减少2.3倍。 pars compacta(SNpc)相对于载体治疗的大鼠[1]。在瘦小鼠中,腹膜内(ip)或脑室内(icv)施用SR-3306减少食物摄入和体重。此外,SR11935的ip和icv施用发挥与SR3306类似的厌食作用,这表明JNK2或JNK3通过pan-JNK抑制介导厌食作用的方面。此外,每日腹腔注射SR-3306(7天)可以防止高脂肪饮食喂养时瘦小鼠的食物摄入量和体重增加,并且这种注射模式减少了饮食诱导的肥胖中的高脂肪摄入和肥胖(DIO) )老鼠[3]。

H9c2细胞和原代人心肌细胞在正常细胞培养条件（37℃和5％CO 2）下在补充有10％胎牛血清和青霉素/链霉素的DMEM中生长。为了确保细胞活跃生长，在我们的实验中仅使用约80％汇合的细胞和5和15代之间的细胞。在加入应激之前，将H9c2细胞和原代人心肌细胞暴露于500nM SR-3306,500nM SR-3562,0.01％DMSO载体对照，10μMTat-SabKIM1和10μMTat-scramble 30分钟。为了诱导H9c2细胞和原代人心肌细胞中的氧化应激和线粒体功能障碍，将100μM过氧化氢（H 2 O 2）/ FeSO 4或100μM过氧化氢（H 2 O 2）/ FeSO 4直接添加到细胞培养基中。将细胞暴露于H2O2 / FeSO4中，持续实验所示的时间[2]。

大鼠[1]使用四只Sprague-Dawley大鼠。 SR-3306以2.5或10 mg / kg的剂量在皮下微型泵中以5μL/ h的速率给药，并在第1,2,3,4,6,7,8,9,10,13天后24小时给药，并且收集了14个血液和第14天的大脑。产生等离子体，并将样品在-80℃下冷冻。将血浆和脑与乙腈（分别为1：5v / v或1：5w / v）混合。用探针尖端超声波仪对大脑样本进行超声处理以破碎组织，并通过LC-MS / MS分析样品的化合物水平。血浆化合物水平是根据血浆和脑水平的标准确定的，而不是空白脑基质中制定的标准[1]。小鼠[3]使用雄性，瘦性或DIO C57BL / 6小鼠。在光照期间，对小鼠进行预定的，每天2小时的水接入训练2周。在条件性味觉厌恶（CTA）测试的第一天，训练的小鼠给予新的0.15％糖精溶液以在前50分钟饮用，然后腹膜内注射SR-3306（30mg / kg或60 mg / kg）或载体。然后向注射的小鼠提供剩余的70分钟的水。第二天，允许小鼠在水和0.15％糖精之间选择50分钟。计算流体消耗量[3]。

[1]. Crocker CE, et al. JNK Inhibition Protects Dopamine Neurons and Provides Behavioral Improvement in a Rat 6-hydroxydopamine Model of Parkinson's Disease. ACS Chem Neurosci. 2011 Apr 20;2(4):207-212.

[2]. Chambers JW, et al. Inhibition of JNK mitochondrial localization and signaling is protective against ischemia/reperfusion injury in rats. J Biol Chem. 2013 Feb 8;288(6):4000-11.

[3]. Gao S, et al. Pharmacological Inhibition of c-Jun N-terminal Kinase Reduces Food Intake and Sensitizes Leptin's Anorectic Signaling Actions. Sci Rep. 2017 Feb 6;7:41795.

吡唑蒽酮(SP600125) | JNK-IN-8 | 番茄碱 | Tanzisertib | 黄芪甲苷IV | d-JNKI-1 | AS601245 | 3-[[4-(二甲基氨基)-1-氧代-2-丁烯-1-基]氨基]-N-[4-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]苯基]苯甲酰胺 | BI-78D3 | 2-[[2-[(3-羟基苯基)氨基]-4-嘧啶基]氨基]苯甲酰胺 | (1,3-苯并噻唑-2-基)[2-[4-[(吗啉-4-基)甲基]苄氧基]嘧啶-4-基]乙腈 | 3-[3-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-5-(1H-1,2,4-三唑-5-基)-1H-吲唑盐酸盐 | 人参皂苷Re | 异牡荆黄素 | 胡桃苷