3-[3-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-5-(1H-1,2,4-三唑-5-基)-1H-吲唑盐酸盐

CC-401 hydrochloride 是一种有效的 JNK 抑制剂,Ki 为 25 到 50 nM。

信号通路 >> MAPK/ERK信号通路 >> JNK

研究领域 >> 癌症

JNK:25-50 nM (Ki)

与其他相关激酶相比,CC-401对JNK的选择性至少为40倍,包括p38,细胞外信号调节激酶(ERK),κB激酶抑制剂(IKK2),蛋白激酶C,Lck,zeta相关蛋白70 kDa(ZAP70)。在基于细胞的测定中,1至5μMCC-401提供特异性JNK抑制。 CC-401,一种小分子,是所有三种JNK同种型的特异性抑制剂。 CC-401竞争性结合JNK中的ATP结合位点,导致抑制转录因子c-Jun的N-末端激活结构域的磷酸化。使用HK-2人肾小管上皮细胞系的渗透压在体外测试该抑制剂的特异性。 CC-401以剂量依赖性方式抑制山梨糖醇诱导的c-Jun磷酸化。然而,CC-401不能阻止山梨醇诱导的JNK,p38或ERK的磷酸化[1]。

与对照相比,在贝伐单抗和奥沙利铂治疗中适度诱导p-JNK的染色,并且在CC-401处理的样品中,p-cJun含量显着更低,与有效的JNK抑制一致。与CC-401联合治疗时DNA损伤适度升高[2]。从第7天到第24天的CC-401治疗减缓了蛋白尿的进展,与第14天和第21天的未治疗组和赋形剂组相比,蛋白尿显着减少。然而,在第21天,蛋白尿的程度仍然增加。 CC-401处理的大鼠在第5天与蛋白尿相比。载体和未处理组在第24天发生肾损伤,如血清肌酸酐的增加所示。这可以通过CC-401治疗来预防[3]。

将人HK-2近端小管上皮细胞培养在补充有10％FCS，10ng / mL EGF和10μg/ mL牛垂体提取物的DMEM / F12培养基中。对于Western印迹研究，将细胞接种到六孔板中并使其粘附过夜，并将培养基更换为仅补充有0.5％FCS的DMEM / F12 24小时，此时细胞汇合。 CC-401在柠檬酸（pH5.5）中制备，并在加入300mM山梨糖醇前1小时加入汇合细胞中，30分钟后用尿素-RIPA缓冲液收获细胞。进行三个实验，每个实验在每个条件下重复两次。对于ELISA实验，将HK-2细胞接种到24孔板中，使其粘附过夜，在含有0.5％FCS的DMEM / F12中培养24小时，然后用CC-401或载体孵育60分钟，然后用1刺激。 μM血管紧张素II（AngII）。 48小时后收获上清液，并使用商业ELISA试剂盒测定TGF-β1含量。进行三个实验，每个实验使用每个条件重复六次[1]。

小鼠[2]为了评估CC-401在小鼠异种移植模型中抗血管生成和奥沙利铂联合治疗中JNK信号传导抑制的功效，使用成年（8-10周龄）雌性严重联合免疫缺陷小鼠（CB17 SCID） 。为了产生肿瘤，将HT29细胞（1×10 6个细胞）皮下注射到小鼠的左侧腹中。当肿瘤达到约200mm 3时，将小鼠分成8组（每组8只小鼠）用贝伐单抗，奥沙利铂，CC401和贝伐单抗，奥沙利铂和CC-401的适当组合进行治疗。贝伐单抗治疗组中的小鼠每3天通过腹膜内注射接受5mg / kg贝伐单抗，持续21天。奥沙利铂治疗组每周腹腔注射5mg / kg奥沙利铂，持续2周。 CC-401治疗组每3天腹腔注射25mg / kg。联合治疗组接受贝伐单抗（每3天，5mg / kg），奥沙利铂（每周2周，5mg / kg）和CC-401（每3天，25mg / kg）。对照组腹腔注射生理盐水。每3天测量肿瘤体积和体重。计算肿瘤体积。肿瘤生长延迟计算为对照和治疗肿瘤从200到800mm3生长的时间差。对于肿瘤生长延迟计算，小鼠继续接受治疗直至肿瘤体积达到800mm 3。对于免疫组织化学，在第9天处理后处死小鼠用于肿瘤处理和染色。大鼠[3]使用雌性WKY大鼠（180-220g）。通过尾静脉注射绵羊抗大鼠GBM血清5天后（称为第0天）皮下注射弗氏完全佐剂中的5mg绵羊IgG免疫9或10只大鼠组。在该研究中，在抗GBM血清给药后7天，在9或10只大鼠的组中开始CC-401（200mg / kg /通过口服强饲法）或载体（柠檬酸钠）处理，并且此后每天持续两次直至动物。第24天处死。在抗GBM血清注射后第7天或第24天杀死未处理的另外一组大鼠作为对照。将动物饲养在代谢笼中22小时以在第5,14和21天收集尿液。在死亡时收集血液。进行血清肌酐和尿蛋白的分析。

[1]. Ma FY, et al. A pathogenic role for c-Jun amino-terminal kinase signaling in renal fibrosis and tubular cell apoptosis. J Am Soc Nephrol. 2007 Feb;18(2):472-84.

[2]. Vasilevskaya IA, et al. Inhibition of JNK Sensitizes Hypoxic Colon Cancer Cells to DNA-Damaging Agents. Clin Cancer Res. 2015 Sep 15;21(18):4143-52.

[3]. Ma FY, et al. Blockade of the c-Jun amino terminal kinase prevents crescent formation and halts established anti-GBM glomerulonephritis in the rat. Lab Invest. 2009 Apr;89(4):470-84.

吡唑蒽酮(SP600125) | JNK-IN-8 | 番茄碱 | Tanzisertib | 黄芪甲苷IV | d-JNKI-1 | AS601245 | 3-[[4-(二甲基氨基)-1-氧代-2-丁烯-1-基]氨基]-N-[4-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]苯基]苯甲酰胺 | BI-78D3 | 2-[[2-[(3-羟基苯基)氨基]-4-嘧啶基]氨基]苯甲酰胺 | SR-3306 | (1,3-苯并噻唑-2-基)[2-[4-[(吗啉-4-基)甲基]苄氧基]嘧啶-4-基]乙腈 | 人参皂苷Re | 异牡荆黄素 | 胡桃苷