Trilaciclib

Trilaciclib 是 CDK4/6 的抑制剂,对于 CDK4 和 CDK6 的 IC50 值分别为 1 nM 和 4 nM。

研究领域 >> 癌症

IC50: 1 nM (CDK4), 4 nM (CDK6)[1]

用Trilaciclib(G1T28)孵育24小时诱导强烈的G1细胞周期停滞(时间= 0)。在盐酸三氯硅氧烷冲洗后16小时,细胞重新进入细胞周期并证明细胞周期动力学与未处理的对照细胞相似。这些结果表明Trilaciclib引起短暂的,可逆的G1期阻滞。短暂的Trilaciclib介导的CDK4/6敏感细胞G1期细胞周期阻滞降低了与骨髓抑制相关的各种常用细胞毒性化疗药物的体外毒性[1]。

Trilaciclib(G1T28)处理在12小时时导致HSPC中增殖的强烈和剂量依赖性抑制,其中EdU掺入在施用后24小时以剂量依赖性方式返回接近基线水平。这些数据表明,单次口服剂量的Trilaciclib可以在体内以剂量依赖性方式在HSPC中产生可逆的细胞周期停滞。在依托泊苷治疗前30分钟给予100mg/kg Trilaciclib的小鼠仅表现出caspase-3/7活性的背景水平。这些数据表明,Trilaciclib可以在体内保护骨髓免受化疗诱导的细胞凋亡。数据表明,在5-FU之前用Trilaciclib治疗可能会降低5-FU诱导的HSPC化疗损伤,从而加速化疗后血细胞计数的恢复[1]。

用300nM Trilaciclib（G1T28）或DMSO（0.1％）处理HS68，WM2664和A2058细胞4,8,16或24小时。使用含有1×HALT蛋白酶和磷酸酶抑制剂的1×放射免疫沉淀测定缓冲液制备全细胞提取物。根据制造商的说明，使用试剂盒测定总蛋白质浓度。对于蛋白质印迹分析，如前所述处理蛋白质。评估总RB和β-微管蛋白作为上样对照的抗体[1]。

用最终浓度为10,30,100,300,1,000或3,000nM的Trilaciclib（G1T28）处理HS68细胞24小时。收获细胞并在冰冷的甲醇中固定。固定细胞用20μg碘化丙啶，50μgRNA酶A在PBS-CMF（无钙镁）+ 1％BSA，级分V中染色。样品在Cyan ADP分析仪上处理，并使用软件完成细胞周期分析[1 ]。

小鼠[1]将雌性无胸腺裸鼠植入H69细胞并监测直至治疗开始。一旦肿瘤达到可接受的大小（150mm 3），给小鼠服用Trilaciclib（100mg / kg）和拓扑替康的各种组合，每周5天，持续4周。在治疗后测量肿瘤长达60天。在60天之前达到过度肿瘤负荷的所有小鼠被人道地安乐死。使用已建立的方法处理和分析来自用盐酸三环素和/或托泊替康治疗的小鼠的血浆中的拓扑替康和三环素水平。

[1]. Bisi JE, et al. Preclinical Characterization of G1T28: A Novel CDK4/6 Inhibitor for Reduction of Chemotherapy-Induced Myelosuppression. Mol Cancer Ther. 2016 May;15(5):783-93.

N-[5-[(4-乙基-1-哌嗪基)甲基]-2-吡啶基]-5-氟-4-[4-氟-2-甲基-1-异丙基-1H-苯并咪唑-6-基]-2-嘧啶胺甲烷磺酸盐 | 瑞博西尼 | Dinaciclib | THZ1 | Roscovitine | THZ531 | 2-[[(噻吩-2-基)甲基]氨基]-5-[1-(喹啉-6-基)甲-(Z)-亚基]噻唑-4-酮 | 夫拉平度 | NVP-2 | 阿维西利 | CYC065 | 4-[2-甲基-1-异丙基-1H-咪唑-5-基]-N-[4-(甲磺酰基)苯基]-2-嘧啶胺 | GSK 3抑制剂IX | 肯帕罗酮 | SNS-032 (BMS-387032)