HAMNO

HAMNO 是复制蛋白 A (RPA) 的新型蛋白质相互作用抑制剂。

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RPA[1]

HAMNO是复制蛋白A(RPA)的新型蛋白质相互作用抑制剂。 RPA参与ATR/Chk1途径。单独的HAMNO在低微摩尔范围内抑制两种HNSCC细胞系中的集落形成。与单独的HAMNO相比,HAMNO与依托泊苷组合显着抑制集落形成。在UMSCC38细胞暴露于HAMNO后,以剂量依赖性方式发生增加的泛核γ-H2AX染色。癌症衍生的UMSCC38细胞以及另一种癌细胞系UMSCC11B具有显着的γ-H2AX染色,特别是在与20μMHAMNO孵育后。加入HAMNO后,UMSCC38和OKF4细胞均呈现增加的γ-H2AX染色,S期信号发生率增加最多[1]。

在小鼠中,HAMNO减缓UMSCC11B肿瘤的进展。 RPA32的Ser33(一种ATR底物)在用20μM依托泊苷处理2小时后高度磷酸化,其通过添加2μMHAMNO而降低,并且在较高浓度下几乎不存在,证明HAMNO的体内作用是ATR对RPA32磷酸化的抑制作用[1]。

在与HAMNO（2,20,50μM）孵育2小时后，在UMSCC38和OKF4细胞中监测细胞周期评估和γ-H2AX染色，并在70％乙醇中固定过夜。用PBS洗涤细胞，并在含有1％BSA，10％山羊血清和PS139-H2AX抗体的PBS中孵育过夜，洗涤并在山羊抗小鼠Alexa Fluor 647抗体中在室温下孵育30分钟。将细胞在50μg/ mL碘化丙啶和100μg/ mL RNase A中孵育30分钟，并分析每个样品10,000个细胞[1]。

在该研究中使用无胸腺裸鼠。通过单次皮下注射肿瘤细胞（在100mL无菌PBS中2至6×10 5个细胞）将UMSCC38和UMSCC11B细胞植入6周龄雌性小鼠中。通过用游标卡尺每日监测肿瘤体积来确定肿瘤的生长速率[肿瘤体积= 1/2（长度×宽度2）]。一旦肿瘤大小达到50mm 3，每天腹膜内施用依托泊苷（10mg / kg小鼠）和HAMNO（2mg / kg），持续3天。每天监测肿瘤大小，并比较所有实验组的肿瘤体积。每组至少使用三只小鼠[1]。

[1]. Glanzer JG, et al. RPA inhibition increases replication stress and suppresses tumor growth. Cancer Res. 2014 Sep 15;74(18):5165-72.

磺丁基-β-环糊精钠盐 | 环孢霉素A | 2-(3,6-二乙酰氧基-2,7-二氯-9H-氧杂蒽-9-基)苯甲酸 | 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐 | GW4869 | 乙莫克舍 | (2R,2'R,3R,3'R,4S,4'S,5R,5'R,6S,6'S)-6,6'-硫代双(4-(4-(3-氟苯基)-1H-1,-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-3,5-二醇) | Mitoquinone甲磺酸盐 | GSK2795039 | CBIC2 | BAPTA-AM | AP20187 | GKT137831 | D-(-)-荧光素 | 单响尾蛇毒蛋白