PF-1355

PF-1355 是一种有效的 MPO 抑制剂,用于血管炎的治疗。

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在剂量反应方式中,PF-1355抑制佛波酯刺激的人嗜中性粒细胞中的MPO活性,如通过牛磺酸氯化(EC50 =1.47μM)以及脂多糖处理的人血液测量残留MPO活性(EC50 =2.03μM)[ 1]。

口服PF-1355可降低血浆MPO活性,血管水肿,中性粒细胞募集和升高循环细胞因子。在抗肾小球基底膜疾病(以前称为Goodpasture病)的模型中,白蛋白尿和慢性肾功能障碍被PF-1355治疗完全抑制[1]。

将板用MPO捕获抗体（1：200）在4℃下包被过夜，用PBS洗涤，然后用PBS / 1％BSA封闭非特异性结合。将血浆或腹膜渗出物样品在PBS中1：4稀释，并将50μL在室温下一式三份加入孔中1小时。将板用含有0.05％吐温的PBS洗涤三次，然后用PBS洗涤。加入测定缓冲液（含有50nM磷酸盐缓冲液，pH7.4，含有140mM NaCl，10mMNa2NO2,40μMAmplexRed和10μMH2O2）的50μL，动力学读数和530 / 580nm的激发/发射波长。荧光板读数器。测定线性通常保持> 300秒（R2> 0.99），并且Vmax由相对荧光单位的变化除以时间以产生MPO活性。使用纯化的人MPO标准反向计算活性MPO。

动物在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中接受腹膜内注射4％巯基乙酸盐肉汤用于中性粒细胞募集者。 20小时后，给予PF-1355或载体（1％羟丙基甲基纤维素，0.5％2-氨基-2-羟甲基丙烷-1,3-二醇，0.5％醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯，pH9.5），然后腹膜内给药调理的酵母多糖或生理盐水。 3小时后，对小鼠实施安乐死并接受腹膜内注射2mL冷PBS。收集血液并在收集腹膜灌洗液之前剧烈摇动动物。

[1]. Zheng W, et al. PF-1355, a mechanism-based myeloperoxidase inhibitor, prevents immune complex vasculitis and anti-glomerular basement membrane glomerulonephritis. J Pharmacol Exp Ther. 2015 May;353(2):288-98.

磺丁基-β-环糊精钠盐 | 环孢霉素A | 2-(3,6-二乙酰氧基-2,7-二氯-9H-氧杂蒽-9-基)苯甲酸 | 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐 | GW4869 | 乙莫克舍 | (2R,2'R,3R,3'R,4S,4'S,5R,5'R,6S,6'S)-6,6'-硫代双(4-(4-(3-氟苯基)-1H-1,-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-3,5-二醇) | Mitoquinone甲磺酸盐 | GSK2795039 | CBIC2 | BAPTA-AM | AP20187 | GKT137831 | D-(-)-荧光素 | 单响尾蛇毒蛋白