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细胞染色剂黄绿素-AM

细胞染色剂黄绿素-AM用途

Calcein-AM是用于测定细胞活力的可以渗透细胞的荧光染料。

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细胞染色剂黄绿素-AM名称

[ CAS 号 ]:
148504-34-1

[ 中文名 ]:
细胞染色剂黄绿素-AM

[ 英文名 ]:
Calcein-AM

[英文别名 ]:

Calcein-AM

细胞染色剂黄绿素-AM生物活性

[ 描述 ]:

Calcein-AM是用于测定细胞活力的可以渗透细胞的荧光染料。

[ 相关类别 ]:

信号通路 >> 其他 >> 其他

染料试剂

研究领域 >> 癌症

[体外研究]

用于染色活细胞的钙黄绿素-AM染料显示在37℃下4小时内具有低于15％的低自发渗漏率。由钙黄绿素-AM染色的靶标的稀释度与测量的荧光值具有线性关系。 NK细胞,LAK和CTL很容易通过该微量测试检测到。使用测试系统[1]可以很容易地进行杀灭定量和动力学分析。 Calcein-AM与pH无关,保留更好,光稳定性更高。此外,钙黄绿素-AM的高水平细胞内保留及其掺入后的低水平释放排除了可能的细胞单层标记并允许其用于细胞-细胞相互作用测定。此外,通过微孔板荧光读数器可以很容易地检测和测量明亮的荧光[2]。钙黄绿素-AM是一种高度亲脂性的活体染料,可快速进入活细胞,通过细胞内酯酶转化为钙黄绿素,产生强烈的绿色(530-nm)信号,并由具有完整质膜的细胞保留。对于具有受损膜完整性的死亡或受损细胞或来自表达多药抗性蛋白(MRP)的细胞,未水解的底物及其荧光产物从细胞中快速挤出。钙黄绿素-AM测定已被用于评估细胞活力,细胞毒性和tp定量细胞凋亡[3]。

[体内研究]

钙黄绿素-AM被发现适用于体内研究,因为它对细胞功能没有有害影响,实际上是细胞活力的标志[2]。

[细胞实验]

K562，Daudi和Chang肝细胞用钙黄绿素-AM标记。 Calcein-AM的激发和发射波长分别为496nm和520nm。用于检测钙黄绿素-AM绿色荧光的滤光片/镜组合包括490nm激发和带有二向色镜的520nm发射滤光片。测试孔和对照孔之间的自动荧光读数的差异决定了结果[1]。使用钙黄绿素-AM建立简单且灵敏的细胞 - 细胞粘附微板测定。该过程包括三个步骤：在短暂的孵育期（30分钟）内用足够浓度的钙黄绿素-AM（20μM）标记淋巴细胞;每孔2×105标记的淋巴细胞与微量滴定板中生长的融合角质形成细胞或成纤维细胞单层粘附90分钟;最后，利用新的冷光微荧光测量系统测量荧光信号[2]。将细胞在含有0.05％叠氮化钠的PBS缓冲液（pH7.4）中的1mL 1％皂苷溶液中温育15分钟。在皂苷透化后，将含有0.1％皂苷和0.05％叠氮化钠的PBS缓冲液中的4×105RBC悬浮液（37℃，黑暗中45分钟）与钙黄绿素-AM孵育至终浓度为5μM，洗涤三次用含有0.1％皂苷和0.05％叠氮化钠的相同PBS缓冲液，通过流式细胞术分析细胞活力[3]。

[参考文献]

[1]. Wang XM, et al. A new microcellular cytotoxicity test based on calcein-AM release. Hum Immunol. 1993 Aug;37(4):264-70.

[2]. Braut-Boucher F, et al. A non-isotopic, highly sensitive, fluorimetric, cell-cell adhesion microplate assay using calceinAM-labeled lymphocytes. J Immunol Methods. 1995 Jan 13;178(1):41-51.

[3]. Bratosin D, et al. Novel fluorescence assay using calcein-AM for the determination of human erythrocyte viabilityand aging. Cytometry A. 2005 Jul;66(1):78-84.

[相关活性小分子]

细胞染色剂黄绿素-AM物理化学性质

[ 密度 ]:
1.5±0.1 g/cm3

[ 沸点 ]:
982.7±65.0 °C at 760 mmHg

[ 分子式 ]:
C₄₆H₄₆N₂O₂₃

[ 分子量 ]:
994.86

[ 闪点 ]:
548.1±34.3 °C

[ 精确质量 ]:
994.249146

[ LogP ]:
3.49

[ 蒸汽压 ]:
0.0±0.3 mmHg at 25°C

[ 折射率 ]:
1.611

[ 储存条件 ]:
-20°C

细胞染色剂黄绿素-AM安全信息

[ 个人防护装备 ]:
Eyeshields;Gloves;half-mask respirator (US);multi-purpose combination respirator cartridge (US)

[ 危害码 (欧洲) ]:
Xi

[ 风险声明 (欧洲) ]:
36/37/38

[ 安全声明 (欧洲) ]:
26-36

[ 危险品运输编码 ]:
NA 1993 / PGIII

细胞染色剂黄绿素-AM文献

Sclerotium rolfsii lectin induces stronger inhibition of proliferation in human breast cancer cells than normal human mammary epithelial cells by induction of cell apoptosis.

PLoS ONE 9(11) , e110107, (2014)

Sclerotium rolfsii lectin (SRL) isolated from the phytopathogenic fungus Sclerotium rolfsii has exquisite binding specificity towards O-linked, Thomsen-Freidenreich (Galβ1-3GalNAcα1-Ser/Thr, TF) assoc...

Developmental tightening of cerebellar cortical synaptic influx-release coupling.

J. Neurosci. 35(5) , 1858-71, (2015)

Tight coupling between Ca(2+) channels and the sensor for vesicular transmitter release at the presynaptic active zone (AZ) is crucial for high-fidelity synaptic transmission. It has been hypothesized...

Establishment of lipofection for studying miRNA function in human adipocytes.

PLoS ONE 9(5) , e98023, (2014)

miRNA dysregulation has recently been linked to human obesity and its related complications such as type 2 diabetes. In order to study miRNA function in human adipocytes, we aimed for the modulation o...

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