Nemorexant

Nemorexant 是一种 orexin 受体拮抗剂,详细信息请参考专利文献 WO2015083094A1 中的化合物 example 7。作用于 Ox1 和 Ox2 受体,IC50 分别为 2 nM 和 3 nM。

信号通路 >> G 蛋白偶联受体/G 蛋白 >> 食欲素受体(OX受体)

研究领域 >> 神经疾病

IC50: 2 nM (Ox1 receptor ), 3 nM (Ox2 receptor)[1]

Nemorexant(化合物实施例7)是食欲素受体拮抗剂,对于Ox1受体和Ox2受体,IC50分别为2nM和3nM [1]。

分别表达人食欲素-1受体和人食欲素-2受体的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞在含有300μg/ mL G418,100U / mL的培养基（含有L-谷氨酰胺的Ham F-12）中生长。青霉素，100μg/ mL链霉素和10％热灭活的胎牛血清（FCS）。将细胞以20,000个细胞/孔接种到384孔黑色透明底无菌平板中。将接种的平板在37℃，5％CO 2中孵育过夜。将作为激动剂的人食欲素-A制备成在MeOH：水（1：1）中的1mM储备溶液，在含有0.1％牛血清白蛋白（BSA），NaHCO 3：0.375g / L和20mM HEPES的HBSS中稀释，用于最终浓度为3nM的测定。将拮抗剂制备成DMSO中的10mM储备溶液，然后使用DMSO在384孔板中稀释，然后将稀释液转移到含有0.1％牛血清白蛋白（BSA），NaHCO 3：0.375g / L和20mM HEPES的HBSS中。 。在测定当天，50μL染色缓冲液（HBSS含有1％FCS，20mM HEPES，NaHCO3：0.375g / L，5mM丙磺舒和3μM荧光钙指示剂fluo-4 AM（1mM储备溶液）在每个孔中加入含有10％pluronic的DMSO。将384孔细胞板在37℃，5％CO 2中孵育50分钟，然后在室温下平衡30分钟，然后测量。在荧光成像板内将读数器，拮抗剂以10μL/孔的体积加入板中，孵育120分钟，最后加入10μL/孔的激动剂。以1秒的间隔测量每个孔的荧光，并测量每个荧光峰的高度。将大约EC70（例如5nM）的食欲素-A与载体代替拮抗剂诱导的荧光峰的高度进行比较，确定IC50值[1]。

[1]. BOSS, Christoph, et al. USE OF BENZIMIDAZOLE-PROLINE DERIVATIVES. WO2015083094A1.

1-(2-甲基苯并[D]噁唑-6-基)-3-(1,5-萘啶-4-基)脲 | 莱博雷生 | 阿莫伦特盐酸盐 | Filorexant | Orexin 2 Receptor Agonist | TCS-OX2-29 | MK-1064 | SB-674042 | GSK1059865 | IPSU | SB-408124 | MK-3697 | 食欲肽B (老鼠) ≥97% | SB-649868 | TCS 1102