β-的Apo-13胡萝卜素酮

β-Apo-13-carotenone (D'Orenone) 是天然存在的β-阿法菌素,是RXRα的拮抗剂。

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β-apo-13-胡萝卜素被鉴定为大鼠肠粘膜匀浆中β-胡萝卜素的酶促裂解产物。发现β-apo-13-胡萝卜素通过9-顺式-视黄酸拮抗RXRα的活化,并且在低至1nM的浓度下有效。分子模拟研究表明,β-apo-13-胡萝卜素使分子相互作用成为RXRα的拮抗剂[1]。 β-apo-13-胡萝卜素竞争9cRA与RXRα的结合,其亲和力(7-8nM)与9cRA本身相同。 β-apo-13-胡萝卜素以与已知拮抗剂UVI3003相似的效率拮抗全长hRXRα的9cRA活化。 β-apo-13-胡萝卜素诱导RXRα转录沉默四聚体的形成,但不抑制共激活因子募集到分离的LBD中[2]。 β-apo-13-胡萝卜素的摄取和/或代谢不允许这些β-胡萝卜素代谢物在细胞中积累。 β-apo-类胡萝卜素治疗诱导3T3-L1脂肪细胞标志物基因表达[3]。

将Cos-1细胞在无血清培养基中转染，每孔含有以下列量混合的三种质粒，0.05μgpRL-TK，2μgpRXRE-荧光素酶，2.5μgpSG5-RXRα，一式三份。转染后，将板在37℃，5％CO 2中温育4小时。然后将介质更改为完成DMEM。用活性炭处理炭剥离的FBS以吸附包括类维生素A的亲脂性化合物。转染后20小时，用测试化合物（β-Apo-13-胡萝卜素）处理细胞，所述测试化合物仅溶于乙醇或0.1％乙醇中另外24小时。用PBS洗涤细胞一次，并通过与500μL被动裂解缓冲液在室温下孵育15分钟进行裂解。然后使用试剂盒[1]测定20μL等份的细胞裂解物的荧光素酶活性。

[1]. Eroglu A, et al. The eccentric cleavage product of β-carotene, β-apo-13-carotenone, functions as an antagonist of RXRα. Arch Biochem Biophys. 2010 Dec 1;504(1):11-6.

[2]. Sun J, et al. β-Apo-13-carotenone regulates retinoid X receptor transcriptional activity through tetramerization of the receptor. J Biol Chem. 2014 Nov 28;289(48):33118-24.

[3]. Wang CX, et al. Actions of β-apo-carotenoids in differentiating cells: differential effects in P19 cells and 3T3-L1 adipocytes. Arch Biochem Biophys. 2015 Apr 15;572:2-10.

磺丁基-β-环糊精钠盐 | 环孢霉素A | 2-(3,6-二乙酰氧基-2,7-二氯-9H-氧杂蒽-9-基)苯甲酸 | 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐 | GW4869 | 乙莫克舍 | (2R,2'R,3R,3'R,4S,4'S,5R,5'R,6S,6'S)-6,6'-硫代双(4-(4-(3-氟苯基)-1H-1,-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-3,5-二醇) | Mitoquinone甲磺酸盐 | GSK2795039 | CBIC2 | BAPTA-AM | AP20187 | GKT137831 | D-(-)-荧光素 | 单响尾蛇毒蛋白